碱性果胶酶高产菌株的构建和高密度发酵

碱性果胶酶可用于苎麻脱胶和棉织物前处理的精练工艺,与传统的高温碱煮相比,具有保护纤维、降低能耗和化学污染的优势,因此获得高表达的碱性果胶酶基因工程菌,低成本生产碱性果胶酶对于纺织工业节能减排具有重要的意义。前期研究工作已经将来源于枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis 168的碱性果胶酶基因pel经过密码子优化后在毕赤酵母Pichia pastoris GS115中成功表达。本研究为了提高其表达量,首先利用启动子和信号肽都优化的载体pHBM905BDM进行表达,摇瓶酶活从68 U/mL增加到100 U/mL,qPCR检测转录水平提高了27%。再利用果胶底物平板筛选水解圈大的转化子进行摇瓶发酵获得菌株GS115-pHBM905BDM-pels4,摇瓶酶活为536 U/mL。随后构建重组质粒pPIC9K-pels,电转化菌株GS115-pHBM905BDM-pels4,利用抗生素G418平板进行筛选,在含4 mg/mL的G418抗性平板上得到菌株GS115-pHBM905BDM-pPIC9K-pels1,摇瓶酶活为770 U/mL,qPCR测定含7个拷贝目的基因。最后将该菌株在5 L的发酵罐中进行高密度发酵,果胶酶酶活提高至2 271 U/mL。该碱性果胶酶酶活已达到目前酵母表达的最高水平,说明其具有很好的应用于纺织工业的潜力。     

张掖湿地旱柳叶水势与中脉性状的关联性

植物叶水势和中脉性状是反映叶片水力特性的主要参数,二者之间的关联性对理解植物水分供需平衡的生态适应策略具有重要意义。选择张掖市黑河干流边缘的洪泛平原湿地为实验地,以河岸为起点沿平行河岸线的方向依次设置近水区(样地Ⅰ)、中水区(样地Ⅱ)和远水区(样地Ⅲ)3个水分梯度样地,采用标准化主轴估计方法(standardized major axis estimation,SMA),研究了对水分影响下旱柳(Salix matsudana)叶水势与中脉性状之间的关系。结果表明:随着土壤含水量减少,旱柳林的高度、密度和郁闭度均持续降低,旱柳叶片的中脉密度、净光合速率(Pn)、蒸腾速率(Tr)、光合有效辐射(PAR)和叶片温度(Tleaf)逐渐增加,中脉直径、比叶面积及叶水势、叶绿素含量逐渐减少;不同土壤含水量样地旱柳叶水势与中脉性状间的相关性存在差异(P0.05),在样地Ⅰ和样地Ⅲ叶水势与中脉密度呈极显著负相关关系(P0.01),在样地Ⅱ两者之间呈显著负相关关系(P0.05);旱柳叶水势与中脉直径在3个水分梯度样地均呈显著正相关关系(P0.05)。随着湿地土壤含水量减少,旱柳采取降低叶水势、增加中脉密度并减少中脉直径的资源投资策略,反映了该物种在异质生境中具有较强的叶片性状可塑性,从而有利于其适应特殊的湿地生境。     

鸦胆子油乳注射液联合TP方案对晚期非小细胞肺癌患者肿瘤标志物和血清TAP、Hsp90α的影响

摘要 目的：探讨鸦胆子油乳注射液联合顺铂+紫杉醇（TP）方案对晚期非小细胞肺癌（NSCLC）患者肿瘤标志物和血清肿瘤异常蛋白（TAP）、热休克蛋白90α（Hsp90α）的影响。方法：纳入南京医科大学附属脑科医院呼吸院区呼吸科2018年3月~2020年3月期间收治的100例晚期NSCLC患者,分组选用随机数字表法,其中研究组50例,TP方案基础上联合鸦胆子油乳注射液治疗,对照组50例,仅TP方案治疗。对比两组疗效、血清肿瘤标志物、TAP、Hsp90α和不良反应发生率,随访3年,采用生存曲线分析两组的累积生存率。结果：研究组的客观缓解率、疾病控制率均高于对照组（P<0.05）。治疗4个周期后,研究组癌胚抗原（CEA）、鳞状上皮细胞癌抗原（SCC）、TAP、细胞角蛋白19片段（CYFRA21-1）、Hsp90α低于对照组（P<0.05）。两组不良反应发生率组间对比未见差异（P>0.05）。两组生存资料之无进展生存时间（PFS）和总生存时间（OS）经LogRank检验,均有显著性差异（P＜0.05）。结论：鸦胆子油乳注射液联合TP方案治疗晚期NSCLC患者,可有效调节肿瘤标志物和血清TAP、Hsp90α水平,延长患者生存率。