N—甲基吩嗪为介体辣根过氧化物酶传感器的研究

研究了将Ｎ－甲基吩嗪作为介体,通过牛血清白蛋白和戊二醛使其作为结合到玻碳电极上去的辣根过氧化物酶生物传感器。该酶电极对过氧化氢有良好的响应,Ｎ－甲基吩嗪还原电流的增值与过氧化氢浓度在１×１０－６～５×１０－４ｍｏｌ／Ｌ范围内有良好的线性关系,该传感器灵敏度高,检出限为１０－７ｍｏｌ／Ｌ,对过氧化氢的响应时间小于１０ｓ。     

蕙兰CyfaSTK基因的克隆与表达分析

采用同源克隆的方法,从蕙兰（Cymbidium faberi Rolfe）花芽中克隆获得CyfaSTK基因的cDNA序列,并对其进行生物信息学分析及基因表达分析。结果显示,该基因全长843 bp,其中开放阅读框（ORF）长705 bp,共编码234个氨基酸和1个终止密码子。同源蛋白序列比对及分子系统发育分析结果表明,CyfaSTK蛋白属于D类MADS-box转录因子STK-like进化系,含有MADS、I、K和C等4个结构域,其C末端转录激活区含有2个保守的基元：AG motifⅠ和AG motifⅡ,此外,还具有一个在天门冬目植物中相对保守的基元MD motif。基因表达的组织特异性分析结果显示：蕙兰CyfaSTK基因在花萼、花瓣、唇瓣、药帽、子房中均有表达,但在叶片中不表达,其中在子房中的表达量与其他组织相比,差异达到极显著水平;CyfaSTK在花芽经过休眠后的萌动期表达量最高,且在开花当天该基因表达量有上升趋势。研究结果表明CyfaSTK基因不仅参与调控蕙兰花器官的发育过程,且对子房及合蕊柱的正常发育具有重要作用。     

部分感觉器官的超微结构

图1.角膜的扫描电镜图像该图为家兔角膜,上半部为复层扁平上皮的游离面,下部为角膜断面。可见复层扁平上皮由5—6层细胞组成(EP),基底面平滑无乳头,固有层(LP)中胶原纤维层的走行方向与上皮表面相平行。×600 图2.晶状体的扫描电镜图像图为大鼠晶状体纤维的表面形象,不少部位可见其断面,完整的晶状体纤维呈长扁平带状,定向平行排列,结构非常规律。×1,800 图3.视网膜的扫描电镜图像图为人视网膜,左     

带HSV-tk基因的重组腺病毒基因治疗小鼠B16黑色素瘤的实验研究

我们成功开展了携带单纯疱疹Ⅰ型病毒胸腺嘧啶激酶基因(Herpes simplex virus thy-midine kinase,HSV-tk)的复制缺陷型重组腺病毒Ad(HSV-tk)结合使用GCV治疗C 57 BL/6小鼠B 16黑色素瘤的离体及动物试验。导入了HSV-tk基因的B16细胞对GCV的杀伤作用高度敏感,IC_(50)约为0.1μg/ml;感染与未感染Ad(HSV-tk)的B 16细胞混合后,可观察到显著的细胞毒杀伤作用——“旁观者效应”。Ad(HSV-tk)直接注入C57BL/6小鼠已建成的B16黑色素瘤内,结合连续6 d腹腔给予GCV,肿瘤结节出现萎缩坏死现象,大小仅为对照组的1/25。灵敏的RT-PCR检测结果表明:瘤内注射Ad(HSV-tk)后,腺病毒的扩散范围是有限的,HSV-tk基因的表达局限于肿瘤组织内。因此,Ad(HSV-tk)/GCV疗法可能为黑色素瘤等恶性实体瘤的治疗提供了一种较为有效、安全的选择方案。     

靠近5′端帽子的上游AUG不影响t-PA mRNA的翻译

大多数真核生物mRNA的翻译起始都符合Kozak提出的扫描学说,即40s小亚基携带相应的起始因子进入mRNA的5′末端,沿mRNA线性滑动,至第一个AUG起始密码处与60s大亚基结合,形成第一个肽键,然后进入肽链延伸阶段。本课题组所构建的重组质粒pMM 5065含人组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)cDNA。序列分析证明,该质粒中t-PA起始密码子ATG的5′端序列为:AAGCTTGCATGCCTGCAGGTC ATG GAT……,可见转录后t-PA mRNA起妈密码子AUG的5′端还有一个AUG三联体(即上游AUG),形成一个较长的与t-PA框架不同的阅读框     

基因工程人γ干扰素C端的结构分析及功能作用

基因工程人γ干扰素经溴化氰裂解后进行HPLC分析,发现C端肽缺失。毛细管电泳?及氨基酸序列定量分析结果进一步指出,其C端不仅缺失,而且不均一,分别以Lys—125,Lys-128和Lys-13O为末端。用wIsH／VSV系统测定其抗病毒效价,比活性为3x10⁷Iu／mg,说明其C端缺失13-18个氨基酸残基时并不影响活性。本文还讨论了C端断裂的可能原因。     

马蹄香属的核型及其系统学意义

本文对中国特有单种属－马蹄香属进行了细胞学研究,首次报道马蹄香花粉母细胞的单倍体染色体数目ｎ＝１３,体细胞的染色体数目为２ｎ＝２６,ｘ＝１３,核型公式为２ｎ＝１２ｍ＋４ｓｍ＋１０ｓｔ,染色体的范围２．５１－６．８０μｍ,为中型染色体,２Ｂ核型。这与前人报道的２ｎ＝２４,２Ａ核型和２ｎ＝４ｘ＝５２,染色体长度不超过１μｍ、是多倍体等结果均不相同。马蹄香是马兜铃科中最原始的属,核型资料表达它与细辛属部     

保留腱索换瓣和瓣叶腱索乳头肌成形术的一些技术探讨——二尖瓣装置应用基础研究的启示

近5年来,我国在二尖瓣手术中,两种术式在逐渐增多,其一是保留腱索换瓣,其二是包括瓣叶、腱索及乳头肌为矫正对象的二尖瓣成形术。在保留腱索换瓣中,医院之间的效果相差甚远,作者施行的71例中,无1例因人造瓣梗阻而发生不良后果。在二尖瓣成形术中,对瓣叶的矫形争论颇多,而腱索或乳头肌的矫形尚在积累经验阶段,作者施行成形术     

全国首届新学说新观点学术讨论会在京举行

为倡导学术创新精神,推动学科发展,培养跨世纪新一代学科带头人,由中国科协主办、16个全国性学会联办的全国首届新学说新观点学术讨论会于1993年12月21～22日在北京举行。 为新学说新观点召开专门全国性会议在我国尚属首次,这个学术活动与其它学术会议不     

t-PA在哺乳动物细胞中的表达调控及高效表达

人组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)对纤维蛋白有较强的亲和力,可选择性溶解血栓而不引起全身出血倾向,所以是一种较理想的溶血栓药物。美国的重组t-PA已通过FDA批准,应用于临床,每年销售达数亿美元。国内上医,北大,南大及我所先后开展了t-PA在CHO细胞中的表达的研究,经多年努力表达水平约1～2μg(200～400IU)/10~6细胞/24小时,但该水平离中试生产尚有差距。