HBx、ras基因的克隆及精原细胞转染法制备转基因小鼠的初步研究

目的:探索以精原细胞转染法制备乙肝病毒HBx基因及突变ras基因的转基因小鼠的可行性.方法:首先构建携带HBx基因和突变ras基因的真核表达载体pcDNA3.1-HBx及pEGFP-N1-Kras.将上述两种重组载体混合后,用脂质体包被,用注入4只雄性小鼠之睾丸组织中.注射后4周,使上述处理过的雄性小鼠与雌性小鼠合笼交配.小鼠出生后2～4周,剪其尾尖,并以多聚酶链式反应(PCR)对基因整合进行鉴定.结果:共产仔小鼠35只,3只仔小鼠PCR阳性(阳性率8.6%).其中,两只HBx基因阳性,1只HBx、ras基因均为阳性.结论:以精原细胞作为栽体,建立带HBx及ms基因的小鼠模型是可行的,为建立树鼩转基因动物模型的研究打下基础.     

浅析PACS中的DICOM标准

随着医学影像设备的广泛应用以及PACS的快速发展,为了统一各种数字化影像设备的图像数据格式和数据传输标准而诞生的DICOM标准已经成为医学数字成像和通讯的共同标准。本文简要的介绍了DICOM标准的历史以及DICOM数据集和DICOM文件格式的组织形式。     

结核分枝杆菌三种耐药基因的检测方法

建立3种结核分枝杆菌耐药基因的检测方法,探讨耐药基因突变与耐药性的关系。将58株临床分离株均做聚合酶链反应-单链构象多态性分析(PCR—SSCP)和传统药物敏感试验。结果表明,结核分枝杆菌耐药基因突变与耐药水平有密切联系,绝大多数结核分枝杆菌耐药基因突变发生在高耐药株,少部分在低耐药株发生基因突变。     

中国新近系山旺阶建阶研究新进展

中国新近系的年代地层单位山旺阶与哺乳动物分期的山旺期相对应 ,其定义的生物带相当于欧洲的MN3～MN5 ,下界年龄应为 2 0 .5Ma。按照现代地层学的建阶原则对山东临朐的山旺剖面进行综合研究 ,得出山旺组的底界年龄约为 1 8Ma ,山旺动物群的地质时代也由原来认为的与欧洲MN5相当提早到与MN4相当。尽管如此 ,研究结果证实山旺组仍然缺失定义的山旺阶下部沉积和MN3动物群。《国际地层指南》提倡将重点放在选择下界的界线层型来确定年代地层单位 ,其上界应该由后续单位的下界来确定。甘肃兰州盆地和秦安地区有发育的渐新世至中新世沉积出露 ,并有山旺阶最底部的化石和适合于作古地磁分析的沉积物 ,因此 ,是有可能建立山旺阶下界界线层型的有利地点。     

基于均匀设计与支持向量回归的棉铃虫幼虫全纯人工饲料配方优化

昆虫全纯人工饲料配方是精细研究昆虫营养生理的前提。本研究以棉铃虫Helicoverpa armigera幼虫为供试对象, 以本研究室前期发展的多因素多水平配方优化实验设计与分析方法UD-SVR为指导, 以略加修改的苹浅褐卷蛾Epiphyas postvittana幼虫全纯人工饲料为初始配方, 先优化20种天然氨基酸, 再优化蔗糖等其他8种非氨基酸营养组分, 经4轮97个处理组合, 获得一个棉铃虫幼虫全纯人工饲料满意配方, 平均蛹重、 化蛹率分别由初始配方的0.160 g和10.4％高效增至满意配方的0.255 g和97.9％。该全纯人工饲料满意配方的获得, 不但再次证实了UD-SVR方法的有效性, 同时为进一步深入研究棉铃虫营养需求与营养代谢奠定了基础。     

过表达外源FUT8增加乳腺癌细胞的迁移和侵袭能力

核心岩藻糖的修饰被认为是对糖蛋白进行转录后加工和功能调控的一种重要方式, 与肿瘤的发生发展密切相关, 但其在乳腺癌恶性转化过程中所发挥的生物学功能尚不明确. 本文构建了α1,6-岩藻糖基移转酶（FUT8）基因真核表达载体,将其转染人乳腺癌细胞Bcap-37, 实时PCR及Western印迹检测FUT8 mRNA和蛋白质表达, 通过细胞划痕实验和Transwell小室观察FUT8过表达对细胞体外迁移、侵袭能力的影响, 免疫共沉淀和Western印迹检测肿瘤细胞整合素、基质金属蛋白酶（matrix metalloproteinases, MMPs）家族相关蛋白质表达水平变化. 结果显示,外源FUT8基因在mRNA水平和蛋白质水平的表达均显著增加, FUT8过表达组细胞迁移和侵袭能力明显增强;上调FUT8基因表达可使Bcap-37细胞中核心岩藻糖基化的整合素-α3β1、MMP-2和MMP-9在蛋白质水平呈不同程度升高. 上述研究表明,FUT8可通过核心岩藻糖化修饰正性调控整合素-α3β1的功能, 诱导MMP-2、MMP-9的表达, 促进乳腺癌细胞的迁移和侵袭.     

发菜G6PDH基因(GND)克隆及其干旱胁迫下的差异表达分析

由GND编码的葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PDH)是戊糖磷酸途径的关键酶。为了解发菜GND分子信息以及对干旱胁迫的响应机制,该研究设计了特异性引物克隆发菜GND全长,进行序列分析、原核表达和MALDITOF-TOF/MS鉴定,并对干旱胁迫下发菜GND的差异表达水平和G6PDH活性进行分析。结果表明:(1)发菜GND全长1 431bp(GenBank登录号为KX553955),与点形念珠藻(73102)的GND核苷酸序列相似性为96%,G6PDH氨基酸相似性为98%;氨基酸序列中第26和27位的Ile疏水性最强,在第302位的Arg亲水性最强,Thr有19个磷酸化位点,Ser有18个磷酸化位点,Tys有5个磷酸化位点,二级结构和三级结构主要由α螺旋、β折叠、β转角和随机卷曲构成。(2)将GND基因进行原核表达,获得47.23kD的外源表达蛋白G6PDH。(3)随干旱胁迫程度加剧,GND在转录水平的表达量和G6PDH活性均逐渐增加。研究结果为进一步探讨干旱胁迫条件下发菜GND表达调控奠定了基础。     

基于风险交流视角的水产品质量安全风险分级研究

风险分级是风险管理的重要组成部分。本文在传统二维风险矩阵的基础上,将消费者敏感性维度引入风险矩阵,并以水产品为例,构建了包括严重性、可能性、敏感性的水产品质量安全风险分级模型,并依据不同风险程度提出了优化风险交流策略的建议。     

丁草胺在不同类型水中的光化学降解

研究了除草剂丁草胺在氙灯、高压汞灯光照下的光解动态。结果表明,丁草胺在氙灯光照作用下,其光解速率为纯水>河水>塘水>稻田水;丁草胺在氙灯光源下的光解速度比高压汞灯下低;其光解率与浓度(剂量)呈反相关;充N₂脱O₂使丁草胺的光解速度减缓。