碱裂解提取质粒DNA的改进

碱裂解提取质粒DNA是分子生物学实验中常用的方法,但通常方法所提取的质粒往往含有大量的RNA和其他杂质.本文适时加入较高浓度的RNA酶和适当延长冰浴时间,结果得到了几乎没有RNA和其他杂质的高纯质粒DNA,不仅达到了分子生物学实验要求,而且可用作抗原检测抗dsDNA抗体.该法操作简单、经济、实用.     

蛋白质组学技术在肉类鉴别及肉质分析中的应用进展

肉制品是人体中蛋白质和多种微量元素的重要来源,但对于肉制品中肉类的鉴别及品质分析的研究受到了传统方法的限制。近年来,蛋白质组学技术的应用极大地推动了肉类鉴别技术的发展,并对肉质形成的潜在分子机制的研究有着深远的影响。主要介绍了蛋白质组学的概念及其研究策略,全面综述了蛋白质组学技术在肉类鉴别和肉质分析中的应用进展,并展望了其研究前景,以期为肉制品的质量控制及肉质影响因素的研究提供理论依据。     

新标准“注射用克痛宁”临床应用镇痛效果观察

目的　评估按国家药品生物制品检定所修订的国家标准生产的“注射用克痛宁” (电泳纯和免疫纯 )的临床应用效果及毒副作用。方法　各种中、重度急慢性疼痛患者 92例 ,肌肉注射给药 ,70 μg/次 ,70～ 1 40 μg/天。慢性疼痛病例一般按疗程用药 ,每疗程 5天 ,急性疼痛病例及部分慢性疼痛病例疼痛消失即停药。以病人曾用过的镇痛药疗效作为历史对照。结果　总有效率 96 .7% ,总显效率 82 .6 % ,首支总有效率 93.5 %。对癌痛组的首支有效率稍低 ,为 84 .2 %。一般在肌注后 30～ 6 0 min起效 ;对急性疼痛疗效可持续 6～ 1 0 h,对慢性疼痛大多可持续 1 2 h或 2 4 h以上。对阿片类药物成瘾患者也有良好效果。少数病人出现轻度口干、恶心、头晕等不良反应。结论　新标准“注射用克痛宁”对各种急慢性疼痛均有良好的镇痛效果 ,起效快、镇痛作用强而持久、不成瘾、毒副作用小 ,且具有潜在的戒毒作用。优于原地方标准的“克痛宁”。     

抓住机遇迎头赶上

四年前,中国生物工程学会曾组织过一次生物工程学术和产业开发研讨会,纯属短期行为,目的仅在于尽所能在学术与产业之间搭过桥,加速产业化进程。而这次有关人类后基因组与中国基因工程产业化的研讨则带有长久战略性目标的探讨。关于后基因组的问题去年９月在张家界学会...     

粘虫核型多角体病毒基因组3.3kb片段的序列测定和分析

本文测定了粘虫核多角体病毒的一个长３３３６ｂｐ的大片段,该片段包括了３个完整的开放阅读框（ＯＲＦ２、ＯＲＦ３、ＯＲＦ４）和两个不完整的开放阅读框（ＯＲＦ１、ＯＲＦ５）。与ＡｃＮＰＶ比较发现,ＯＲＦ１编码重蛋白与Ｐ９４同源,ＯＲＦ３、ＯＲＦ４、ＯＲＦ５分别与ＡｃＮＰＶ的ＯＲＦ６０、ＯＲＦ５９、ＯＲＦ５７同源。且转录方向一致。ＯＲＦ２则是ＬｓＮＰＶ的特有基因。分析结果表明,ＬｓＮＰＶ基因组上基因的组织     

卧龙圈养大熊猫遗传多样性现状及预测,

以中国最大的大熊猫圈养种群—四川卧龙中国大熊猫保护中心的圈养种群为对象,以８个大熊猫微卫星位点为分子标记, 探讨了大熊猫圈养种群的遗传多样性, 并与邛崃野生种群及其他７个濒危物种进行比较。微卫星数据表明, 圈养种群的遗传多样性水平(A＝5.5, He ＝0.620, Ho＝0.574) 低于邛崃野生种群(A＝9.8,He＝0.779,Ho＝0.581),但高于其他7 个濒危物种的种群(He＝0.13~0.46)。在此数据的基础上对未来100个世代内圈养种群遗传多样性的变化情况做出了预测。结果表明假设种群数量比现在扩大一倍, 经历100个世代后也只会使平均等位基因数少减少0.4。因此继续增加野生个体对保持遗传多样性的意义已经不大, 建议该圈养种群的保护策略应将重点放到制定更有效的繁殖计划以避免近交上。     

3-甾酮-Δ1-脱氢酶突变体文库高通量筛选方法的建立

[目的]建立一种快速、高通量筛选3-甾酮-Δ¹-脱氢酶(KstD)突变体库的方法。[方法]基于已发表KstD蛋白晶体结构,设计饱和突变引物,构建突变体文库,优化蛋白表达条件,利用冻融法结合溶菌酶法获得粗酶液;基于分光光度法原理,优化检测反应体系,利用酶标仪检测吸光度的变化来反映酶活力。[结果]利用饱和突变引物成功构建突变体文库,表达KstD最佳条件为：IPTG终浓度0.3 mmol/L,20℃诱导20 h;缓冲液中溶菌酶浓度为0.5 mg/mL时上清目的蛋白含量最高。优化后的酶活检测条件为：Tris-HCl缓冲液50 mmol/L、pH 8.0、0.4 mmol/L DCPIP、1.5 mmol/L PMS、0.7 mmol/L雄烯二酮(4AD)和适量的酶液组成,温度30℃、酶反应时间5 min,于600 nm波长下测定。[结论]成功建立了一种5 min检测96个3-甾酮-Δ¹-脱氢酶(KstD)突变体的高通量筛选方法,重复性变异系数在3%以下。     

丝状真菌的质粒、原生质体转化和外源基因表达

以突变和筛选为中心的传统育种方法在工业微生物发展达到现代的规模始终起到重要作用。近年来随着遗传操纵技术扩大到遗传背景清楚的丝状真菌,探讨应用基因工程技术于工业真菌作为育种的基础兴趣日增。     

植物基因工程进展

一、转基因植物和转化方法二、抗病毒的转基因植物(一)利用基因工程达到抗病毒的几种策略(二)利用病毒外壳蛋白的基因(三)病毒非结构蛋白基因介导的抗性三、抗虫转基因植物(一)预计可能的商品化时间表(二)关于修饰B。tCryIA,CryIA基因密码(三)多途径应用Bt杀虫蛋白基因(四)抗同翅目害虫转基因植物的突破。四。抗真菌性病害的转基因植物(一)抑制核糖体蛋白(二)几丁酶和葡聚糖酶五。抗细菌的转基因植物(一)利用病原细菌天然解毒能力(二)利用天然抗菌肽和溶菌酶六、结束语--简介植物基因工程在培育雄性不育株系,改良植物品质及植物生物反应器方面的应用,以及回顾和展望。     

迈向廿一世纪的生物工程

迈向廿一世纪的生物工程莽克强（中国科学院微生物研究所北京１０００８０感谢大会给我机会做本届大会主题报告。这个主题中该讲的内容太丰富了,短短几十分钟内不可能面面俱到,只能就个人水平选择可能是开拓性的生长点性质的,下世纪前期较有望开花结果的课题。因此只选了基因组计划（或基因组学）、ＤＮＡ药物和农业生物工程新机遇三个题目。此外,细胞凋亡（Ａｐｏｐｔｏｓｉｓ）、细胞循环（Ｃｅｌｃｙｃｌｅ）、ＤＮＡ疫...