西瓜花叶病毒中国分离株全基因组核苷酸序列测定

西瓜花叶病毒(Watermelon mosaic virus,WMV)是马铃薯Y病毒属(Potyvirus)成员,主要危害西瓜和甜瓜,引起花叶病。在田间,该病害主要由蚜虫以非持久性方式传播。西瓜和甜瓜花叶病在国内陕西、山东、云南、辽宁、山西、新疆、河南和黑龙江等地广泛发生[1-6]。从20世纪80年代中期开始发生,逐渐上升为普遍发生的主要病害。我国大部分地区因西瓜和甜瓜病毒病造成的损失为30%~50%,甚至会绝产,西瓜花叶病毒已经成为制约西瓜和甜瓜高产稳产最主要的因素之一[7]。到目前为止,多数工作集中在对西瓜和甜瓜病毒病的鉴定,在分子生物学上仅限于对CP基因…     

黄腹山鹪莺成鸟的秋季换羽

黄腹山鹪莺(Prinia flaviventris)具有冬羽尾羽长于繁殖羽尾羽的特点,可能意味着一种新的生存和繁殖策略。为此,从2006年9月～2007年2月,在广东省肇庆市江溪村对黄腹山鹪莺的秋季换羽进行研究。结果显示:(1)黄腹山鹪莺成鸟繁殖羽体长和尾羽长皆极显著短于冬羽(P<0.01),繁殖羽翼长显著短于冬羽(P<0.05),其余身体量度的差异均不显著(P>0.05)。(2)9月17日获得第一个黄腹山鹪莺换羽个体,初级飞羽已更换到P5,次级飞羽已更换到S6,11月20日后所获样本均已完成羽毛的更换。(3)初级飞羽的换羽模式为递降换羽,次级飞羽为递升换羽,尾羽为离心型换羽。(4)换羽期间,10月的个体平均体重最大,显著(P<0.01)重于11月的体重,其他各月无显著性差异(P>0.05)。据此,推测黄腹山鹪莺秋季种群换羽的持续时间约100d;相对其他羽毛而言,尾羽更换对黄腹山鹪莺生长发育的影响更为明显。     

西瓜花叶病毒HC-Pro基因在毕赤酵母中的分泌表达与功能研究

利用RT-PCR方法扩增出西瓜花叶病毒HC-Pro的基因,长度为1371bp,并构建了真核表达质粒pPIC9K-WHC。将重组质粒经SalⅠ单酶切后电转化Pichia pastoris GS115菌株,经PCR鉴定与G418、MD和MM培养基筛选,获得Mut /His 表型高拷贝转化子。经1%甲醇诱导5d后,SDS-PAGE检测发酵液上清,在66kD处有一特异蛋白条带表达。Western blot鉴定表明,表达蛋白可以和HC-Pro蛋白抗血清发生结合反应。Far-Western blot证明该蛋白能与西瓜花叶病毒CP蛋白结合,支持了HC-Pro蛋白协助传毒的"桥梁"学说。     

浙江大山峰种子植物区系的统计分析

据调查统计浙江大山峰野生种子植物140科524属1032种(含种下分类群)。科、属、种的分布区类型分析表明,科以泛热带分布最多(43.6%),其次是世界分布(20%)和北温带(18.6%),温带分布少于热带分布(35∶77);属以泛热带分布最多(22.9%),其次是北温带分布(17.4%)和东亚分布(17.0%),温带分布多于热带分布(237∶230);种以中国特有分布最多(44.4%),其次是东亚分布(21.0%)和热带亚洲分布(17.4%),温带分布明显多于热带分布(317∶252),显示大山峰植物区系处于温带和热带分布的过渡区,具亚热带性质和地理成分复杂的特征,且与日本植物区系有密切关系。通过与邻近诸山属种相似性系数比较,说明它们关系密切,属同一自然区系。     

木聚糖酶产生菌的选育及发酵条件研究

采用富集培养、透明圈平板筛选,从长期在其上堆放秸秆的土壤中分离到-株木聚糖酶产生菌黑曲霉C2。对该菌株进行紫外线诱变处理,然后采用自然选育的方法筛选到-株木聚糖酶高产菌株C2—56,并对该菌株的适宜发酵条件和酶学特性进行了初步研究。结果表明,C2—56三角瓶发酵酶活达656．8U／g,比出发菌株C2提高了140％;发酵条件以80％麸皮和20％玉米芯为培养基,采用3％接种量,在曲盘上发酵72h为宜,酶活达1750U／g;该菌株产生的木聚糖酶具有较差的热稳定性和较好的pH稳定性,适宜反应温度和pH分别为50℃和pH4．2。     

西瓜花叶病毒HC-Pro基因在毕赤酵母中的分泌表达与功能研究

利用RT-PCR方法扩增出西瓜花叶病毒HC-Pro的基因,长度为1371bp,并构建了真核表达质粒pPIC9K-WHC。将重组质粒经SalⅠ单酶切后电转化Pichia pastoris GS115菌株,经PCR鉴定与G418、MD和MM培养基筛选,获得Mut⁺/His⁺表型高拷贝转化子。经1%甲醇诱导5d后,SDS-PAGE检测发酵液上清,在66kD处有一特异蛋白条带表达。Western blot 鉴定表明,表达蛋白可以和HC-Pro蛋白抗血清发生结合反应。Far-Western blot 证明该蛋白能与西瓜花叶病毒CP蛋白结合,支持了HC-Pro蛋白协助传毒的“桥梁”学说。     

山羊体外受精胚性别鉴定不同取样方法的研究

为了不断完善山羊早期胚胎性别鉴定技术,实现奶山羊雌性胚胎的体外生产与商业化,本研究对胚胎性别鉴定的两种采样方法进行比较。结果表明,两种取样方法性别鉴定结果的准确性没有差异,桑椹胚经打孔法采样后胚胎妊娠率(36．84％)明显高于切割法(31．25％),囊胚经切割法采样后胚胎妊娠率(31．58％)明显高于打孔法(23．53％),综合比较,胚胎性别鉴定应以打孔法采集早期桑椹胚为宜。     

转化生长因子β1免疫反应阳性物在扩展莫尼茨绦虫体内的分布

用免疫组化SABC法研究了转化生长因子 β1免疫反应阳性物在扩展莫尼茨绦虫成熟体节内的分布。结果表明 :转化生长因子免疫反应阳性物广泛分布于扩展莫尼茨绦虫成熟体节内。扩展莫尼茨绦虫成熟体节的组织结构包括被膜与实质两部分 ;实质被肌层分为外部的皮质与内部的髓质 ,在皮质内有节间腺、肌细胞、神经细胞、排泄 (焰 )细胞等 ;髓质内主要是卵 ,包于卵外的生殖管道 ,以及管道间的连结组织。免疫组化染色显示节间腺、被膜、卵及子宫壁呈强阳性着色 ,光密度测定结果分别为 0 2 70 5± 0 0 80 4 ,0 2 4 5 5± 0 0 4 17,0 4 6 38± 0 0 6 0 3,0 0 373± 0 0 6 13。皮质区与髓质区均有弥散阳性反应产物。表明转化生长因子在扩展莫尼茨绦虫体内广泛分布 ,介导虫体生长及实现其适应寄生生活     

浙江箬寮岘自然保护区蕨类植物区系研究

箬寮岘自然保护区有蕨类植物38科69属153种(包括亚种和变种),其中优势科是鳞毛蕨科、水龙骨科、金星蕨科、蹄盖蕨科、铁角蕨科、卷柏科,优势属是鳞毛蕨属、铁角蕨属、卷柏属、复叶耳蕨属、凤尾蕨属和短肠蕨属。属的分布类型以泛热带分布最多;种类以东亚分布类型和特有成分为主,表现为亚热带向暖温带过渡特点。在区系关系上,该区系与九龙山、古田山、天目山、庐山、武夷山区系关系密切,而与苍山、西山、太行山、帽儿山区系关系较为疏远。区系属于东亚植物区系。