大豆GmPDS基因的克隆及VIGS表达载体构建和鉴定

病毒诱导的基因沉默(virus induced gene silencing,VIGS)技术是近年来发展起来的一种反向遗传学快速研究基因功能的方法,对于植物特别是难于转化的大豆而言尤其适用。本研究采用PCR技术从大豆(Glycine max)基因组中克隆了八氢番茄红素去饱和酶(phytoene desaturase,PDS)基因的部分序列,命名为GmPDS(Glycinemax PDS)。该片段长430bp,序列分析表明,该基因与大豆八氢番茄红素去饱和酶(GenBank登录号:M64704)cDNA序列同源性为99%。双酶切GmPDS片段和烟草脆裂病毒载体(pTRV2),构建了重组载体pTRV2-GmPDS,并将该重组载体分别转化农杆菌C58C1/pMP90、GV3101和LBA4404,为分析pTRV载体是否可以浸染大豆奠定了基础。     

响应面法优化唐古特白刺种子总黄酮超声提取工艺

利用响应面法优化超声辅助提取唐古特白刺种子总黄酮的工艺。在单因素试验基础上筛选出乙醇浓度、超声时间、超声温度三个主要因素,并通过响应面分析得出最佳组合条件为:乙醇浓度66%,超声时间68min,超声温度42℃,在此最佳条件下实际测得总黄酮含量为1.20%,接近于模型预测值1.21%。试验结果表明,采用响应面法优化得到的工艺条件参数准确、可靠,具有实用价值。     

白细胞介素21对SHIV感染的恒河猴外周血CD8~＋ T细胞分泌γ干扰素的影响

目的研究白细胞介素21（interleukin 21,IL-21）对SHIV感染CD8＋T细胞分泌干扰素γ（interferon-γ,IFN-γ）的影响。方法从SHIV/恒河猴模型外周血中分选出CD8＋T细胞,加入IL-21诱导培养,应用ELISA方法检测细胞培养上清液中IFN-γ浓度,RT-PCR方法检测细胞中IFN-γmRNA的表达水平,流式细胞术检测分泌IFN-γ的CD8＋T细胞所占的百分比。结果 10 ng/mL IL-21明显促进CD8＋T细胞分泌IFN-γ（P〈0.05）,IFN-γmRNA的表达明显升高,4 h为刺激CD8＋T细胞胞内IFN-γ合成的最佳时间。结论 IL-21对CD8＋T细胞分泌IFN-γ有促进作用。     

柴达木盆地唐古特白刺果实调节免疫、抗疲劳和耐寒冷作用研究

采用环磷酰胺所致的免疫功能低下的模型小鼠试验柴达木盆地唐古特白刺果实的免疫调节作用,并进行了抗疲劳和耐寒冷试验。结果显示：唐古特白刺果实3．6g/kg灌胃剂量能显著增强模型小鼠单核巨噬细胞吞噬功能、迟发性超敏反应;1．8g/kg和3．6/kg灌胃剂量能显著提高模型小鼠血清溶血素生成能力;3．6g/kgg灌胃剂量可显著减轻环磷酰胺对小鼠胸腺DNA含量的抑制作用;3．6g/kg灌胃剂量能显著延长小鼠的游泳时间和爬杆时间,并能提高小鼠在低温的存活时间。实验表明唐古特白刺果实具有调节免疫、抗疲劳和耐寒冷作用。     

W135群脑膜炎球菌发酵工艺的研究

为研究A、C、Y、W 135群流脑多糖疫苗,针对W 135群脑膜炎球菌的生长特性,采用国产50L发酵罐,针对流脑半综合液体培养基中葡萄糖浓度;培养温度、菌种接种浓度、pH、通氧量及搅拌速度等因素对W 135群脑膜炎球菌生长的影响,选择最适的培养条件。结果表明,选择半综合培养基中补加1%的葡萄糖培养效果良好,菌种接种浓度直接影响多糖复合物产量;最适pH值6.5~7.5的范围可维持W 135群链球菌快速生长;温度控制在36.5±0.2℃可得到较高的培养产物;培养过程中加大通气量及搅拌速度对培养结果有明显改善。确立了W 135群脑膜炎球菌的最适培养条件,在确定培养条件后连续进行3批500L罐放大中试培养,达到规模化生产要求。     

阻断白色念珠菌粘附口腔膜上皮细胞的实验研究

白色念珠菌的粘附与其表面甘露糖结构有关,为探讨阻断粘附的方法,我们采用体外法测定其对口腔上皮细胞的粘附数量,显示：白色念珠菌粘附感染上皮细胞后,甘露糖可以在一定程度上减少粘附,绿慕安及刀豆素A可以有效地减少粘附。提示甘露糖及绿慕安可能有助于治疗白色念珠菌感染。     

聚乙二醇修饰牛血清白蛋白的反应与分析

采用N,N′-羰基二咪唑活化法活化单甲氧基聚乙二醇5000分子一端的羟基,对活化后的单甲氧基聚乙二醇分子进行了元素分析。用该活化产物对牛血清白蛋白的赖氨酸侧链氨基进行化学修饰。应用毛细管电泳对聚乙二醇修饰后的产物进行了分析,并与高效液相色谱分析结果作了对照研究,表明毛细管电泳对修饰后的牛血清白蛋白有更好的分析效果。     

氧调节蛋白150在人肝细胞癌中的过度表达及其对凋亡的作用

在前期研究中发现,氧调节蛋白150(ORP150)是与肝细胞癌相关的糖蛋白．进一步研究了ORP150的表达水平与肝细胞癌的相关性．免疫印迹、细胞免疫化学和定量PCR分别在蛋白质水平和mRNA水平检测了ORP150的表达．运用RNA干扰技术检测了其对凋亡和肝细胞癌侵袭性的影响．发现：无论是蛋白质水平还是mRNA水平,与正常肝细胞相比,ORP150在肝细胞癌中表达明显上调;经RNA干扰后,肝细胞癌的凋亡明显增加,但肿瘤细胞的侵袭性无改变．肝细胞癌中,ORP150表达上调,它可能抑制肿瘤细胞的凋亡而促进其生长．ORP150有可能成为肝细胞癌的治疗靶点．     

海洋浮游生物的生态化学计量学研究进展

生态化学计量学可以简单定义为从分子到生物圈的元素生物学,其跨越了环境和生命的各个层次,是构建从分子到生态系统统一化理论的新思路,是生态科学发展的必然趋势.海洋生物占地球生物圈总生物量的50%,是全球生物地球化学循环的重要组成部分,而浮游生物作为海洋生态系统物质循环和能量流动的重要环节,在海洋生态系统元素循环过程中起着关键作用.但是目前关于海洋浮游生物生态化学计量学的研究较零散和缺乏.因此,本文从限制元素影响海洋浮游生物的生态现象和机理、生化物质对营养限制的响应、营养限制的食物链传递与反馈4方面,对海洋浮游生物化学计量学研究进行综述,分析了该领域当前存在的问题,并对我国海洋浮游生物生态化学计量学研究的发展重点提出了展望.
     

纳豆枯草杆菌培养滤液对家兔离体肠平滑肌的作用

目的观察纳豆枯草杆菌培养滤液（culture filtrate,CF）对家兔离体肠平滑肌的作用,并初步探讨其作用机制。方法制备兔离体回肠标本,分别记录肠平滑肌的正常收缩张力和收缩频率作为给药前对照,然后按累积剂量分别加入CF小剂量（每次0．2mL）、CF大剂量（每次0．5mL）、肉汤（每次0．5mL）,给药间隔3min,共给药8次,并描记收缩曲线。观察不同剂量cF对肠平滑肌的作用。另取肠段按毛果芸香碱、CF或阿托品、再毛果芸香碱的顺序给药,观察CF对M胆碱受体的作用。结果CF小剂量组在累积给药达1．6mL时,CF大剂量组在累积给药达3．5mL和4．0mL时,兔离体肠平滑肌收缩张力下降,与给药前比较差异有统计学意义（P〈0．05）,其余各点差异均无统计学意义（P〉0．05）。CF小剂量组在累积给药达1．2、1．4、1．6mL时,CF大剂量组在累积给药达4．0mL时,兔离体肠平滑肌收缩频率明显降低,与给药前比较差异有统计学意义（P〈0．05或P〈0．01）,其余各点差异均无统计学意义（P〉0．05）。CF或阿托品可明显对抗毛果芸香碱引起的兔离体肠平滑肌收缩张力的增加（P〈0．05或P〈0．01）,同时CF还能使其收缩频率明显减少（P〈0．01）。结论纳豆枯草杆菌CF能明显抑制兔离体肠平滑肌蠕动,其作用机制可能与阻断M胆碱受体有关。