α-硫辛酸对糖尿病肾病患者氧化应激, Hcy, CysC的影响

目的:探讨α-硫辛酸对糖尿病肾病患者的疗效及对氧化应激、同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy)、血清胱抑素C(cystatin C,CysC)的影响。方法:将82例于我院进行治疗的2型糖尿病肾病患者随机分为观察组和对照组,对照组患者接受常规治疗,观察组患者在对照组的基础上加用α-硫辛酸。治疗时间均为2周。观察两组治疗效果并比较两组患者治疗前、后氧化应激指标超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)及Hcy、CysC水平变化。结果:治疗后,观察组氧化应激指标SOD水平均较治疗前显著升高(P0.05),MDA水平均较治疗前显著降低(P0.05),对照组氧化应激指标SOD及MDA水平与治疗前无明显差异(P0.05),两组治疗后SOD及MDA水平差异显著(P0.05);治疗后,观察组Hcy、CysC水平较治疗前显著降低(P0.05),对照组Hcy、CysC水平与治疗前无明显差异(P0.05),两组治疗后Hcy、CysC水平差异显著(P0.05)。结论:α-硫辛酸可缓解糖尿病肾病患者氧化应激状态,降低Hcy、CysC水平,改善患者肾功能。     

利用全基因组重测序分析鹿茸重量相关基因

茸角是鹿科动物特有的器官,具有重要的生物学意义。鹿茸生长是一个复杂的生物代谢过程,其重量与遗传因素有一定关联。本研究对饲养条件基本一致的5个梅花鹿(Cervus nippon)群体进行调查,获得高产和低产梅花鹿个体共100只,利用全基因组重测序分析这些个体与鹿茸重量相关的遗传变异。结果表明,共得到94个与鹿茸重量可能相关的遗传变异,其中有2个变异位点分别定位于OAS2和ALYREF/THOC4基因的外显子区,且ALYREF/THOC4基因在鹿茸中表达量很高。功能富集分析发现,这些遗传变异与鹿茸生长发育密切相关,可作为潜在的鹿茸重量相关遗传变异。本研究首次通过全基因组重测序直接筛选与鹿茸重量相关的遗传变异,并分析关联基因的生物学功能,对揭示鹿茸生长发育和鹿茸重量差异形成的遗传机制具有重要意义。     

牙龈卟啉单胞菌脂多糖通过TXNIP/Nlrp3炎性通路对小鼠牙周膜成纤维细胞迁移的影响

摘要 目的：研究牙龈卟啉单胞菌脂多糖（Porphyromonas lipopolysaccharide,LPS-PG）对牙周膜成纤维细胞（mouse periodontal Ligament: Normal Fibroblasts,mPDLFs）增殖及迁移的影响,探讨TXNIP/Nlrp3炎性体途径在其中的作用。方法：采用不同浓度的LPS-PG刺激小鼠mPDLFs细胞不同时间,CCK-8法检测细胞增殖抑制率。然后将细胞分为对照组（培养基作用24 h）和LPS-PG组（2 M的LPS-PG作用24 h）,划痕实验检测细胞迁移,ELISA法检测白细胞介素-1β（Interleukin-1β,IL-1β）和高迁移率族蛋白B1（High mobility group protein B1,HMGB1）的水平,Western Blot检测Nod样受体蛋白3（Nod-like receptor pyrin domain3,NLRP3）、凋亡相关斑点样蛋白（Apoptosis-associated speck-like protein,ASC）、活化半胱氨酸蛋白酶（cleaved-caspase-1）和硫氧还蛋白相互作用蛋白（Thioredoxin-interacting protein,TXNIP）的表达,免疫共沉淀检测以上蛋白间的相互作用。结果：与0 M的LPS-PG相比,1 M和2 M的LPS-PG可显著增加mPDLFs的细胞增殖抑制率（P<0.05）。与LPS-PG作用0 h相比,LPS-PG作用12 h、24 h和48 h均可显著增加mPDLFs的细胞增殖抑制率（P<0.05）。LPS-PG组细胞向中间''伤口''迁移的距离及细胞数量远远低于对照组。与对照组相比,LPS-PG组细胞中IL-1β和HMGB1的水平、NLRP3、cleaved-caspase-1和TXNIP蛋白表达均显著增加,且NLRP3和ASC、NLRP3和cleaved-caspase-1、TXNIP和NLRP3的蛋白互作能力显著增强（P<0.05）,而两组ASC蛋白的表达无显著差异（P＞0.05）。结论：LPS-PG可抑制mPDLFs细胞的增殖和迁移,其机制与Nlrp3炎性体的形成与活化有密切的关系。     

rhGM-CSF联合氨磷汀治疗放射性口腔黏膜炎的临床疗效及对外周血淋巴细胞亚群的影响

摘要 目的：研究重组人粒细胞/巨噬细胞集落刺激因子（rhGM-CSF）联合氨磷汀治疗放射性口腔黏膜炎患者的临床治疗疗效以及对外周血淋巴细胞亚群的影响。方法：选取2019年1月到2020年12月在我院接收治疗的放射性口腔黏膜炎患者60例,随机分为对照组和rhGM-CSF组两组,每组30例。对照组接受静脉滴注氨磷汀治疗,rhGM-CSF组接受rhGM-CSF漱口液漱口联合静脉滴注氨磷汀治疗。比较两组患者临床治疗疗效、治疗后口腔黏膜炎评分、疼痛评分、吞咽功能、血清炎症因子以及外周血淋巴细胞亚型。结果：（1）rhGM-CSF组患者临床治愈率和治疗总有效率分别为26.67 %和90.00 %,均高于对照组6.67 %临床治愈率和70.00 %临床治疗总有效率（P<0.05）。（2）治疗后,rhGM-CSF组口腔黏膜炎评分、疼痛评分、吞咽功能、血清干扰素-γ（IFN-γ）、肿瘤坏死因子（TNF-α）和白介素-6（IL-6）含量均显著低于对照组患者（P<0.05）。（3）rhGM-CSF组患者治疗后外周血CD3⁺T淋巴细胞与对照组比较无差异（P>0.05）,外周血CD4⁺和CD4⁺/CD8⁺T淋巴细胞亚群显著高于对照组患者,而CD8⁺T淋巴细胞亚群显著低于对照组患者（P<0.05）。结论：rhGM-CSF漱口液联合静脉滴注氨磷汀治疗治疗放射性口腔黏膜炎临床疗效更优,有助于减轻患者外周血炎症反应,增强细胞免疫功能。     

苦瓜全粉和苦瓜乙醇提取物健康功效的体外评估

本研究的目的是运用体外模型评估苦瓜全粉和苦瓜乙醇提取物的健康功效。苦瓜全粉和苦瓜乙醇提取物以7.5 mg/mL和15 mg/mL的剂量与新鲜粪便样品进行体外厌氧培养。通过454焦磷酸测序技术分析粪便菌群组成的变化,同时测定发酵上清中短链脂肪酸的含量以及对Caco-2单层细胞跨膜电阻的影响。结果显示,苦瓜全粉(15 mg/mL)可以明显地扶植Faecalibacterium属细菌,同时抑制Bilophila和Desulfovibrio属细菌的增殖;同等剂量的苦瓜全粉发酵上清中短链脂肪酸的含量明显高于苦瓜乙醇提取物发酵上清;源自苦瓜乙醇提取物(15 mg/mL)的发酵上清对Caco-2单层细胞跨膜电阻的增强作用要大于苦瓜全粉(15 mg/mL)。本研究探究了体外苦瓜全粉和苦瓜乙醇提取物不同的生理功效,为以后苦瓜制品的选择提供了初步证据。     

金华北山南坡主要植被类型的群落特征

浙江省金华北山地处中亚热带北部, 在植被区划上属于中亚热带常绿阔叶林北部亚地带。该区植被是遭砍伐后恢复的次生林, 目前正处于快速的正向演替进程中, 这为研究常绿阔叶林植物群落动态演替机制及受损生态系统的恢复提供了平台。为进一步了解金华北山地区主要植被类型的群落特征, 该文以国际上通用的大样地调查方法, 采用固定样方对其南坡主要植物群落进行了调查, 其中森林样方面积30 m × 30 m, 灌丛样方面积为20 m × 10 m、30 m × 10 m。调查群落物种组成及其数量特征, 记录群落生境信息, 计算木本植物重要值, 分析群落的类型及特征, 并制作每个样方主要木本植物的空间分布图。论文提供了24组详细的群落样方数据(包括21个森林样方和3个灌丛样方), 含有11个群系。     

α-溶血性链球菌在健康人群口咽部分布及 生物拮抗作用

目的通过采集健康人群口咽部分泌物,分析上呼吸道中α-溶血性链球菌的分布状况,并对革兰阳性化脓性球菌进行生物拮抗试验,为进一步研究上呼吸道益生菌提供理论基础。方法随机自愿原则,用无菌咽拭子采集沈阳市年龄在3～75岁的300名健康人群咽后壁分泌物,对α-溶血性链球菌进行鉴定和定量分析。对致病菌的生物拮抗试验采用小缸杯法。结果定量分析显示不同年龄人群咽后壁的α-溶血性链球菌检出率均较高。在咽后壁菌群中α-溶血性链球菌构成比最多的是幼儿组,达到60.3%。其中唾液链球菌群在幼儿组所占比重最大;老年组人群格氏链球菌占比较大;儿童、青年、成人以缓症链球菌和口腔链球菌为主。对革兰阳性化脓性球菌的生物拮抗试验显示,1株婴儿链球菌婴儿亚种能够拮抗8株致病菌;4株分离菌只能拮抗1株病原菌,提示不同的菌株拮抗病原菌的能力差异较大。结论α-溶血性链球菌在人群中分布广,数量多,不同年龄人群的菌群构成存在差异。并且某些菌株显示出对致病菌较强的生物拮抗作用,推测这些菌株在呼吸道黏膜保护中起到重要作用,可作为上呼吸道益生菌的备选菌株。     

三种组成型启动子调控的鼠李糖脂基因在防御假单胞菌中的异源表达及活性研究

本研究利用Red/ETDNA重组技术对实验室已有的含鼠李糖基转移酶基因RhlAB的分泌表达载体pBBR1-genta-RhlAB进行修饰,将3种不同强度组成型启动子(Papra、Ptac和PrhaB)成功替换了RhlAB基因在铜绿假单胞菌中的原始启动子,成功获得了表达载体pBBR1-genta-Papra-RhlAB,pBBR1-kan-Ptac-RhlAB和pBBR1-kan-PrhaB-RhlAB,并将这些表达载体分别在防御假单胞菌Pf-5中异源表达,通过LB培养基发酵42h后,Pf-5/pBBR1-genta-RhlAB的鼠李糖脂产量为17.56mg/L,而Pf-5/pBBR1-genta-Papra-RhlAB,Pf-5/pBBR1-kan-Ptac-RhlAB和Pf-5/pBBR1-kan-PrhaB-RhlAB分别是11.135mg/L,441.135mg/L,557.764mg/L,启动子优化后产量分别是原始启动子的0.63,25.12和31.76倍。对发酵产物进行高效液相色谱-质谱联用技术分析,共检出相对含量变化的4类质核比不同的鼠李糖脂同系物。并通过实时荧光定量PCR检测RhlAB基因的表达量,发现启动子替换为Ptac和PrhaB后RhlAB基因表达量分别是原始启动子的2.16和2.77倍。本研究初步实现了RhlAB基因在Pf-5中的表达,发现组成型启动子Ptac和PrhaB比RhlAB的原始启动子表达效率更高,可为异源合成鼠李糖脂提供重要参考。     

LAK细胞中一种自由基清除剂——SLP的分离纯化与抗体制备

ＳＯＤ样蛋白（ＳＯＤ－ｌｉｋｅ ｐｒｏｔｅｉｎ,ＳＬＰ）是从ＬＡＫ 细胞中发现的一种具有自由基清除功能的蛋白．为阐明ＳＬＰ的生化特性和确定其蛋白序列或基因序列,采用ＤＥＡＥ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ ＦＦ层析从ＬＡＫ 细胞中得到部分纯化的ＳＬＰ,并采用ＩＥＦ等电聚焦电泳,活性染色,将含有活性蛋白的胶条直接免疫Ｂａｌｂ／ｃ 小鼠,制备抗血清并筛选得到多株有中和ＳＬＰ清除自由基活性的单克隆抗体．Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ结果表明ＳＬＰ分子量约为６７ ｋＤ,并测得ｐＩ约为４．２．     

产木聚糖酶枯草芽孢杆菌构建及表达条件优化

枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)具有很强的分泌能力,产酶能力强,属于食品级安全微生物.以枯草芽孢杆菌为宿主菌异源表达木聚糖酶,采用同源重组的方法将木聚糖酶基因连接到载体pWB980上,构建表达载体pWB980-xynZF-2,电击转化枯草芽孢杆菌WB600,获得重组工程菌WB600-pWB980-xy...