蜀葵紫红色素及其理化性质研究

研究了蜀葵（Althaen rosea L.Cavan.）紫红色素的提取纯化工艺、理化性质。实验以蜀葵紫红色花瓣为材料,采用溶剂浸提法、硅胶柱层析法对色素进行提取纯化,效果较好。利用光谱扫描对该色素进行理化性质鉴定时发现：该色素属于花色苷类色素;色素耐光性好;耐氧化性、耐还原性较差;对热有一定的耐受性;防腐剂及多数金属离子对色素的稳定性无不良影响;但Fe^3＋、Fe^2＋、Cu^2＋、Pb^2＋、Sn^2＋对色素具有不利影响。     

未培养微生物资源*

简要介绍未培养微生物的概念、多样性、研究的理论基础和方法,并就未培养微生物资源的存在形式、开发利用途径和应用前景进行了讨论。     

一种高效快速浓缩腺相关病毒载体的方法

腺相关病毒载体(adeno associatedviralvector,AAVvector)是一种具有良好应用前景的基因治疗载体。研究中往往需要高滴度的重组AAV病毒(>105v g /细胞),为此利用完整的腺相关病毒颗粒具有耐受有机溶剂的特点,创造性地采用了一种用乙醇沉淀重组AAV病毒的方法,达到了高效、快速浓缩AAV载体的目的。结果表明,乙醇沉淀法可以高效浓缩AAV载体,并且对病毒的结构和活性没有明显影响。用这种方法可以方便地将低滴度的AAV病毒变成高滴度,解决动物体内实验中每点注射体积受到限制的问题。     

马尾松毛虫CPV基因组S7的序列分析及部分序列的原核表达

马尾松毛虫质多角体病毒(湖南株)基因组S7节段(AY180908)cDNA克隆及序列分析结果表明S7由1501个碱基组成,编码由448个氨基酸组成的分子量为49.8 kDa的多肽P50.5′末端和3′末端具有5′-AGTAA-3′和5′-GTTAGCC-3′末端保守序列.该基因组与舞毒蛾质多角体病毒1型和家蚕质多角体病毒1型S7节段有很高的同源性,核苷酸序列同源性分别为97.2%和87.0%,氨基酸序列同源性分别为98.7%和92.8%.P50多肽与人型支原体的 DnaK样蛋白在C-末端有相似性.本文报道了编码P50 C259的cDNA序列的克隆并作了原核表达,当用1.0 mmol/L IPTG 诱导2h,分子量约为37.3 kDa的融合蛋白在大肠杆菌BL21中得到大量表达.     

马尾松毛虫质型多角体病毒S4的cDNA克隆及序列分析

从马尾松毛虫质型多角体病毒湖南株中提取病毒核酸,回收、纯化第四片段s4,经RT-PCR扩增得到了S4的cDNA克隆并测定了其全序列.结果表明,S4全长由3 262个碱基组成,包含一个编码1058个氨基酸的完整开放阅读框架.Blast同源分析显示,DpCPV S4与LdCPV S4、BmCPV S4和RRSV S2编码蛋白氨基酸的同源性分别为94%、92%和22%.另外,氨基酸序列部分区域与Methanosarcina mazei Goel的甲基化转移酶有同源性,且序列中含有鸟苷酸转移酶活性位点.     

家蚕对马尾松毛虫质型多角体病毒的敏感性

用虫体克隆技术,对马尾松毛虫质型多角体病毒湖南株（DpCPV-HN）进行了分离纯化,鉴定为质型多角体病毒1型。以家蚕春蕾×镇珠杂种F₁代及自交的F₂代4或5日龄幼虫进行毒力测定,以纯化的家蚕质型多角体病毒对F₁代幼虫的毒力测定为对照。结果表明：家蚕品种春蕾×镇珠对家蚕质型多角体病毒敏感,马尾松毛虫质型多角体病毒湖南株能引起其感染发病;马尾松毛虫质型多角体病毒湖南株感染家蚕品种春蕾×镇珠F₁代幼虫和F₂代幼虫28天后的半致死剂量（LD₅₀）分别为885个和18个CPB(质多角体),前者为后者的49倍。马尾松毛虫质型多角体病毒湖南株感染后的家蚕,其结茧率、化蛹率、羽化率、全茧量、茧层量和单蛾产卵数均有所下降,全茧量、茧层量、茧层率和单蛾产卵数与病毒感染剂量之间无显著关联。     

紫叶小檗叶片红色素提取方法的研究

本文以新疆紫叶小檗的叶子作为实验材料。从浸提剂种类,浸提温度,浸提时间,浸提剂pH值及不同比例的紫叶小檗叶子（g）;浸提剂（ml）对紫叶小檗叶子红色素提取率的影响进行了提取方法的初步研究。结果表明：pH值在小于或等于2的范围内,以蒸馏水为浸提剂,在60℃时对这处花色苷类天然色素浸提60分钟,可获得最佳提取率。     

鸡冠花食用色素安全性的研究

目的：应用卫生毒理学原理,对鸡冠花(Gelosia cristata L．)色素的食用安全性进行研究。方法：采用原子吸收分光光度法对色素中有害微量元素As、Pb、Hg和Cu进行检测;利用小鼠急性毒性试验、小鼠骨髓细胞微核试验、小鼠骨髓细胞染色体畸变试验和小鼠睾丸染色体畸变试验等进行毒理学研究。结果：鸡冠花色素粗品、鸡冠花红色素和橙黄色素中,有害微量元素含量均低于国家食品卫生标准。急性毒性试验表明,鸡冠花色素粗品属于无毒级物质;鸡冠花红色素和橙黄色素为实际无毒级物质。而且毒理学试验检测表明：均呈阴性,无致突变性。结论：鸡冠花色素具有较好的食用安全性,可以作为天然食用植物色素使用。     

鸡冠花红色素的稳定化研究

以鸡冠花（Celosia cristata L.)红色素为实验材料,从色素稳定剂的预选、稳定剂的组合、稳定剂的各组分用量的确定以及加入稳定剂后,温度、光照、pH值、还原剂、氧化剂、蔗糖、防腐剂、金属离子等因素对色素的稳定性的影响进行了研究。结果发现：稳定剂配方以0.06%柠檬酸 0.03%单宁酸 0.02%泛酸钙的组合为最佳;加入稳定剂后,均可不同程度地提高色素对温度、光照、氧化剂、低浓度还原剂、Fe^3与Fe^2 的耐受性,但色素对pH值、蔗糖、防腐剂和Cu^2 的耐受性却未见提高。     

血型单克隆抗体试剂规模化生产工艺的建立

为了满足规模化生产的需要 ,对血型杂交瘤细胞的接种量、培养时间、培养条件等重要步骤进行了优化比较。结果表明 ,最佳血型细胞的接种量为 2 4× 10 8个 ,过长上清的凝集效价达到 1∶12 8,重复性好。建立了切实可行的血型试剂大规模生产工艺 ,成品试剂的质量稳定可靠