病毒病诊断发展概况

病毒病种类繁多,累及人类全身各个系统。一种病毒感染症候群可由多种不同的病毒感染造成;反之,一种病毒感染可以表现为多种临床症状。就由微生物致病因子所引起疾病总数而言,年发病率和病死率总数的50％以上是病毒造成。所以,病毒病特异性诊断十分重要,其意义在于:(1)明确感染病因,以便临床及时对症治疗,避免滥用抗生素,减少医院内交叉感染,防止疾病扩散。     

中国急性弛缓性麻痹(AFP)病例中脊髓灰质炎病毒疫苗株VP1区基因变异的研究

为研究中国急性弛缓性麻痹(AFP)病例中脊髓灰质炎(简称脊灰)病毒分离株的分子特征,为中国继续维持"无脊灰野毒状态"提供理论依据,对2002年所有省级疾病预防控制中心送检的脊灰分离株,用PCR-RFLP法及ELISA法进行型内鉴定.用PCR-RFLP法筛查出与疫苗株相比有异常酶切图谱的毒株共24株,其中Ⅰ型毒株1株,Ⅱ型毒株21株,Ⅲ型毒株2株;用ELISA法筛查出与疫苗株相比有不同的抗原抗体反应的毒株共22株,其中Ⅰ型毒株7株,Ⅱ型毒株4株,Ⅲ型毒株11株,在7株Ⅰ型毒株中有3株为非疫苗类似株(NSL),其余为双反应毒株(DRV).随后对这46株毒株进行了全VP1区的基因序列分析.结果表明:2002年脊灰分离株都是疫苗株或疫苗衍生株,没有发现野毒株,中国继续保持着"无脊灰野毒状态";口服减毒活疫苗(OPV)株与其它野毒株在稳定性性质方面是类似的,即通常是不稳定的,在人体肠道内有很强的选择性;在人体肠道内,病毒复制产生的基因变异导致毒力升高,是引起疫苗相关麻痹病例(VAPP)的重要原因,但宿主本身的因素也有很大的作用;在局部地区有疫苗株的循环或脊灰疫苗衍生株(VDPV)的存在;最终消除疫苗株引起的AFP病例可能还需要脊灰灭活疫苗(IPV)的介入.     

检测脊髓灰质炎IgM抗体捕捉法ELISA的建立及其在早期快速诊断中的应用

首次建立了用于脊髓灰质炎快速、分型诊断的血清IgM抗体捕捉法ELISA。检测了52例疑似病人,IgM阳性率为76.9％(40/52),而粪便病毒分离率仅为44.2％(23/52),前者的阳性检出率明显高于后者。做病毒分型诊断结果,与分离病毒中和试验定型的总符合率为92.86％(39/42)。检测601例来自全国各省的脊灰疑似病人血清,其阳性率波动于13％～92.3％,平均为61.1％。阳性率与收集血清的病日相关,发病0～3天收集者,阳性检出率为69.5％,4～25天者为64％,26～54天者为52％,55天以上者则未能检出。本检测方法需时1.5天,简便、敏感、特异,重复性良好,适用于脊灰的早期快速诊断。对其实用性进行了讨论。     

用改进的ELISA法检测腺病毒抗原

用改进的ELISA法检测94份咽拭子标本中的腺病毒抗原,标本先接种人肾细胞,使病毒有一定程度的增殖,同时与传统的病毒分离作对比,结果表明,腺病毒分离阳性的18例,ELISA法检测全部阳性,76例分离阴性(盲传3代)者ELISA法也全都阴性,两者完全相符,ELISA法检测增殖24、48、72小时的细胞培养物腺病毒抗原的阳性率分别为16.7％,72.2％和83.3％,本法特异、可靠、判断客观、可用来检测腺病毒抗原。     

呼吸道合胞病毒的冻干保存

呼吸道合胞病毒是引起婴幼儿急性下呼吸道感染的重要病原之一。但该病毒很不稳定,常规法冻干保存往往丧失活性。因此,国内外多采用液氮保存,耗费大,运送不便。国内也有加等量甘油-20℃保存     

ELISA间接法检测呼吸道合胞病毒和副流感病毒血清IgM和IgA抗体

建立了检测呼吸道合胞病毒(RSV)和副流感病毒(PFV)血清特异性IgM和IgA抗体的间接ELISA方法。在方法统一的基础上比较了检测IgG、IgM和IgA抗体的结果,证明检测血清IgM和IgA可以作为RSV和PFV感染的早期诊断指标。检测了120份临床急性下呼吸道感染患儿的血清,RSV-IgM检出率为33.3％,RSV-IgA为36.7％;PFV-IgM为27.5％,PFV-IgA为31.6％。提出了对RSV和PFV感染以检测特异性IgA替代IgM或两者互补的设想。     

用核酸杂交法检查北京地区幼儿园正常儿童尿中人巨细胞病毒DNA

以克隆的人巨细胞病毒(Human Cytomegalovirus,简称HCMV)DNA片段做探针,用核酸杂交方法检查了50例北京地区幼儿园正常儿童的尿标本。查出HCMV DMA阳性者24例,占48％。在两个群体和两个年龄组之间,阳性检出率有显著性差异。利用探针可查出同源DNA5～10pg,而不与其它病毒或细胞DNA杂交。标记不同的探针,使用不同的固定方法,其敏感性不同。此法可在分子水平上查出HCMV基因,比分离病毒更迅速敏感。     

一种与肠道病毒相关的新的疾病——“纸坊”病病因的研究

1985年4月至10月,贵州省沿河县大漆乡纸坊村发生了病因不明的流行病。全村约1/5的人发病,起病急,轻症者表现为头晕,乏力,肌痛,多汗,心悸,伴以低热(38℃以下)。部份病人起病初期有短暂的腹泻,为稀便,无脓血。重症者具有高热(40℃以上),大汗,心悸,游走性肌索痉挛性隆起,伴有明显触痛,以腰骶部及四肢肌肉为多发部位,病人烦燥     

高价麻疹单克隆抗体的研制和应用

作者曾报道过,获取高价单克隆抗体(McAb)与免疫方法有关。本文报道获得麻疹高价单克隆抗的途径,以及将其用作捕捉抗体以提高ELISA双抗体夹心法检测麻疹IgG抗体的敏感性。     

用ELISA测IgM法进行脊髓灰质炎病毒感染的早期快速特异性诊断

早期、快速、特异地诊断脊髓灰质炎(简称脊灰)病人,不仅可帮助临床医生正确治疗病人。而且对防疫医生争取时间采取措施,防止第二代病例发生,及时控制疫情蔓延具有重要意义。所建立的捕捉法ELISA检测患者血清或脑脊液中抗脊灰病毒IgM抗体的诊断方法,能在麻痹出现的当天起的一个半月内查到特异性抗体,帮助确诊。