Bt Cry1Ac抗性粉纹夜蛾离体细胞与敏感细胞mRNA的差异显示

为了研究昆虫对Bt的抗性机制 ,以苏云金芽孢杆菌Cry1Ac活性毒素对粉纹夜蛾离体细胞连续筛选 80代 ,获得了高抗性细胞。采用DDRT PCR技术比较了该抗性细胞与非选择敏感细胞mRNA的差异 ,经反向RNA斑点印迹杂交确证了 5个片段为两种细胞的显著差异表达序列标签(ESTs)。序列分析结果表明 ,敏感细胞特有的三种ESTs都位于cDNA的非编码区 ,两种ESTs(GenBank注册号 :S1 ,CF32 2 4 1 5 ;S3,CF32 2 4 1 7)与数据库中EST没有显著同源性 ,另一种S2(GenBank注册号 :CF32 2 4 1 6)与已登录的某些昆虫的ESTs具有一定的同源性。从抗性细胞特有的R1 (GenBank注册号 :CF32 2 4 1 3)推导出的氨基酸序列与磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶有 60 %～63%的同源性 ,从抗性细胞特有的R2 (GenBank注册号 :CF32 2 4 1 4)推导出的氨基酸序列与黏蛋白类有约 30 %的同源性。这些差异表达基因可能与抗性的形成相关。     

怎样做好计算机相关专业的《网页制作与设计》课程教学

《网页制作与设计》课程是一门操作性强、实用性强的课程,本文主要是站在职业教育的角度从教学设计、教师的教和学生的学三个方面入手进行研究,通过从教学案案、教学设计上改革达到提升教学效果的目的。     

家蚕Piwi亚家族基因的克隆、表达及进化分析

为克隆家蚕Bombyx mori Piwi亚家族蛋白基因cDNA全长序列,分析其分子特征和表达模式,探究Piwi亚家族蛋白在家蚕中的生理功能,本研究利用已知物种的Piwi亚家族蛋白搜索家蚕基因组,预测获得家蚕Piwi亚家族蛋白基因siwi1和siwi2,采用RACE技术克隆siwi1和siwi2的全长cDNA序列,利用ORFfinder、Gene-Explorer、InterPro等分析其分子特征;其次,利用已知的所有物种Piwi蛋白及其类似物Piwil构建系统发育树;最后,通过荧光定量PCR技术检测了siwi1和siwi2在丝腺、马氏管、中肠、头部、卵巢和精巢以及不同发育时期(卵、1～5龄幼虫、蛹、成虫)的表达水平,结果显示,克隆获得了siwi1 cDNA全长3 277 bp,包含部分5′UTR、完整的开放阅读框ORF和3′UTR,获得了siwi2的部分序列,其中siwi1对应BmPiwi,siwi2对应BmAgo3。系统发育结果显示,家蚕Piwi亚家族蛋白与乳草长蝽Oncopeltus fasciatus、黑腹果蝇Drosophila melanogaster、橘小实蝇Bactro...     

从山东费县不同季节优势恙螨分离到恙虫病立克次体(英文)

对山东费县秋冬型恙虫病疫源地恙螨进行了调查并进行恙虫病立克次体（Ｒｔ）分离。从３５２只活鼠体外收集到１１ ７６２只恙螨,隶属２属５种,太平洋无前恙螨数量最多,占３６．７３％;其次是临淮岗纤恙螨（２４．０４％）;小盾纤恙螨（２１．６５％）;须纤恙螨（１３．５７％）和泰山纤恙螨（３．９６％）。小盾纤恙螨出现在９—１２月,高峰在１１月;须纤恙螨出现在１０月一翌年４月,高峰在１２月;临淮岗纤恙螨从５月到１１月存在,高峰在８月;太平洋无前恙螨出现在４—１２月,高峰在７月。从小盾纤恙螨、须纤恙螨、临淮岗纤恙螨及太平洋无前恙螨中共分离到１２株Ｒｔ,血清分型结果分离株以Ｇｉｌｌｉａｍ型为主,但存在Ｋａｒｐ型Ｒｔ。这些结果表明,上述４种恙螨均能自然感染Ｒｔ,有在该地区充作不同季节Ｒｔ传播媒介的可能。结合以往的研究结果,当地小盾纤恙螨集中出现于发病季节,其消长与当地人群发病基本一致,且能叮刺、经卵传递Ｒｔ,从而证实小盾纤恙螨是引起该地区秋冬型恙虫病流行的最重要的媒介。     

星花绣线菊的组织培养及快速繁殖

1　植物名称　星花绣线菊 (Ｓｐｉｒａｅａｊａｐｏｎｉｃａｖａｒ.ｓｔｅｌｌｅｒｉｓ)。2　材料类别　茎尖、茎段、叶片、叶柄。3　培养条件　 ( 1 )愈伤组织诱导培养基 :ＭＳ 2 ,4 Ｄ 2 .0ｍｇ·Ｌ- 1 (单位下同 ) ＫＴ 0 .3;( 2 )愈伤组织继代培养基 :6,7 Ｖ 2 ,4 Ｄ 2 .0 ＫＴ 0 .2 5 ＮＡＡ 1 .0 ＬＨ 2 0 0 0 ;( 3)芽诱导培养基 :ＭＳ 6 ＢＡ 2 .0 ＮＡＡ 0 .1 ;( 4 )芽增殖培养基 :ＭＳ 6 ＢＡ0 .2 5 ＮＡＡ 0 .1 ;( 5 )生根培养基 :1 /2ＭＳ 6 ＢＡ0 .2 5 ＮＡＡ 0 .5。上述培养基的蔗糖含量为 3% ,琼脂为 0 .7% ,…     

一个新的水稻叶形突变体(tll1)的遗传分析与精细定位

利用甲基磺酸乙酯(ethylmethane sulphonate, EMS)诱变粳稻品种日本晴获得了一个遗传稳定的叶形突变体 thread-like leaf 1 (tll1)。该突变体在杭州表现为矮化、窄叶, 极端时仅剩主脉, 呈细丝状。将该突变体分别与籼稻品种南京6号、浙辐802和9311进行正反交配组, 遗传分析表明该突变体性状由1对隐性单基因控制。通过SSR和STS分子标记对F₂代分离群体进行遗传定位, 将该基因初步定位在第12染色体SSR标记RM247和RM101之间。随后利用已公布的粳稻品种日本晴和籼稻品种9311的基因组序列, 发展了7对有多态的STS标记, 最终将该基因定位在FL13和FL14之间约94.3 kb的区间内, 为进一步克隆TLL1基因奠定了基础。     

木本植物营养贮藏蛋白质研究进展

本文根据最新的国内外研究资料对木本植物营养贮藏蛋白质的分类、定位、生化特性和生理功能等方面进行了全面的综述;着重论述了林木营养贮藏蛋白质的合成、转移、降解机理及基因表达与调控等方面的最新研究进展;对有待进一步研究的领域也进行了分析和讨论。     

食蟹猴的基础血糖值调查

目的 调查圈养食蟹猴基础血糖值情况.方法 采用快速血糖仪对153只6～19岁雄性食蟹猴和87只6～24岁雌性食蟹猴的血糖进行测定.结果 不同性别的食蟹猴血糖值存在显著性差异(P＜0.05),其中雌性食蟹猴血糖平均值为4.09 mmol/L±1.03 mmol/L,雄性食蟹猴血糖平均值为3.32 mmol/L±0.59 mmol/L;不同年龄段的食蟹猴血糖值差异显著(P＜0.05),年龄大的食蟹猴血糖值比年龄小的食蟹猴血糖值整体较高;体重指数与基础血糖值之间无显著相关性.结论 食蟹猴基础血糖值与人类基础血糖值相比,水平较低;性别和年龄是影响食蟹猴血糖值的主要因素.食蟹猴基础血糖值调查为糖尿病动物模型的建立及其相关研究提供了有关血糖值的基础数据参考.     

H1N1亚型猪流感病毒的拯救

利用8质粒拯救系统成功拯救出了猪流感病毒毒株A/Swine/TianJin/01/2004(H1N1)(A/S/TJ/04)。将猪流感病毒8个基因节段经RT-PCR合成cDNA后, 分别克隆到RNA聚合酶I/II双向表达载体PHW2000中, 构建成8个重组质粒。用8个重组质粒共转染COS-1细胞, 30 h后加入TPCK-胰酶至终浓度0.5 mg/mL。共转染48小时后收获COS-1细胞及其上清, 经尿囊腔接种9日龄SPF鸡胚。收获死亡鸡胚尿囊液并继续用SPF鸡胚传3代, 得到有感染性的病毒。经血凝、血凝抑制验、测序分析、电镜观察等均证实了A/S/TJ/04猪流感病毒的成功拯救。这是目前国内首次报道拯救出H1N1亚型猪流感病毒, 为进一步研究猪流感病毒基因组结构与功能的关系、流感跨种传播的机制以及构建新型猪流感疫苗株奠定了基础。     

益生菌的功效及遗传修饰

综述了益生菌的作用机理和生理功能,以乳酸菌为例介绍了益生菌的道传修饰作用,并展望了益生菌的发展前景。