丙型肝炎病毒NS3蛋白辅助T细胞表位研究

对２例ＨＣＶ持续性感染者２个时间点ＮＳ３区Ｃ末端克隆测序,研究ＨＣＶ ＮＳ３蛋白一个辅助Ｔ细胞表位（氨基酸位１２４８－１２６１）在ＨＣＶ感染者体内的保守性;人工合成该表位进行淋巴细胞增殖试验和抑制试验,观察该表位引起免疫应答的水平和特点;通过“刺激－休息－刺激”多轮循环建立该表位特异性的Ｔ细胞系,并用流式细胞仪鉴定表型。结果发现该表位在２个病人２个时间点均未变化;观察的２例ＨＣＶ持续性感染者和１例     

结核分枝杆菌ESX分泌系统研究进展

在结核分枝杆菌中存在能够使某些蛋白通过其高度疏水和通透性极差的细胞壁的分泌系统,其中ESX-1分泌系统负责ESAT-6（early secreted antigenic target of 6 kD）和CFP-10（culture filtrate protein of 10kD）的分泌．这两种蛋白能够形成1：1的二聚体结构,并且是结核分枝杆菌重要的毒力因子．近年来陆续发现其他一些蛋白也由ESX-1分泌系统所分泌．在结核分枝杆菌中还存在其他4种类似ESX-1的分泌系统ESX-2～ESX-5．ESX分泌系统也在其他革兰氏阳性菌和放线菌中被发现,有学者按照公认的术语称其为Ⅶ型分泌系统．本文综述了结核分枝杆菌ESX分泌系统的组成和分子机制,以及分泌蛋白与宿主的相互作用等方面的研究进展．     

结核分枝杆菌ESAT-6蛋白的重组表达及膜定位研究

从结核分枝杆菌H37Rv基因组中扩增出ESAT-6基因,克隆入pET21a(+)载体.将成功构建的pET21a(+)-ESAT-6重组质粒转化入感受态BL21(DE3)中,经诱导表达后,使用SDS.PAGE和Western blot鉴定.超声破碎后发现目的蛋白以可溶性表达形式存在,经过Ni-NTA柱和DEAE-Seph...     

兎原肌球蛋白的巰基及巰基邻近氨基酸的排列次序

原肌球蛋白是肌原纤维蛋白之一。在结构上,它有很显著的特征,如极性氨基酸侧链占60%以上,分子的三级结构很少而螺旋度很高,分子的外形和电荷分布极不对称,在特殊的断链情况下,可以找到一相当大的具有抗原性的碎片,其中不含硷性与芳香族氨基酸等等。原肌球蛋白在整体肌肉组织中的生理功能和在离体体系中的特殊性质自然是和这些结构上的特点分不开的。     

抗炭疽保护性抗原单克隆抗体可变区基因的克隆及序列分析

目的:克隆并分析抗重组炭疽芽孢杆菌保护性抗原(rPA)单克隆抗体4B2、5E1和2A8轻、重链可变区基因。方法:从分泌抗rPA特异性单抗的杂交瘤细胞株4B2、5E1和2A8中提取总RNA;利用RT-PCR技术克隆抗rPA单抗4B2、5E1和2A8的VL、VH基因,并将其连入pMD18-T载体中进行测序分析。结果:4B2VL基因全长378bp,VH基因全长414bp;5E1VL基因全长420bp,VH基因全长426bp;2A8VL基因全长384bp,VH基因全长342bp。通过分析,这些基因均符合小鼠IgGV区基因的特征,含有4个框架区、3个抗原互补决定区,而且抗体特征性的半胱氨酸残基的数量和位置也正确。结论:克隆了抗rPA单抗4B2、5E1和2A8的VL、VH基因,为下一步构建多种形式的基因工程抗体奠定了良好的基础。     

人、猴、兔BPI活性部位基因的克隆和序列分析

为比较不同动物来源杀菌／通透性增加蛋白（BPI）的活性部位在基因组成上的差异,为今后对人BPI进行分子改构打下基础,分别从人、恒河猴和家兔外周血白细胞中克隆出BPI全长或活性部位基因,进行序列分析和比较,并进行蛋白二级结构预测。结果发现：猴、兔BPI活性部位序列与人序列在核苷酸水平的同源性分别为94％和77％,在氨基酸水平的同源性分别为88％和62％;人氨基酸序列中包含一个糖基化位点,而猴、兔序列没有;兔序列比人、猴序列少一个氨基酸;3种BPI活性部位有近似的二级结构。     

杀菌/通透性增加蛋白基因的克隆及在CH0细胞中的表达

从一名健康中国人外周血白细胞中克隆出杀菌/通透性增加蛋白(BPI)基因,全长1452bp,编码27个氨基酸的信号肽和456个氨基酸成熟蛋白.序列比较发现,此序列与国外发表的序列有6个核苷酸的差异,编码蛋白有4个氨基酸的差异.构建真核表达质粒,在CHO细胞中实现BPI基因的稳定表达.对重组蛋白初步纯化后进行杀菌实验,结果表明重组蛋白具有与天然蛋白同样的生物活性.