谷氨酸棒杆菌YILW苏氨酸脱水酶基因的克隆表达及酶学性质

将L-异亮氨酸生产菌谷氨酸棒杆菌(Corynebacterium glutamicum YILW)苏氨酸脱水酶(threonine de-hydratase,TD)的编码基因ilvA在大肠杆菌中进行异源表达及进行初步的酶学性质研究。分别以C.glutamicum ATCC13032、YILW的基因组DNA为模板,利用PCR技术扩增出苏氨酸脱水酶的编码基因ilvA,测序获得编码序列。利用质粒PET-His将该基因在大肠杆菌BL21(DE3)中进行重组表达、金属螯合纯化,对其酶学性质进行初步研究。结果显示C.glutamicum YILW编码基因序列与已报道的ilvA序列相差5个碱基,相似度为99.6%,第383位氨基酸由苯丙氨酸突变为缬氨酸。酶学性质研究表明:重组酶YilwTD最适反应温度为32℃,在20~55℃范围内该酶较稳定,最适pH为6.7,该酶底物专一性强,对最适底物苏氨酸的米氏常数Km=8.32 mmol/L,最大反应速度Vmax=3.18×104U/mg,与野生型酶相比,突变(F383V)后可显著降低终产物对酶的反馈抑制作用。为揭示突变对苏氨酸脱水酶活性的影响及进一步利用基因工程技术改造L-异亮氨酸生产菌,提高L-异亮氨酸产量奠定了基础。     

广东几种鸟类寄生线虫的研究

1.本文描述由10种鸟类采得的19种线虫,分隶於9科,12属,内有2新属和8新种。 2.各旧种除了有附图以外,如有和其他作者记载不同的地方,亦加以比较和讨论。 3.各新属新种根据在广东采得的标本加以详细的描绘,并和其他类似种比较和讨论。 4.Annulofilaria,cheni gen.et sp.nov.有一些特征很像Onchocercinae亚科的特征,但亦有些不相同的地方,如寄生部位,体表的环状增厚等,因此我们把Oncho-cercinae亚科的定义略加修改,并将这一新属新种放在这一亚科内。     

紫花曼陀罗悬浮培养细胞转化对羟基苯甲醛生产天麻素

利用紫花曼陀罗细胞悬浮培养转化外源对羟基苯甲醛合成天麻素,并应用多种色谱技术进行分离纯化,根据转化产物的理化性质和光谱数据分析鉴定结构。实验表明,紫花曼陀罗细胞成功将对羟基苯甲醛转化为天麻素(Ⅱ),同时也得到了由对羟基苯甲醛生成天麻素的转化中间体对羟基苯甲醇(Ⅰ)。在培养基中添加0.1mg/L的水杨酸能显著提高细胞对外源对羟基苯甲醛的糖基化率,而保持气升式发酵罐(25-L)罐内压力为低压(0.001MPa)也能提高细胞对外源对羟基苯甲醛的糖基化率。实验证明,紫花曼陀罗细胞悬浮培养能有效转化对羟基苯甲醛合成天麻素。     

塔里木河下游胡杨径向生长与地下水的关系

本文通过分析塔里木河下游地区地下水位与胡杨径向生长量的相互关系,建立胡杨径向生长量随地下水位变化的函数模型,并从数理统计学的角度验证了胡杨生长的胁迫水位和临界水位。结果表明：1）随着地下水位的下降,胡杨径向生长量的均值逐渐减小。2）胡杨径向生长量与地下水位之间存在极显著的回归关系,其最佳回归模拟函数为四次多项式Y=0.003X4-0.080X3 0.731X2-3.060X 6.934,判定系数R2为0.857,P值为0.0001。3）通过分析可知：胡杨生长的胁迫水位是4.71 m,临界水位是8.62 m。胡杨正常生长的水位区间为0.5—4.71 m,受到胁迫的水位区间为4.71 m—8.62 m,当地下水位大于8.62 m时,胡杨将会呈现出衰败景象,此时,胡杨径向生长量的变化率逐渐向0接近,表明胡杨径向生长趋向停止。     

不同丰容方式对圈养成年山魈行为影响的试验

于2011年对成都动物园饲养的8只成年圈养山魈进行3种食物丰容、2种环境丰容及5种食物与环境丰容试验,考察不同形式丰容方式对圈养山魈行为的影响.结果表明,第一期丰容试验(B)后,山魈的休息行为、运动行为和玩耍行为增加极显著(P＜0.01),而交往行为和取食行为减少极显著(P＜0.01);第二期丰容(D)后,休息行为减少极显著,交往行为增加显著,运动行为、采食行为和玩耍行为增加极显著.山魈对纯轮胎丰容方式的接触次数最少,而对食物丰容方式接触次数更多.有两种丰容方式(纯轮胎丰容和纯轮胎+纯麻袋丰容)仅持续很短的时间即失去作用,其余的丰容方式一般在第8d出现兴趣下降的现象,因此建议每种丰容方式的持续使用时间不超过8d.     

西洋参发根的诱导及不同外源物质对发根生长和皂苷含量的影响

利用发根农杆菌A4菌株在西洋参根外植体上直接诱导产生发根,并分析不同浓度的植物激素6-BA、NAA,前体物醋酸镁(Mg(Ac)2)、L-亮氨酸和诱导子茉莉酸甲酯(MJA)、水杨酸(SA)对西洋参(Panax quinquefolium L.)发根生长和皂苷含量的影响。同时,研究MJA与SA组合作用对皂苷含量的影响。采用高效液相色谱法测定发根中单体皂苷Rb1的含量。结果显示,适宜浓度的外源物质均可促进皂苷含量的增加,MJA尤其明显。     

拷问双螺旋

DNA真的完全是右旋的双螺旋吗（plectonemic）？作者提出了一些疑问，并用实验证明质粒分子的拓扑环挠数可以为零，这是经典双螺旋结构不能解释的现象。据此实验观察以及若干其他证据，作者提出了关于DNA双螺旋结构的假说——左右旋共存的双螺旋（ambidextrous），供研究和讨论。希望读者能革除先入之见，用开放的态度来独立思考、分辨是非、认真审视本文中不见于教材的新观点，从而作出自己明智的判断。     

贵州悬钩子属一新种

荔波悬钩子新种图１ＲｕｂｕｓｌｉｂｏｅｎｓｉｓＴ．Ｌ．Ｘｕ，ｓｐ．ｎｏｖ．ＳｐｅｃｉｅｓＲ．ｘｉｃｈｏｕｅｎｓｉＹｕｅｔＬｕａｆｉｎｉｓ，ｓｅｄｐｌａｎｔｓｓｐａｒｓｅｆａｌｃａｔｏａｃｕｌｅａｔａ，ｐａｎｉｃｕｌｉｓｔｅｒｍｉｎａｌｉｓｄｅｎｓｉｆ...     

睾酮假单胞菌3α-羟类固醇脱氢酶基因的质粒载体构建及表达

从土壤中分离睾酮假单胞菌,提取其基因组DNA,PCR扩增3α-羟类固醇脱氢酶（3α-hsd）基因,将扩增产物用NdeⅠ/BamHⅠ消化,切下目的基因片段克隆到质粒pET-15b中构建重组pET-15b.将重组pET-15b转化入E.coli DH5α中,经酶谱分析和测序,鉴定出正确的重组质粒pET-15b.将重组pET-15b转化入宿主菌E.coli BL21(DE3) pLysS中,用硫代半乳糖苷(IPTG)进行诱导表达.提取细菌总蛋白质进行SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)分析并测定酶活性.粗提物中酶活性高达2.45×10⁵ U/L.利用重组蛋白中的6个组氨酸(His)组成的“标签”进行亲和层析,经一步金属螯合亲和层析纯化后,重组蛋白在SDS-PAGE上呈现出均一的单一条带,回收率达68%.活性和纯度均较高的目的蛋白3α-HSD的获得,为血清总胆汁酸酶循环法测定奠定了基础.     

天山北部拟南芥生存群落物种多样性的空间格局

在对新疆天山北部浅山地带拟南芥（Arabidopsis thaliana）生存分布调查的基础上,研究了13个拟南芥样地（生存群落）的综合物种多样性格局特征及环境因子对其空间格局的影响。结果表明,各样地物种多样性指数差异明显。天山西支婆罗科努山的伊犁地区多样性最大,塔尔巴哈台山额敏地区其次,天山中部8个样地多样性较低且变幅较大,阿尔泰山阿勒泰地区多样性指数处于中等水平,总体上,13个拟南芥样地物种多样性空间格局异质性明显;各样地拟南芥及其邻近种种类及数量不一,以天山中部最多;物种多样性空间格局与降水量变化关系拟合较好,随降水量增加而增大;物种多样性指数的DCCA排序表明,除降水量外,坡向、有效钾及电导率等微环境因子也是影响物种多样性空间格局的重要因素。