特异切割苹果锈果类病毒的核酶基因的克隆和转录物的体外活性测定

根据锤头型核酶的作用模式 ,设计、合成和克隆了特异切割苹果锈果类病毒ASSVd正链 (194-196位点 )或负链 (89- 91位点 )RNA的 2个短臂锤头型核酶基因 :42nt的RzASSVd(+)和 40nt的RzASSVd(- )。经转录获得核酶转录物和³²P标记的ASSVd正、负链转录物。将核酶与ASSVd混合 ,50℃或 37℃保温 3～ 4h ,进行 8%PAGE(含8mol L尿素 )和放射自显影分析。体外切割检测表明 :2个核酶均具有特异切割活性 ,其中RzASSVd(- )对ASSVd负链的切割活性较高 ,对ASSVd正链不起作用。RzASSVd(+)对ASSVd正链的切割活性较弱 ,对ASSVd负链亦不起作用。在此基础上 ,构建得到双价核酶基因pGEMRzASSVd(± )。     

硝酸镧对霍霍巴多芽苗生长的促进作用及植株再生

在增殖培养基(改良MS 2mg／L6-BA 0．5mg／LG3)中添加1～3．5mg／L硝酸镧,对霍霍巴试管苗生长有显著促进作用,2．5mg／L硝酸镧对多芽分化有极显著的促进;在生根培养基(改良1/2MS 3mg／LIBA 1．5mg／LNAA)中,1～2mg／L的La(NO3)3对根的分化有显著的促进作用,生根率提高,最佳浓度为2．0mg／L。过高的浓度对试管苗生长有一定抑制。试验表明,不同器官对硝酸镧的敏感程度不同。取2cm高以上的霍霍巴试管苗,用25mg／L IBA或NAA处理30min,扦插于沙基质中。保持室温20～30℃。50d后揭去覆膜,保持光强3000 lx,相对湿度85％以上。正常管理条件下成活率达75％。     

热诱导PS核心复合物荧光动力学研究

运用UV-3101PC型紫外-可见-红外分光光度计及皮秒时间分辨荧光光谱技术对20℃、42℃、48℃3个温度下,PS 核心复合物的吸收光谱和时间分辨荧光光谱的变化进行分析,结果发现: 1 在PS 核心复合物中至少存在以下几种具有特征吸收峰的chla分子,CP43:chla660/661 chlaa:a代表吸收峰 、chla669、chla671、chla682/683;CP47:chla660/661、chla669、chla671/672、chla688、chla680;RC:chla680、chla670、chla684、chla673/674、chla682/683、chla660.吸收峰波长随测量温度等条件的不同而略有变化. 2 荧光发射谱组分的峰值随温度的升高而发生明显的蓝移,这是由于热诱导改变了蛋白质的结构,从而使生色团间的距离和 或 方位受到了影响,而chla分子的结构并未发生变化,因此导致chla分子间激子相互作用被破坏,从而产生了发射峰蓝移的现象. 3 20℃、42℃时核心天线向反应中心的能量传递是高效有序的. 4 反应中心中与蛋白质存在不同结合的chla分子,以及核心天线中吸收不同波段光的chla分子与蛋白质结合方式随温度变化存在不同反应.     

两栖动物酒精标本DNA模板的快速提取

本文以中国角蟾属4个种的蝌蚪酒精固定标本为材料,取尾部肌肉组织0．1g,滤纸吸干组织块表面的酒精,在研钵中用剪刀剪碎,液氮研磨成粉(必要时可加少量石英砂),转入1．5ml离心管,加入1．0ml提取缓冲液(0．5％SDS,10mmol/L Tris-HCl,100mmol/L EDTA,pH8.0),37℃温浴h,5000r/min离心10min,取上清转入另一1.5ml离心管,氯仿/异戊醇(24：1)抽提两次,上清液加2倍体积预冷(-20℃)的无水乙醇沉淀DNA,12000r/min离心3min,无菌条件下风干后,50μl TE溶解,4℃保存备用。以通用引物PCR扩增12S rRNA和16S rRNA基因部分片段并测序。本文不采用蛋白酶K提取酒精保存标本的DNA模板,全部流程只需3个小时,可同时提取数十个乃至数百个标本,并且所提取的DNA模板适合短片段PCR扩增。     

小鼠胚胎神经干细胞的分离培养及其鉴定

且的探索小鼠胚胎神经干细胞的体外培养方法,并获取高纯度的神经干细胞,为神经干细胞的深入研究提供实验材料。方法无菌条件下分离E15天小鼠胚脑皮质,制成单细胞悬液,在bFGF和B27存在的培养基中培养扩增,通过免疫细胞化学染色鉴定神经干细胞及其子代细胞的分化方向。结果培养的部分细胞在B27和bFGF存在的无血清培养基中可以在体外分裂增殖,同时表达神经干细胞特异性抗原nestin,并在撤出B27和bFGF的有血清培养基中向神经细胞和胶质细胞分化。结论小鼠胚脑皮质存在具有多向分化潜能的神经干细胞,这些细胞可以在体外稳定培养、传代并自然分化,为细胞替代治疗提供了理想的细胞来源。     

固定化镍离子亲和层析胶的制备及其性能鉴定

以Sepharose 6B为原料,在强碱性条件下用环氧氯丙烷活化,再与亚氨基二乙酸（IDA）的钠盐溶液反应,在活化好的胶颗粒表面接上很多手臂IDA;最后与硫酸镍溶液反应,使手臂IDA与Ni²⁺发生螯合反应,即得到固定化Ni²⁺亲和层析胶（Ni²⁺-IDA）.采用原子吸收法及从大肠杆菌表达产物中纯化重组人B淋巴细胞刺激因子（hBLyS）等方法检测制备胶的理化指标和纯化蛋白质的性能.结果表明用此法制得的亲和胶与相应商品胶的性能完全一致,而成本却不到商品胶的十分之一.     

云贵高原抚仙湖近13300年的花粉/炭屑记录*

抚仙湖是云贵高原著名的断陷深水湖,其沉积物蕴藏着流域地质历史时期丰富的环境信息。对钻取自该湖的900cm 湖泊沉积物岩芯进行花粉/炭屑分析及花粉数据的主成分分析表明,抚仙湖流域的植被、气候与火灾在过去的13 300年经历了5个阶段的变化：(1)13 300—10 400cal．a BP,植被以松林为主,伴有山地暗针叶林和常绿阔叶林,表明该时期气候较为冷湿,森林火灾多发,在后期随着温度和湿度的降低,森林火灾愈加频繁。(2)10 400—5 700cal．a BP,松林收缩,常绿阔叶林扩张,出现一定数量的落叶阔叶林,显示该时期气候偏暖偏干;此阶段早期随着气候变暖变干森林火灾的发生延续上阶段高发的状态,直到9 500cal．a BP后随着湿度的增加森林火灾明显减少。(3)5 700—1 800cal．a BP,松林变化较小,常绿/落叶阔叶林比重增大,首次出现了暖热性的枫香林,显示该时期暖湿的气候特征,火灾发生频率低。(4)1 800—500cal．a BP,松林扩张,阔叶林收缩,本阶段后期草本植被比重开始增加,显示该时期气候相对冷干,森林火灾发生频率较高。(5)500cal．a BP至今,松林收缩,落叶阔叶树种增多,草本植物花粉明显增多,显示该时期气候温凉偏干,森林火灾发生频率降低。     

虫酰肼和甲维盐对甜玉米草地贪夜蛾的生物活性及田间防效

为了研究虫酰肼和甲氨基阿维菌素苯甲酸盐(甲维盐)对新入侵我国的草地贪夜蛾毒杀活性并为田间应用提供依据,采用浸叶法进行了室内毒力测定,采用喷雾法进行盆栽试验和田间小区试验。毒力测定表明虫酰肼对草地贪夜蛾2龄、3龄幼虫48 h LC_(50)分别为0.30 mg/L和0.26 mg/L,甲维盐对草地贪夜蛾2龄、3龄幼虫48 h LC_(50)分别为0.005 mg/L和0.002 mg/L,其LC_(50)活性是虫酰肼的60～128倍。盆栽试验表明,20%虫酰肼SC在20 mg/L、5%甲维盐ME 1mg/L喷雾处理后7 d后防效均为100%,在甜玉米田间小区试验最高防效均可达到90%以上。本研究结果表明,虫酰肼可推荐用于草地贪夜蛾的防治并可与甲维盐轮换使用或复配使用。     

北京地区首次发现赖型钩端螺旋体

采用分群和分型因子血清经显微镜凝集试验（ＭＡＴ）对由北京市顺义县某农场稻田周围黑线姬鼠肾组织分离获得的４株钩端螺旋体（钩体）进行了血清学分类检定。均属黄疸出血群赖型钩体。这在北京地区尚属首次分离发现。     

热激蛋白在昆虫生殖中的功能及作用机制

热激蛋白(Hsp)在生殖过程中有着至关重要的作用。近年来,Hsp在昆虫生殖相关功能与机制研究方面取得了重要进展。基于此,本文主要就Hsp在昆虫精子发生和精子保护、卵成熟和卵子保护、生殖应答以及衰老进化机制等方面的研究进展进行了综述,旨在为进一步深入研究Hsp与昆虫生殖的关系提供参考,并为害虫防治和益虫利用提供新思路。