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目的:建立用糖基工程酵母制备流感血凝素的方法 ,研究其免疫原性,为酵母表达流感疫苗提供基础。方法:通过PCR的方法扩增编码H1N1流感病毒血凝素HA1(1~330 aa)的基因片段,将HA1基因克隆到表达载体pPIC9质粒上,电转化到糖基工程酵母中,甲醇诱导表达并用镍亲和层析柱纯化重组蛋白,N-糖苷酶F(PNGF)酶切分析N-糖链,Western印迹验证纯化蛋白,免疫小鼠并测定HA1诱导抗体的滴度。结果:获得HA1基因的酵母重组表达菌株,SDS-PAGE分析可见野生型GS115表达的重组HA1相对分子质量约为100×103,而糖基工程酵母GJK01表达的HA1约为60×103,PNGF酶切后相对分子质量均降至45×103左右;经Western印迹检测,这些条带均为目的蛋白条带,野生型和糖基工程酵母表达的HA1分子大小不同是由于不同的N-糖基化修饰引起的。重组HA1免疫小鼠可产生抗HA1抗体,随着抗原剂量的增加,其产生的抗体滴度相应增加;3次免疫后,4μg HA1诱导小鼠产生的抗体滴度最高。结论:利用糖基工程酵母表达制备了低糖化的流感病毒血凝素HA1,该重组蛋白可以诱导小鼠产生HA1抗体,且产生的抗体滴度具有HA1剂量依赖性。 相似文献
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平阳霉素自发现以来一直作为抗肿瘤的一线用药得到人们的广泛关注。近年来,将平阳霉素制备成微球剂型,改变其体内代谢过程,延长药物的作用时间,增强平阳霉素的疗效成为医药学界的研究热点。本文首先通过平阳霉素与博来霉素的对比体现出平阳霉素的优势;之后对平阳霉素的临床应用、不良反应等方面进行了相关介绍,经总结得出平阳霉素具备高效低毒的特点;最后对平阳霉素微球研究的最新进展进行了概括,并提出了该药物在未来应用方面的展望。 相似文献
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EST-PCR产物测序是EST标记开发的重要步骤.本研究利用乙醇-醋酸钠法、清洁试剂盒、虾碱磷酸酶(SAP)-核酸外切酶Ⅰ(Exo Ⅰ)法和凝胶回收试剂盒4种方法,对6个桉树EST-PCR产物的纯化效果和测序结果进行了比较,推荐乙醇-醋酸钠法为首选的纯化方法;利用测序试剂盒Bigdye TerminatorV 3.1,对1/2、1/4、1/8、1/16和1/32标准用量(8.0μL)的测序结果的分析表明,1/16和1/32用量仍可有效测序,均可作为优先的测序试剂用量.同时,也发现EST-PCR扩增谱带单一、明亮的序列与设计的目标EST具有较好的同源性,开发SNP和Indel标记的潜力极大,但较弱的谱带则可能是非特异性扩增的产物.乙醇-醋酸钠法纯化和BigdyeTerminator 1/16或1/32用量的测序方案,具有成本低和操作简便的优点,适合96孔板或384孔板大规模EST-PCR产物的测序. 相似文献
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目的:探讨血浆超敏C反应蛋白(hs-CRP)和同型半胱氨酸(Hcy)水平与血管性痴呆(VD)患者认知功能的相关性。方法:回顾性分析2011年12月-2014年7月间我院100例脑梗死住院患者的临床资料,按诊断结果,将患者分为VD组55例和非VD组45例,另选取同期50例健康体检者为对照组。检测并比较3组血浆hs-CRP和Hcy水平,采用简易精神状态速检表(MMSE)对VD组进行痴呆程度分类,分析其与血浆hs-CRP和Hcy的相关性。结果:血浆Hcy与hs-CRP在3组间差异有统计学意义(P0.05),且VD组、非VD组均显著高于对照组,VD组显著高于非VD组,差异均有统计学意义(P0.05)。随着痴呆程度的加重,MMSE评分逐渐降低,血浆hs-CRP与Hcy水平则逐渐升高,差异有统计学意义(P0.05)。经相关性分析发现,MMSE评分和血浆hs-CRP与Hcy水平均呈负相关(r=-0.672,-0.703,P0.05)。结论:血浆hs-CRP与Hcy水平与VD患者的认知功能负相关,临床加强对两指标的检测对VD的诊断及防治有着重要的临床意义。 相似文献
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淮河野生鲇鱼线粒体Cyt b基因的序列变异与遗传结构分析 总被引:1,自引:0,他引:1
本研究利用线粒体DNA细胞色素b(Cyt b)基因序列分析淮河信阳段、淮滨段、蚌埠段、洪泽湖及其支流颍河、淠河和池河的野生鲇鱼(Silurus asotus)种群遗传结构及种群历史.结果表明,在841 bp的同源序列中,7个种群共检测到变异位点40个,占全部序列的4.76%,121个个体共检测到32种单倍型;7个种群的平均单倍型多样性(h)、核甘酸多样性(Pi)分别为0.884 8、0.003 8,表明淮河野生鲇鱼种群的遗传多样性水平较高.7个种群间的遗传分化指数Fst为0.115 0,仅12.92%的变异来自种群间(AMOVA分析),基因交流值为3.85,种群间K2-P遗传距离为0.002 ~0.009,显示鲇鱼种群间没有发生明显的地理分化.NJ树揭示7个种群的个体组成2个谱系,但这2个谱系与地理分布并不相关.中性检验、错配分析和Network网络亲缘关系分析皆表明鲇鱼种群有过种群扩张,扩张时间约在0.17~0.29百万年前的中更新世中期和末期. 相似文献
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土壤水分对返青期断根冬小麦补偿效应的影响 总被引:2,自引:1,他引:1
通过盆栽试验研究了不同土壤水分条件下返青期断根冬小麦的补偿效应.结果表明,断根小麦的早期生长受到抑制,叶面积在返青 拔节期间显著下降,到开花期能恢复至对照水平.高水分条件下断根小麦拔节期的叶绿素荧光参数包括表观光合电子传递速率、实际光化量子产量、光化学淬灭系数、非光化学淬灭值均显著大于对照,开花后单茎干物质积累为0.81 g,显著大于对照(0.56 g),花后干物质积累系数比对照提高了38.79%,断根小麦根量虽有所下降但差异不显著;低水分条件下断根小麦的叶绿素荧光参数和花后干物质积累与对照之间没有显著差异,但断根小麦的根系生物量(7.83 g·pot-1)显著小于对照(9.77 g·pot-1).土壤水分对断根小麦的地上生物量和籽粒产量的补偿效应没有显著影响.断根处理的冬小麦在两种土壤水分条件下均显著降低了耗水量,在整个生育期,高水分条件下冬小麦断根处理可节水2 000 ml左右,水分利用效率为1.97 g·kg -1,显著大于对照的1.70 g·kg -1;低水分条件下也可节水1 500 ml左右,水分利用效率虽有所提高,但未达到显著性差异. 相似文献
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对蝽科Pentatomidae4属5种——广二星蝽Stollia ventralis(Westwood)、黒腹二星蝽Stollia guttiger(Thunberg)、西北麦蝽Aelia sibirica(Reuter)、紫翅果蝽Carpocoris purpureipennis(De Geer)、赤条蝽Graphosoma rubrolineata(Westwood)昆虫减数分裂各期染色体形态结构及行为进行分析。结果表明:蝽科5种进行交叉减数分裂。花束期5种昆虫染色质变化相似,形态种间有差异。中期染色体排列方式相似,核型种间差异大。精子形态相似,弯曲度大小种间有差异。双线期、终变期染色体交叉形态、频率及历程长短反映物种进化程度。紫翅果蝽X染色体碎斑化。 相似文献
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以浙江天目山不同海拔(480、580、700和800 m)的毛竹伐除区森林植被为对象,基于群落生态学方法研究2017—2020年各海拔群落的结构变化。结果表明: 2017年所有样地木本植物有515株,隶属于27科43属50种。3 年间增加14科23属30种,个体数量增加116.9%,新增物种主要有毛竹、紫珠、山胡椒、山鸡椒、构树等,主要分布在海拔580和700 m处。2017和2020年海拔580、700和800 m的群落中重要值最大的树种不变,分别为杉木、臭椿和枫香树,而海拔480 m群落重要值最大的树种由杉木变为油茶。各海拔群落径阶分布变化明显。海拔480 m群落径阶分布由倒“J”型发展为单峰左偏态,海拔700 m群落径阶结构由倒“J”型发展为指数型,海拔800 m群落径级分布呈正态分布,峰值由24 cm移到30 cm。3年间各植物群落的Simpson优势度指数和Shannon多样性指数提高,均随海拔升高而显著下降。群落β多样性随海拔升高、海拔间距的增加而增大。2020年新增物种为群落天然更新提供了充足的幼苗幼树,但仍未演替到亚热带顶极群落。 相似文献
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目的:探讨丁苯酚对卒中大鼠脂联素、MCP-1和sl CAM-1表达的影响。方法:建立大鼠永久性大脑中动脉梗塞(Permanent middle cerebral occlusion, pMCAO)局灶性脑缺血模型,将SD大鼠分为Sham组、pMCAO模型组和NBP治疗组;甲酚紫染色法测定大鼠脑部梗塞面积;改良神经功能损害评分(Modified neurological severity score, m NSS)用于评定各组大鼠的神经功能变化情况;Elisa法检测大鼠脑部和血清中脂联素水平以及脑部MCP-1和sl CAM-1水平。结果:药物处理后pMCAO组大鼠存活率明显低于Sham组;NBP处理能够有效逆转pMCAO诱导的大鼠m NSS得分的升高;与Sham组相比,pMCAO组大鼠脑部梗塞面积显著增加,NBP处理明显减少了损伤大鼠的梗塞范围;与Sham组相比,p MCAO组大鼠脑部和血清中脂联素表达明显降低,而大脑MCP-1及sl CAM-1水平显著升高,NBP处理上调了大脑和血清脂联素的水平并抑制脑部MCP-1和sl CAM-1的表达。结论:丁苯酞通过上调脂联素表达,抑制MCP-1及sl CAM-1的水平对缺血性脑卒中大鼠起到神经保护作用。 相似文献