抓住机遇迎头赶上

四年前,中国生物工程学会曾组织过一次生物工程学术和产业开发研讨会,纯属短期行为,目的仅在于尽所能在学术与产业之间搭过桥,加速产业化进程。而这次有关人类后基因组与中国基因工程产业化的研讨则带有长久战略性目标的探讨。关于后基因组的问题去年９月在张家界学会...     

新标准“注射用克痛宁”临床应用镇痛效果观察

目的　评估按国家药品生物制品检定所修订的国家标准生产的“注射用克痛宁” (电泳纯和免疫纯 )的临床应用效果及毒副作用。方法　各种中、重度急慢性疼痛患者 92例 ,肌肉注射给药 ,70 μg/次 ,70～ 1 40 μg/天。慢性疼痛病例一般按疗程用药 ,每疗程 5天 ,急性疼痛病例及部分慢性疼痛病例疼痛消失即停药。以病人曾用过的镇痛药疗效作为历史对照。结果　总有效率 96 .7% ,总显效率 82 .6 % ,首支总有效率 93.5 %。对癌痛组的首支有效率稍低 ,为 84 .2 %。一般在肌注后 30～ 6 0 min起效 ;对急性疼痛疗效可持续 6～ 1 0 h,对慢性疼痛大多可持续 1 2 h或 2 4 h以上。对阿片类药物成瘾患者也有良好效果。少数病人出现轻度口干、恶心、头晕等不良反应。结论　新标准“注射用克痛宁”对各种急慢性疼痛均有良好的镇痛效果 ,起效快、镇痛作用强而持久、不成瘾、毒副作用小 ,且具有潜在的戒毒作用。优于原地方标准的“克痛宁”。     

荧光素标记的庚型肝炎病毒基因探针的制备及应用

参考国内外已完成测序的庚型肝炎病毒（ＧＢＶＣ／ＨＧＶ）基因序列,选取毒株间系列较保守的基因片段,并合成与之互补的核苷酸序列（Ａｎｔｉｓｅｎｓｅ）,用末端转移酶将荧光素Ｎ６ｄｄＡＴＰ标记该片段,制成庚肝病毒基因探针。在严格控制温度的条件下,与固定于硝酸纤维膜（ＮＣ膜）上血清斑点杂交,洗膜后与抗荧光素碱性磷酸酶（ＡＰ）结合,加底物后化学发光自显影判断结果。该方法检测与套式逆转录聚合酶链反应（ＮｅｓｔｅｄＲＴＰＣＲ）检测结果的阳性符合率为８８．２％,阴性符合率为１００％;并且与其他相关病毒基因无交叉反应,具有较好的特异性与灵敏性。其检测结果比ＥＩＡ法检测庚肝病毒抗体更具临床意义。     

我国梨果糖酸含量的研究

探讨了国内１３９种鲜梨可溶性糖、可溶性固形物、可滴定酸的含量情况,给出了各种梨的糖酸比,为进一步提高梨的品质、制定绿色食品鲜梨标准提供依据     

TAT-Cloan-DH-EGFP融合蛋白的原核表达及其在舞毒蛾幼虫体内的跨膜转导

【目的】为了探究滞育激素经昆虫取食的生物效应, 需设计一种能够加速跨膜运输的融合蛋白, 克服经昆虫消化道的降解作用。【方法】本研究以分月扇舟蛾Clostera anastomosis滞育激素基因Cloan-DH和TAT穿膜肽编码序列为基础, 构建TAT-Cloan-DH融合基因; 然后以增强型绿色荧光蛋白（enhanced green fluorescent protein, EGFP）为标签, 构建在pET-22b载体中。在0.2 mmol/L IPTG诱导下, 在大肠杆菌Escherichia coli BL21 Rosetta(DE3)中表达出TAT-Cloan-DH-EGFP融合蛋白。 再分别将表达有TAT-Cloan-DH-EGFP和EGFP融合蛋白的大肠杆菌BL21菌体拌入人工饲料,经舞毒蛾Lymantria dispar幼虫持续取食0, 8, 24, 48, 72和90 h后, 随机挑选试虫进行组织固定并制作石蜡切片, 选取中肠所在体段切片进行组织荧光分析。【结果】37℃ 0.2 mmol/L IPTG诱导条件下, 表达的TAT-Cloan-DH-EGFP融合蛋白的分子量为61 kD, 主要以包涵体形式表达, 融合蛋白约占细胞总蛋白含量的18.1%; 随着试虫取食含TAT-Cloan-DH-EGFP融合蛋白饲料的增加, 虫体组织的绿色荧光强度逐渐增加, 取食72 h后, 组织荧光强度达到最高。【结论】实验结果说明融合蛋白TAT-Cloan-DH-EGFP可以通过消化道横向跨膜运输, 到达虫体其他组织, 且该过程与蛋白的摄入量成比例。     

3-甾酮-Δ1-脱氢酶突变体文库高通量筛选方法的建立

[目的]建立一种快速、高通量筛选3-甾酮-Δ¹-脱氢酶(KstD)突变体库的方法。[方法]基于已发表KstD蛋白晶体结构,设计饱和突变引物,构建突变体文库,优化蛋白表达条件,利用冻融法结合溶菌酶法获得粗酶液;基于分光光度法原理,优化检测反应体系,利用酶标仪检测吸光度的变化来反映酶活力。[结果]利用饱和突变引物成功构建突变体文库,表达KstD最佳条件为：IPTG终浓度0.3 mmol/L,20℃诱导20 h;缓冲液中溶菌酶浓度为0.5 mg/mL时上清目的蛋白含量最高。优化后的酶活检测条件为：Tris-HCl缓冲液50 mmol/L、pH 8.0、0.4 mmol/L DCPIP、1.5 mmol/L PMS、0.7 mmol/L雄烯二酮(4AD)和适量的酶液组成,温度30℃、酶反应时间5 min,于600 nm波长下测定。[结论]成功建立了一种5 min检测96个3-甾酮-Δ¹-脱氢酶(KstD)突变体的高通量筛选方法,重复性变异系数在3%以下。     

重离子射线局部照射技术在昆虫机能解析中的应用

为了探索重离子射线局部照射使昆虫体内某一特定的组织或器官失去活性这一放射线显微手术技术的有效性和可能性,用碳离子射线（¹²C⁵⁺,18.3MeV/u）对家蚕Bombyx mori幼虫进行了全体照射或局部照射。 研究结果表明： 与全体照射不同,局部照射后的个体与对照个体在存活率及茧质等性状上没有明显的差异,只是由于照射剂量及照射部位的不同,在照射部位出现局部的影响。对4龄第3天幼虫的造血器官进行局部照射后,其造血功能遭到破坏,血液中的游离血球数明显下降。因此利用重离子射线局部照射技术能够替代某些传统的外科手术,破坏昆虫体内特定的组织或器官,以便进行该器官或组织的机能研究。     

镉和增强紫外线-B辐射复合作用对大豆生长的影响

研究了Cd^2+和增强紫外线-B(UV-B)辐射以及二者复合胁迫(Cd+UV-B)对大豆生长、光合作用、抗氧化酶活性和吲哚乙酸(IAA)氧化酶活性的影响,结果表明,UV-B辐射对大豆生长较CA^2+有更明显的抑制作用,主要是降低了光合作用,生物量减小;抑制节间的分化和伸长,节间减少,株高降低。UV-B辐射对POD、SOD活性有显著诱导作用,而Cd^2+明显颉颃UV-B对POD活性的诱导并抑制IAA氧化酶活性．在复合作用下,植物体内IAA氧化酶和POD活性较UV-B单独作用下显著降低,这两种酶活性降低会引起植物体内IAA含量升高,同时光合作用略有升高,这是株高和生物量较UV-B作用下有所增加的重要原因,复合胁迫还增强了对根伸长生长的抑制作用,根长度较对照显著降低(P<0．05)。IAA氧化酶和POD活性变化以及光合强度变化与大豆株高和生物量变化密切相关,这也是复合胁迫影响大豆生长状况的重要因素。