天阳复脉汤对糖尿病周围神经病变小鼠临床疗效及其对JNK和p-JNK蛋白表达的影响

目的:探索天阳复脉汤对糖尿病周围神经病变小鼠临床疗效及其对JNK和p-JNK蛋白表达的影响。方法:选用7周的db/db雄性小鼠120只,随机分成模型组、硫辛酸组和天阳复脉汤高、中、低剂量组等五组,每组24只。选取同窝生7周龄db/m雄性小鼠24只为正常组。模型组和正常组给予等体积蒸馏水,而硫辛酸组灌胃给药,剂量为78 mg/kg,高剂量组为6.8 g/kg、中剂量组为3.4 g/kg、低剂量组为1.7 g/kg。对比和评估六组小鼠足底热敏反应时间、运动神经传导速度、血清因子及JNK及p-JNK蛋白表达等指标。结果:与正常组和模型组相比,硫辛酸组和天阳复脉汤组小鼠足底热敏反应时间均显著缩短,MNCV速度均显著提高,血清TNF-α和IL-1β水平明显降低,JNK和p-JNK蛋白表达显著下降,差异均具有统计学意义(P0.05)。结论:天阳复脉汤应用于糖尿病周围神经病变小鼠,可有效增加其运动神经传导速度,缩短其足底热敏反应时间,降低血清TNF-α和IL-1β浓度,进而下调JNK和p-JNK蛋白表达。     

医疗紧急情况下知情同意的代理相关法律问题

传统的知情同意原假设是,如果病人没有充分的自主,医疗干预便不能实施,医师在知情同意中的重心是建议者而非治疗者的角色。但是在医疗紧急情况下,为着生命优先、救死扶伤的原则,知情同意严格程序形式需要作出让步,病人的昏迷状态或者濒危状态使得其无法具有自主的能力,就需要通过代理实现同意功能的延伸。紧急情况下将会遇到的非本人的其他主体能否代理、有无能力代理、会否滥用代理权等一系列相关的法律问题。     

酿酒酵母与糖化酵母的种间原生质体融合及其融合子的鉴定

本文报道了酒精生产菌株K氏酿酒酵母Sacchormyces cerevisiae var.ellipsoideus的HUK-1(his-,二倍体,但在我们所试的5种产孢培养基上均不产孢)与糖化酵母Sac—charomyces diastaticus 7c(arg-,a)的种间原生质体融合,其营养标记互补的融合频率约是2．07×10^-6—3．40×10^-5。这些融合子曾在选择培养基MMs或Mmo上连续传代10次,以促进两亲核的融合。融合子的酒精发酵特性,细胞形态、体积大小、DNA含量、繁殖速率、发酵强度以及产孢能力等方面的观察和测定结果表明,均不同于双亲菌株。用显微操作器解剖了个别原养型融台子HU—KDF—185的4孢子子囊,在获得的93个单孢株中,其淀粉发酵特性和遗传标记均有双亲类型的分离或重组现象。上述实验结果充分证明了不同倍性的酵母之间可以通过原生质体融合获得种间杂种。     

双硫仑治疗小鼠肥胖的安全性和有效性评价

摘要 目的：观察双硫仑治疗小鼠肥胖的安全性和有效性。方法：取6周龄C57BL/6J雄性小鼠10只,高脂饲料诱导肥胖后,随机分为双硫仑组（双硫仑玉米油溶液,300 mg/(kg?d）和对照组（等量玉米油）,每组5只小鼠。每日灌胃给药1次,连续2周,期间仍给与高脂饲料。监测小鼠食物消耗量和体重。给药结束后取小鼠血清、附睾白色脂肪垫、肩胛间区棕色脂肪和肝脏。白色、棕色脂肪和肝脏进行HE染色,观察细胞形态。电镜下观察棕色脂肪细胞内的脂滴和线粒体。Realtime-qPCR法检测棕色脂肪组织中Ucp1、Fabp4、Prdml6和Cidea的mRNA相对表达量,Western blot法检测Ucp1的蛋白表达量。检测血清中转氨酶ALT和AST含量。取8周龄C57BL/6J雄性小鼠10只,随机分为双硫仑组（双硫仑300 mg/(kg?d）和对照组（等量玉米油）,每日灌胃1次,连续2周。给药结束后进行棕色脂肪和肝脏HE染色并检测血清中ALT和AST含量。取8周龄C57BL/6J雄性小鼠10只,随机分为双硫仑组（双硫仑300 mg/(kg?d）和对照组（等量玉米油）,每日灌胃1次,连续4周,进行肝脏HE染色并检测血清中ALT和AST含量。取孕13.5天的C57BL/6J胚胎小鼠,进行成纤维细胞原代培养,分为双硫仑组（双硫仑5 mg/L）和对照组（等量DMSO）并诱导分化为棕色脂肪细胞。分化8天后进行油红O染色,观察脂滴形成情况,检测Ucp1、Fabp4、Prdml6和Cidea的mRNA相对表达量和Ucp1的蛋白表达量。结果：肥胖小鼠给药过程中,双硫仑组和对照组的进食量及体重变化并无明显差别（P＞0.05）。给药结束后,两组白色脂肪细胞大小无明显差别。双硫仑组小鼠棕色脂肪细胞直径和细胞内脂滴明显增大（P＜0.05）,脂滴数量、线粒体形态及数量无明显差别（P＞0.05）。双硫仑组小鼠棕色脂肪中Cidea和Prdm16的mRNA表达减少（P＜0.05）。正常体重小鼠双硫仑给药2周后棕色脂肪细胞脂滴也增大。细胞实验结果显示,双硫仑组脂滴形成明显减少,Ucp1、Cidea、Prdm16的mRNA表达明显减少（P<0.05）;Ucp1的蛋白表达明显减少（P<0.05）。肥胖与正常小鼠双硫仑给药2周后均出现明显的肝细胞水肿,血清中ALT和AST升高（P<0.05）,正常小鼠给药4周后仍有明显肝细胞水肿,ALT和AST升高（P<0.05）。结论：短期使用双硫仑对饮食诱导的肥胖小鼠无明显减肥作用;双硫仑在体内、外均可抑制小鼠棕色脂肪细胞的分化。短期使用双硫仑可引起肝损害。双硫仑用于减肥治疗的安全性及有效性尚不够理想。     

Fe-MOF纳米探针在乳腺癌光动力增敏铁死亡及MR激活成像中实验研究

摘要 目的：探讨肿瘤酸性微环境响应铁基金属有机框架（Iron-containing Metal Organic Frameworks, Fe-MOF）纳米探针对乳腺癌光动力增敏铁死亡及其体外MR T1激活效应。方法：制备Fe-MOF纳米探针,用透射电子显微镜（Transmission Electron Microscope, TEM）及原子力显微镜（Atomic Force Microscope, AFM）对其形态进行表征;采用3,3'',5,5''-四甲基联苯胺（TMB）及5,5''-二硫双（2-硝基苯甲酸）（DTNB）评价其在溶液水平ROS生成及GSH消耗能力;通过细胞毒性实验（MTT）测定纳米探针在暗毒性及光毒性条件下对4T1乳腺癌细胞的光动力增敏铁死亡的效能;将4T1细胞与Fe-MOF共孵育后,协同激光照射处理,使用荧光显微镜观察其活性氧（Reactive Oxygen Specis, ROS）、脂质过氧化物（Lipid PerOxide, LPO）的生成以及细胞活/死染色情况;观察纳米探针在不同的pH条件下T1加权成像的激活效应,并在细胞水平测量不同时间点的T1激活效能。结果：制备的Fe-MOF纳米探针呈针状结构,厚度约为44 nm;在体外溶液水平可有效促进ROS的生成及LPO的消耗;荧光显微镜结果显示Fe-MOF触发的铁死亡效应联合光动力治疗可有效促进细胞内ROS和LPO的生成,以及肿瘤细胞死亡率升高（P<0.001）;MR成像结果显示,在酸性条件下纳米探针的T1信号可被特异性激活,pH 5.0条件下r1弛豫率为4.954 mM^-1s^-1,具有较好pH响应性及细胞水平时间依赖性激活效能。结论：pH响应诊疗一体化的Fe-MOF纳米探针可实现乳腺癌的光动力增敏铁死亡效能以及MR微环境响应激活成像。     

是学校又是先进技术推广站

我们铜山汉王乡第一农业中学,在学生和群众中已经扎了根。学生爱校如家,学习和劳动都很积极。出席率经常是百分之百,从开学到现在一个没有减少。群众对学校也很爱护,称学校是“先进技术推广站”,称学生是“技术指导员、党的中心工作宣传员、文化技术学校的好教员”。为了教学为生产服务,推广新技术,今年3月一开学,社里就拨给我们九亩生产实习园地。其中五亩万     

FGFR抗体类肿瘤药物的研发现状及发展趋势

<正>侧重介绍近年来FGFR抗体类抑制剂的研究进展,主要综述了FGFR在肿瘤发生发展中的信号通路和关键作用,FGFR抗体类抑制剂的研究现状、发展趋势以及它们的临床研究进展。     

15种獐牙菜属植物中主要药用成分的高效液相色谱测定

对青藏高原和云贵高原的15种獐牙菜属植物进行了3种苦味苷,即獐牙菜苦苷(swertiamarin)、龙胆苦苷(gentiopicroside)、苦龙苷(amarogentin)、一种黄酮苷-当药黄素(swertisin)、及5种口山酮苷-芒果苷(mangiferin)、当药醇苷(swertianolin)、7-O-[a-L-吡喃鼠李糖-(1→2)-β-D-吡喃木糖]-1,8-二羟基-3-甲氧基口山酮(7-O-[a-L-rhamnopyranosyl-(1-2)-β-D-xylopyranosyl]-1,8-dihydroxy-3-methoxyxanthone)、7-O-β-D-吡喃木糖-1,8-二羟基-3-甲氧基口山酮(7-O-β-D-xylopyranosyl-1,8-dihydroxy-3-methoxyxanthone)、3-O-β-D-吡喃葡萄糖-1,8-二羟基-5-甲氧基口山酮(3-O-β-D-glucopyranosyl-1,8-dihydroxy-5-methoxyxanth-one)等9种主要药效成分同时进行了高效液相色谱的含量测定(Kromasil C18柱,甲醇一水梯度洗脱,二级管阵列检测);并对其主要药效成分的分布进行了比较。     

金线莲抑制斑马鱼黑色素形成的活性组分筛选及机理研究

为探索金线莲中对黑色素形成具有抑制效果的活性组分,本研究对金线莲进行分离、提取,获得总提组、醇沉组与醇提组,利用斑马鱼筛选金线莲具有美白作用的活性组分。将受精后0.75 h的斑马鱼胚胎分别暴露于不同浓度的金线莲总提组、醇沉组、醇提组,72 h时观察结果表明,金线莲醇提物能有效抑制斑马鱼胚胎黑色素和黄色素沉着,浓度越高抑制效果越明显,且不影响胚胎生长发育。进一步采用半定量PCR和整胚原位杂交技术定量和定性地检测黑色素形成相关基因mRNA表达,结果表明金线莲醇提物可以有效降低silv、tyr和tyrp1a等黑色素合成相关基因的转录水平,且具有浓度依赖关系。通过检测酪氨酸酶活性显示,加入醇提物的实验组其酪氨酸酶活性随着处理浓度升高而逐渐降低。此外,在黑色素已经大量形成的情况下,金线莲醇提物仍可通过下调黑色素合成相关基因的mRNA表达及酪氨酸酶活性来抑制黑色素的形成,并且这种抑制效果可在金线莲醇提物撤除后得到恢复。上述实验结果表明,金线莲醇提物能显著抑制斑马鱼黑色素的形成,本文为金线莲在美白产品领域的开发和应用方面提供了有力支撑。     

两种基因编码的探针特异性检测小鼠脑5-HT信号的比较

摘要 目的：五羟色胺（5-HT）对中枢神经系统发挥着重要的调控作用,其功能失调与许多精神类疾病密切相关,因此开发能实时灵敏检测5-HT的工具对研究此类疾病及研发靶向药物至关重要。最近新开发的iSeroSnFR和GRAB_5-HT1.0两类5-HT荧光探针,具有细胞特异性、反应灵敏以及高时空分辨率等显著优势,已经成为深入探究5-HT作用机制的有力工具。本研究旨在探究荧光探针iSeroSnFR和GRAB_5-HT1.0哪种能更有效地检测5-HT递质释放及动态变化,从而为后续优化5-HT荧光探针和利用这一有力工具解析神经疾病中的递质异常提供新思路。方法：将iSeroSnFR或GRAB_5-HT1.0探针的基因序列插入到Sindbis病毒表达载体,然后把病毒分别转染到培养的小鼠离体脑片的海马CA1区,比较两种探针在神经元中的表达差异;并检测其对外源性5-HT药物诱导产生的荧光反应。另外,将上述病毒转染到急性小鼠脑片中缝核（DRN）区,给与电刺激检测两种探针响应内源5-HT释放的荧光信号差异。结果：在转染iSeroSnFR的海马CA1区神经元中均有荧光表达,但细胞边界不清晰;而转染了GRAB_5-HT1.0的神经元细胞膜上表达有强烈的绿色荧光信号。用1 μM 5-HT处理培养的小鼠脑片海马CA1神经元时,iSeroSnFR探针没有明显的荧光强度变化;而GRAB_5-HT1.0探针产生的荧光强度显著增强;用1 mM 5-HT处理时,iSeroSnFR探针产生一定强度的荧光反应,但响应幅度弱于GRAB_5-HT1.0探针。另外,利用上述病毒转染急性小鼠脑片DRN区,通过电刺激诱导内源性5-HT释放,发现仅在表达GRAB_5-HT1.0探针的DRN神经元中观察到显著增强的荧光反应;而iSeroSnFR探针几乎未产生明显荧光变化。结论：在小鼠脑中,GRAB_5-HT1.0荧光探针对外源性及内源性的5-HT的亲和力更高、灵敏度更强。