尘螨变应原Der f 1核酸序列测定及其分子进化分析

目的：对尘螨主要变应原Der f 1进行核酸序列测定,探讨其系统进化信息。方法：根据Genbank公布的Der f 1基因序列设计引物,巢式PCR扩增Der f 1的cDNA,纯化、回收、克隆至pMD19-T simple后进行序列测定,序列比对后用Clustal W1.83构建分子进化树。结果：成功扩增出Der f 1的cDNA片段,测序表明该基因含ORF1个,长度966bp,与参考序列同源性达99．9％。该变应原具半胱氨酸蛋白酶活性,与果蝇进化关系最远,与梅氏嗜霉螨进化关系最近。结论：成功获得了尘螨变应原Der f 1基因片段．根据其编码的氨基酸序列构建出的系统进化树与形态学分类不一致。     

系统性红斑狼疮患者血清IL-2Rα、OAS1、DNase1L3与疾病活动度和早期肾损伤的关系研究

摘要 目的：探讨系统性红斑狼疮（SLE）患者血清白细胞介素-2受体α（IL-2Rα）、5''-寡腺苷酸合成酶1（OAS1）、脱氧核糖核酸酶1Like3（DNase1L3）与疾病活动度和早期肾损伤的关系。方法：纳入我院2018年1月-2021年12月期间收治的113例SLE患者,根据SLE疾病活动度评分（SLEDAI）将患者分为轻度组（n=48,SLEDAI评分0~9分）、中度组（n=28,SLEDAI评分10~14分）、重度组（n=37,SLEDAI评分≥15分）。根据患者肾小球滤过率（eGFR）将患者分为肾功能正常组[n=48,eGFR>90 mL/（min?1.73 m2）]和早期肾功能损伤组[n=65,eGFR为60~90 mL/（min?1.73 m²）]。对比轻度组、中度组和重度组的血清IL-2Rα、OAS1、DNase1L3水平。采用单因素及多因素Logistic回归分析SLE患者早期肾损伤的影响因素。结果：重度组、中度组的IL-2Rα、OAS1高于轻度组,且重度组高于中度组（P<0.05）。重度组、中度组的DNase1L3低于轻度组,且重度组低于中度组（P<0.05）。单因素分析结果显示,SLE患者早期肾损伤与年龄、SLEDAI评分、病程、三酰甘油（TG）、血小板（PLT）、血红蛋白（Hb）、血白蛋白（ALB）、超敏C反应蛋白（hs-CRP）、血尿素氮（BUN）、血肌酐（Scr）、C3、eGFR、血尿酸（UA）、β2微球蛋白（β2MG）、IL-2Rα、OAS1、DNase1L3有关（P<0.05）。多因素Logistic回归分析结果显示年龄、Scr、UA、β2MG、IL-2Rα、OAS1均是SLE患者早期肾损伤的影响因素（P<0.05）。结论：IL-2Rα、OAS1、DNase1L3参与着SLE的疾病进展,其中IL-2Rα、OAS1可与年龄、Scr、UA、β2MG等因素共同辅助评估早期肾功能损伤。     

山羊品种间体细胞核移植研究

萨能奶山羊是著名的奶用山羊品种,波尔山羊则是世界著名的肉用山羊品种.为了研究波尔山羊体细胞在奶山羊卵母细胞中的去分化,我们将成年波尔山羊的颗粒细胞或耳皮肤成纤维细胞作为供核细胞(试验组),移入奶山羊中Ⅱ期的去核卵母细胞透明带下,经电融合和离子霉素与6-二甲基氨基嘌呤(6-DMAP)激活,直接移入同期发情奶山羊输卵管或经体内培养,将发育的重构胚移人同期发情羊子宫内.妊娠早期作B超诊断,确立妊娠的观察至足月.同时将奶山羊的35日龄胎儿成纤维细胞作供核细胞(对照组),按试验组同样方法处理,将重构胚直接移入同期发情的奶山羊输卵管内.结果试验组,波尔羊颗粒粒细胞与耳皮肤成纤维细胞的融合率分别为78.2%(115/147)、57.4%(116/202),重构胚卵裂率为85.8%(115/134),桑椹胚、囊胚的发育率38.8%(52/134),早期妊娠三头,分别于妊娠40、60、60日龄终止妊娠.对照组,融合率为89.5%(136/152),早期妊娠率为42.9%(6/14),四头受体足月分娩,产四头公羊羔,其中三头存活,一头分娩时死于肺不扩张,并体重过大,显示胎儿过大综合症.经基因型鉴定证实,这四头克隆羔羊均源于同一胎儿成纤维细胞系.以上结果表明,波尔羊体细胞核在奶山羊卵母细胞中能够去分化,并维持一定程度的发育.     

鸡痘病毒载体启动子的优化

要提高外源基因在鸡痘病毒（ＦＰＶ）载体的表达量,必须使用强启动子来控制表达。为构建较强的启动子组合,根据痘苗病毒天然启动子Ｐ７．５的结构,人工合成４条寡核苷酸,形成一个早期启动子和一个晚期启动子,其首尾可相互连接。利用分子生物学常用实验方法把合成的启动子进行不同组合,最终形成１０个较有代表性的启动子组合ＰＳ１￣１０。在其下游插入大肠杆菌β－半乳糖苷酸基因ＬａｃＺ,并进一步构建成鸡痘病毒转移载体ｐＦ     

切除子叶对蕹菜幼苗生长发育的影响

蕹菜幼苗中心蔓长与粗,单株分蘖数与分蘖总长度,单株根,茎,叶及整株的鲜重与干重等指标均随子叶切除率增加而呈线性降低。分蘖株率与子叶切除率之间呈无显性线性关系,但处理差异显著,子叶切除对鲜重及干重的冠／根值的影响。未达显著水平。     

四川自贡化石木研究

研究了发现于四川省自贡市距著名的大山铺恐龙化石坑０．５～３ｋｍ处的几株化石木。它们的地质时代与大山铺恐龙动物群相同,地层层位大致相当,属于中侏罗世的下沙溪庙组和新田沟组。根据解剖结构特征,确定它们属于原始的松柏类植物———南洋杉型木属中的一个新种,命名为自贡南洋杉型木新种（ＡｒａｕｃａｒｉｏｘｙｌｏｎｚｉｇｏｎｇｅｎｓｉｓＤｕａｎｓｐ．ｎｏｖ．）。化石木的发现对探讨恐龙的生活环境有重要的意义。     

Transient expression of hepatitis B virus surface antigen (HBsAg) and human erythropoietin (hEPO) genes in milk after direct introduction into ewe

Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆｍｉｌｋｐｒｏｔｅｉｎｇｅｎｅｓｉｓｉｎｖｏｌｖｅｄｉｎａｈｕｇｅｎｅｔｗｏｒｋｏｆｒｅｇｕｌａｔｏｒｙｃｉｒｃｕｉｔｓｗｈｉｃｈａｒｅｌｉｎｋｅｄｔｏｔｈｅｉｎｔａｃｔｄｅｖｅｌｏｐｉｎｇｍａｍｍａｒｙｇｌａｎｄ,ａｎｄｈｏｍｅｏｓｔａｓｉｓｄｕｒｉｎｇｐｕｂｅｒｔｙ,ｐｒｅｇｎａｎｃｙ,ｌａｃｔａｔｉｏｎａｎｄｉｎｖｏｌｕｔｉｏｎ.Ａｎａｌｙｓｉｓｏｆｐｕｔａｔｉｖｅｒｅｇｕｌａｔｏｒｙｅｌｅｍｅｎｔｓａｎｄｈｙｂｒｉｄｇｅｎｅｉｎｔｉｓｓｕｅｃｕｌｔｕｒｅｓｙｓｔｅｍｓ…     

磁场处理对螺旋藻多糖生产影响的初步研究

一定磁场强度（0～0．6T）处理下培养的螺旋藻生长加快,于物质积累增多,由072mp／Inl增加到0．80mg／ml;多糖含量提高,由4．2％增加到5．1％．磁场处理使培养液电导率随磁场强度增加而降低,使NO^-₃-N含量随磁场强度增加而增加,有利于细胞吸收和新陈代谢。     

大剂量瑞舒伐他汀钙治疗老年冠心病合并高脂血症的疗效观察

目的:研究大剂量瑞舒伐他汀钙治疗老年冠心病合并高脂血症的临床疗效。方法:选取2013年10月到2014年10月我院收治的老年冠心病合并高脂血症患者110例,按照随机数字表法将患者分为研究组和对照组,每组55例。两组患者均给予常规治疗方法进行治疗,对照组增加5 mg瑞舒伐他汀钙进行治疗,研究组增加20 mg瑞舒伐他汀钙进行治疗,均每天1次,晚餐后应用,治疗时间为4个月。比较治疗前后两组血脂水平(胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL-C))及高密度脂蛋白(HDL-C)及其达标率以及不良反应。结果:治疗后两组TC、TG以及LDL-C均显著降低,HDL-C显著升高,且研究组优于对照组,比较差异具有统计学意义(P0.05);研究组治疗后TC和LDL-C达标率显著高于对照组,两组比较差异具有统计学意义(P0.05);两组不良反应发生率比较差异无统计学意义(P0.05)。结论:大剂量瑞舒伐他汀钙治疗老年冠心病合并高脂血症具有较好的临床疗效,能显著降低患者的血脂水平。     

体外研究UGT2B7基因SNP rs28365062对霉酚酸酯代谢的影响

目的:体外研究尿苷二磷酸葡萄糖醛酸转移酶(UGT2B7)基因SNP rs28365062对霉酚酸酯(MMF)代谢的影响,明确该位点变异是否与MMF副作用具有潜在关系。方法:采用基因重组、定点突变技术构建UGT2B7基因SNP rs28365062不同等位基因过表达载体,POLO3000转染法将重组过表达载体转染HEK293细胞,采用液相色谱-质谱联用仪(LC/MS/MS)系统检测霉酚酸(MPA)代谢产物--酰基化葡萄糖醛酸化物(Ac MPAG)24小时的生成量来评估转染不同等位基因细胞的酶活性。结果:成功构建过表达载体p IRES2-EGFP-prom(A)和p IRES2-EGFP-prom(G)并转染至HEK293细胞。LC/MS/MS系统检测结果显示携带G等位基因的突变型UGT2B7代谢MMF产生Ac MPAG的能力降低,产物Ac MPAG 24小时的生成量仅为野生型的18.60%(P0.001)。结论:UGT2B7基因SNP rs28365062可显著影响MMF代谢产物Ac MPAG的生成,可能是导致病人对MMF产生不同程度副作用的因素之一。