核酸杂交技术在环境微生物检测中的应用

核酸杂交技术在环境微生物检测中的应用胡稳奇,张志光（湖南师范大学生物系,长沙４１０００６）核酸分子杂交技术是７０年代发展起来的一种崭新的分子生物学技术,即根据ＤＮＡ分子碱基互补配对的原理,以一特异性的ｃＤＮＡ探针与待测样品的ＤＮＡ或ＲＮＡ形成杂交分子...     

新卵状鹅膏中毒事件调查及毒素含量分析初报

新卵状鹅膏（Amanita neoovodiea)主要分布于东亚地区。1999－2000年,在湖南省共发生因食用该菌引起的中毒病例五起共15例,死亡2人（均为女性）,死亡率达13.33%。中毒者首先表现为明显的胃物炎症状,20－24h后主要表现为严重的肾受损,导致多日无尿,经医院抢救后大多病愈出院。经过调查和鉴定,证实该蕈为直接致病菌。采用反相高效液相色谱（RP－HPLC）分析,证实该菌粗提液（水提法）中含有28μg/g干子实体的α－鹅膏毒肽（α－amanitin)。     

一种简便、快速测定鹅膏多肽毒素的方法--抑芽法

低浓度（5-10ngml-1）的鹅膏毒肽(amatoxins)能专一性抑制RNA聚合酶Ⅱ的活性,高浓度（为RNA聚合酶Ⅱ103-104倍的浓度）也能抑制RNA聚合酶Ⅲ的活性,因而影响细胞mRNA的转录和蛋白质的合成,抑制种子的萌发和生长。根据此原理我们建立了一种以植物种子萌发试验检测鹅膏毒肽的方法,称之为"抑芽法"（bud-inhibitedassay）。该方法简便、实用、准确。操作流程45℃干燥至恒重的鹅膏菌等子实体菌盖;水提法提取毒素并用氯仿沉淀蛋白质等;粗毒液浓度为0.025-0.05gml-1干子实体;萝卜或绿豆种子培养温度为28℃,培养时间为24-72h。绿豆芽下胚轴生长被抑制率在95%以上,可能为鹅膏毒肽含量高的剧毒鹅膏菌;当被抑制率在60-80%,可能为鹅膏肽含量较低的微毒鹅膏菌;当被抑制率在30%以下时,可能是不含鹅膏菌肽的鹅膏菌。     

鹅膏菌属真菌RAPD分析及亲缘关系的研究

本文对采自湖南莽山的２６种鹅膏菌属（Ａｍａｎｉｔａ）真菌进行了随机扩增多态性ＤＮＡ（ＲＡＰＤ）分析,４０个随机引物中筛选出扩增效果较好的６个引物,每个引物能产生１～１０条ＤＮＡ条带,获得的ＲＡＰＤ谱带清晰并呈现多态性ＯＰＧ１５、ＯＰＨ０４两个引物扩增的ＲＡＰＤ谱带能将２６种鹅膏菌完全区分开来,通过６个引物的ＲＡＰＤ分析获得的平均相似性系数表明种与种之间的相关系数在２０－６０％之间,平均链锁聚类分析     

块鳞灰鹅膏菌和角鳞灰鹅膏菌毒性及多肽毒素测定*

1995~2000年,湖南省共发生了147例因误食有毒的鹅膏菌而导致的中毒事件。在出事地点,我们除采到了几种剧毒的鹅膏菌外,尚采到块鳞灰鹅膏 Amanita spissa(Fr.) Quel.和角鳞灰鹅膏（A. spissacea Imai）。关于块鳞灰鹅膏的毒性问题,文献资料报道的很不一致,从可食、有毒到极毒,但未进行毒性及毒素含量测定。角鳞灰鹅膏的有关资料报道是有毒的,除湖南省外,广西、四川等省也发现因食用该菌而导致中毒事件。用小白鼠作毒性测试,死亡率为60%左右（每公斤体重用33g干子实体提取液）(毒蘑菇,1988)。至于该菌的毒素只报道了含鹅膏菌酸。…     

古尼虫草组织学研究

用光学显微镜,扫描电子显微镜对不同成熟度的古尼虫草进行了组织学观察,结果表明,古尼虫草子囊顶部有增厚的幅状结构,包囊子囊壳的菌丝致密而纤细,子座菌髓管状菌丝粗壮而疏松,形成很多的中空结构,古尼拟青霉分生孢子梗顶端膨大,形成分生孢子,分生孢子属外生芽殖型。     

亚稀褶黑菇提取液诱导小白鼠肝肾细胞凋亡

采用琼脂糖凝胶电泳技术研究亚稀褶黑菇提取液诱导小打手势习肝肾细胞凋亡。结果显示,小白鼠亚稀褶黑菇抽提液中毒后,肝肾细胞DNA经琼脂糖凝胶电泳出现180－200bp整数倍的DNA梯形带,19.0-28.5g/L范围内,亚稀褶黑菇提取液诱导肝肾细胞凋亡表现出和剂量依赖性,结果表明,亚稀褶黑菇提取液能诱导小白鼠肝肾细胞凋亡。亚稀褶黑菇提取液诱导肝肾细胞凋亡是亚稀褶黑菇中毒后机体病变死亡的重要表现形式之一。     

亚稀褶黑菇中毒的临床表现和中毒机理探讨

本文通过对湖南省茶陵县亚稀褶黑菇中毒事件的调查,获得了尽的临床资料,并通过分析中毒病人的临床表现,首次探讨了亚稀褶黑菇的中毒机理, 结果表明,亚稀褶黑姑毒素作为一种外界信号分子与细胞膜受体结合,引起细胞内Ｃa^2 浓度上升,通过一系列生理生化反应过程,导致细胞死亡。     

洞庭湖湿地鸟类的初步研究

１９９１年１月至１９９２年１月的春、夏，冬三季对洞庭湖鸟类的分布及种群数量进行了调查研究，观察记录到洞庭湖湿地鸟类１３８种，隶属１５目３６科，其中冬候鸟６６种，夏候鸟２２种，留鸟４３种、旅鸟７种。     

一种简便、快速测定鹅膏多肽毒素的方法—抑芽法

低浓度（5-10ngml^-1)的鹅膏毒肽（amatoxins)能专一性抑制RNA聚合酶Ⅱ的活性,高浓度（为RNA聚合酶Ⅱ10^3-10^4倍的浓度）也能抑制RNA聚合酶Ⅲ的活性,因而影响细胞mRNA的转录和蛋白质的合成,抑制种子的萌发和生长,根据此原理我们建立了一种以植物种子萌发试验检测鹅膏毒肽的方法,称之为“抑芽法”（bud-inhibited assay)。该方法简便、实用、准确,操作流程：45℃干燥至恒重的鹅膏菌等子实体菌盖;水提法提取毒素并用氯仿沉淀蛋白质等;粗毒液浓度为0.025-0.05gml^-1干子实体;萝卜或绿豆种子培养温度为28℃,培养时间为24-72h,绿豆芽下胚轴生长被抑制率在95%以上,可能为鹅膏毒肽含量高的剧毒鹅膏菌：当被抑制率在60-80%,可能为鹅膏肽含量较低的微毒鹅膏菌;当被抑制率在30%以下时,可能是不含鹅膏菌肽的鹅膏菌。