采取过滤网上的灰尘检测小鼠肝炎病毒的新方法的研究--基因检出法的应用

采用PCR法对不同样品进行检测 ,其目的是寻求在小鼠肝炎病毒 (MHV)感染早期 ,可以尽快检测出MHV的一种最佳检测材料。将被感染小鼠的新鲜粪便、干燥粪便、笼具过滤网上的尘埃以及病毒液作为基因检测样品 ,进行检测并比较检出的灵敏度。将灵敏度量化 ,以稀释成不同浓度的cDNA用巢式PCR法能够检出的稀释界限的倍数表示。其结果 :第一 ,从过滤网中的尘埃所得到的cDNA是新鲜粪便的 10 0倍 ;第二 ,从粪便检出的灵敏度不以粪便的干燥而发生变化。第三 ,如果将病毒液放在室温下 ,会随室温干燥 ,检出的灵敏度会大幅度的降低。从以上结果看 ,在过滤网上的尘埃中有大量的MHV存在 ,尘埃中的一部分病毒 ,即使放在室温也能够以稳定状态存在。作者认为 ,将饲育装置的排气过滤器中粘着的尘埃收集 ,作为检测的样品 ,结合巢式PCR法进行测定 ,对于频繁地检测单个饲育笼具或单元式饲育室内的MHV比较简便易行 ,是一种较好的早期监测感染鼠肝炎病毒的方法。     

猪水泡病病毒VP2基因抗原区在大肠杆菌中的表达

利用RT_PCR技术 ,以SVDVHK’70为材料 ,扩增出VP2基因抗原区。将目的基因的PCR扩增产物直接进行双酶切 ,然后将酶切产物与酶切后的表达载体pGEX 4T_1进行连接 ,转化BL2 1菌体并提质粒 ,经酶切、PCR鉴定为阳性的重组质粒命名为pGEX_VP2 ,并测序。测序结果表明 ,目的基因插入的位置、大小和读码框均正确 ,表达载体构建成功。将含有阳性质粒的BL2 1菌液经IPTG诱导后进行SDS_PAGE分析 ,出现预期的目的蛋白条带 ,此目的蛋白经Westernblot检测确定其有免疫活性。     

苜蓿品种(系)对苜蓿斑蚜存活率和生殖力的影响

在田间抗蚜性鉴定的基础上,在室内25℃条件下,选用4个抗蚜性不同的苜蓿品种(系),测定了不同苜蓿品种(系)上苜蓿斑蚜Therioaphis maculate (Buckton)若虫存活率及生殖力的影响。结果表明: 苜蓿斑蚜在不同苜蓿品种（系）3、6叶期及成株期的存活率均以HA-3上最低,分别为8.00％±1.15％,21.27％±7.40％,17.07％±3.03％;Hu上最高,分别为25.63％±3.68％,42.27％±2.76％,55.10％±0.19％;且苗期显著低于成株期。以若虫存活率和内禀增长率作为测定抗生性的指标,供试品种(系)对苜蓿斑蚜抗生性的大小依次为HA-3>G3>JH>Hu,与田间抗性鉴定结果基本相近。     

林麝泌香的分子机制研究进展

林麝(Moschus berezovskii)是国家Ⅰ级重点保护野生动物,以分泌麝香而闻名。麝香是雄性林麝的香腺分泌的特殊物质。由于过度猎杀取香、栖息地破碎等原因,野生林麝的数量急剧下降至濒危。自1950年代以来,我国开展了人工养殖林麝,积累了丰富经验,取得了一定成果,但在林麝营养需要、饲料加工与饲养管理、遗传特征与选育、繁殖、泌香机理与取香等基础理论及关键技术方面研究进展不大,所以,林麝种群扩繁速度低,种群规模不大,麝香产量不高。本文综述了近年来有关林麝香腺的显微与超微结构、麝香的分泌形成过程、利用分子标记研究麝香的分泌、性激素基因与林麝麝香分泌的关系、林麝泌香相关基因组与转录组研究等方面的研究进展,以期为深入研究林麝泌香的分子机制提供参考。     

短叶茳芏绿色与立枯地上生物量估测模型

建立异速生长方程是非破坏性植物地上生物量(AGB)估测的常用方法。短叶茳芏(Cyperus malaccensis)是闽、粤等沿海省份河口湿地中常见的大型挺水植物,然而关于其AGB的异速生长方程还未见报道。本研究在年尺度逐月测定了闽江河口湿地短叶茳芏植物的株高、基径以及鲜重和干重。基于这些指标建立了不同精度和实用性的短叶茳芏单株绿色和立枯AGB(干重和鲜重)的异速生长方程。本文推荐的单株绿色植株干重和鲜重(g)AGB模型分别为y=exp(0.14x²+0.32x-4.28)和y=exp(0.08x²+0.58x-2.56),单株立枯干重(g)模型为y=exp(1.48x-6.76)(方程中x为株高(cm)的自然对数)。在单株绿色植株AGB模型的基础上,建立了单位面积绿色植株AGB的快速估测模型。本研究提出的建模方法对中国河口、滨海其他盐沼植物AGB的建模有一定的借鉴意义,所建模型可为我国滨海短叶茳芏湿地AGB估产及蓝碳碳汇估算提供技术支撑。     

Zn(Ⅱ)——蛋白质络合物的极谱研究与应用

蛋白质的NaOH-盐酸胍溶液在60℃恒温水浴中加热后与Zn(II)反应生成稳定的络合物,在pH9.4的NaOH-NH4Cl缓冲介质中于单扫描示波极谱上产生一灵敏的极谱波,Ep在-0.60V左右(vs,SCE),其一阶导数波高Hp与蛋白质浓度成线性关系.相关系数R达0.998以上,检测限为0.1μg/mL.利用该波可以测定人血清样品中蛋白质的含量,结果与经典的考马斯亮蓝染色法相一致,方法具有简便、灵敏、取样量少等优点.     

植物绿叶粗蛋白在SDS—PAGE中向负极泳动的富含苯丙氨酸的碱性蛋白的测定

提取菜心(BrassicacampestrisL.ssp.chinensis(L.)Makinovar.utillisTsenetLee)和生菜(LactucasativaL.)绿叶粗蛋白,经SDS-变性后作醋酸纤维素薄膜电泳,证实这两种蔬菜含有分别向负极泳动和向正极泳动的蛋白。菜心绿叶粗蛋白经SDS-PAGE电泳后,从负极电泳缓冲液中获得向负极泳动的蛋白,其苯丙氨酸含量为57.05%,碱性/酸性氨基酸残基的比例为3.04,表明是富含苯丙氨酸的碱性蛋白。