重离子诱变微生物育种的研究进展

近年来,重离子束作为一种新的辐射诱变源在微生物育种领域已多有应用.与传统的辐照源相比,重离子束具有更高的传能线密度,可以产生更强的辐射损伤生物效应,因此诱变效率高.本文综述了近年来重离子诱变在微生物育种中取得的进展、诱变后突变体菌株的筛选策略、重离子束引起微生物遗传物质改变的直接和间接机制以及突变后的修复机理,并对其在...     

转化生长因子β1质粒对新鲜同种异体骨移植的免疫影响

目的：研究局部含注射转化生长因子β1（TGF-β1）基因的质粒时大鼠同种异体骨移植的免疫排斥反应的影响。方法：将64只Wister大鼠完全随机分成4组,每组16只,切取SD大鼠的胫骨移植到Wister大鼠人工建模后形成的胫骨缺损区。TGF-β1组于移植骨局部一次性注射含有TGF-β1基因的质粒（40μg／只）;空质粒组于移植局部注射空质粒;免疫抑制剂组术前3天开始腹腔内注射环孢素A（10mg／kg）直至处死;异体移植组仅行异体骨移植,不予特殊处理。术后3、6、12周行光镜和电镜检查。结果：异体移植组和空质粒组骨基质排列紊乱,骨细胞消失,基质区内见块状低电子密度区。TGF-β1组和免疫抑制剂组可见骨细胞和完整的成骨细胞,骨小管状态良好。混合淋巴细胞培养（MLC）结果显示TGF-β1组（0-331±0．017）与免疫抑制剂组（0．501±0．004）差异无统计学意义（P〉0．05）,TGF-β1组与空质粒组（1．104±0．023）和异体移植组（1．206±0．019）差异有统计学意义（P〈0．05）。结论：新鲜骨移植过程中局部注射TGF-β1质粒可发挥免疫抑制作用,降低宿主的免疫排斥反应：     

丙戊酸钠联合雌二醇对去卵巢APP/PS1双转基因小鼠精神行为及神经元的影响

该文旨在研究丙戊酸钠(valproic acid, VPA)和雌二醇(17β-Estradiol, E2)联合用药对去卵巢APP/PS1双转基因小鼠精神行为和脑内神经元的影响及可能机制。将3.5月龄雌性APP/PS1双转基因小鼠进行双侧卵巢切除(ovariectomy, OVX), 1个月后随机将小鼠分为4组,然后单独或联合应用VPA和E2处理1个月(生理盐水组为对照)。高架十字迷宫实验结果显示,与对照组相比, VPA和E2单独用药组小鼠进入开放臂的次数和在开臂停滞时间均有上升,但无统计学意义(P0.05),而VPA+E2联合用药组小鼠较对照组有显著上升(P0.05)。旷场实验结果显示,与对照组相比,各药物处理组小鼠在旷场中央区活动的路程和时间显著上调(P0.05),这可显著改善小鼠的焦虑情绪和自主性活动变化。与对照组相比, E2组和VPA+E2组NeuN的表达量升高具有统计学意义(P0.05),VPA组无明显改变(P0.05);高尔基染色结果显示, VPA+E2组树突棘密度升高较对照组和E2组均具有统计学意义(P0.05),是VPA组的1.39倍,但无显著统计学差异(P0.05)。Western blot结果显示, E2组和VPA+E2组与对照组相比ERα的表达量升高具有统计学差异(P0.05),其中VPA+E2组升高更为显著, VPA组与对照组相比没有明显差异(P0.05); VPA+E2组小鼠脑内Wnt3a表达量与对照组、VPA组和E2组相比其升高均具有统计学意义(P0.05); E2组和VPA+E2组β-Catenin含量相较对照组升高具有显著统计学意义(P0.05)。上述结果说明,丙戊酸钠联合雌二醇治疗可缓解小鼠的焦虑情绪并延缓小鼠脑内神经元的变性,这种改善作用可能与ERα-Wnt/β-Catenin信号通路激活相关。     

浙江产蝮蛇(Agkistrodon halys Pallas)蛇毒抗凝血活酶组份抗凝机理的研究

应用三次离子交换柱层析和一次凝胶过滤从浙江产蝮蛇毒中分离纯化了抗凝血活酶组份。测定出该组份由119个氨基酸残基组成,分子量为15,000道尔顿,等电点为9.4,N—末端为组氨酸。 纯化的抗凝血活酶组份在体外对血浆重钙化时间有显著影响,但不延长血浆凝血酶原时间和凝血酶时间,对纤维蛋白也无溶解作用,极低浓度（0.5微克/毫升）的抗凝组份就能抑制血液凝血活酶的生成。家兔静脉注射抗凝血活酶组份后十分钟,全血凝固时间和血浆重钙化时间均明显延长,但血浆凝血酶原时间、纤维蛋白含量和全血凝块溶解时间却不受影响。 蝮蛇毒抗凝血活酶组份具有磷脂酶A_2活性,但血浆中磷脂的水解似乎并不是血浆凝固延迟的主要原因,很可能是抗凝血活酶组份能够同血浆中凝血活酶组份（磷脂部份）可逆地结合,从而干扰了凝血酶原的活化。     

江西野生寒兰居群遗传结构与遗传多样性研究

该研究采用叶绿体基因组片段(petB-petD)和核基因组ITS序列,对分布于江西的寒兰17个自然居群的252个体进行遗传结构与遗传多样性分析,以明确江西野生寒兰遗传多样性水平与居群遗传结构特征,为探寻江西寒兰资源数量锐减以及保护提供理论依据。结果表明:(1)nrDNA ITS序列长度652～658 bp,总变异位点140处,变异位点百分率为21.3%～21.5%,(G+C)含量为58.9%～67.1%。cpDNA序列长度522～529 bp,有变异位点9处,变异位点百分率为1.70%～1.72%,(G+C)含量为32.9%～33.7%。(2)分子方差分析(AMOVA)表明,种群内的遗传变异大于种群间变异,cpDNA片段居群间的遗传变异为40.76%,居群内为59.24%;ITS居群间的遗传变异为28.96%,居群内为71.04%;基因流(N_m)较大,cpDNA片段N_m为1.226 5; ITS N_m为0.726 7。(3)ITS和cpDNA数据失配分析和中性检验均表明江西寒兰野生居群在历史近期经历了扩张事件,nrDNA ITS序列较叶绿体序列进化较快,变异速率也较快。     

微生物产色素机制及其生物活性

近年来,随着人工合成色素的大量使用引起一系列环境和健康问题,增加了人们对安全、无毒天然色素的需求.天然色素主要来源于植物和微生物,由于植物生长周期较长使植物源色素在大规模应用中受限.与植物源天然色素相比,微生物源色素易于大规模快速培养,具有更广阔的应用前景.本文系统总结了不同微生物源色素产生机制,及其在抗菌、抗氧化及抗...     

PBL教学法联合病案式在心血管内科教学查房中的临床应用

目的:探讨问题为中心的(PBL)教学法联合病案式在心血管内科教学查房中的临床应用。方法:选取我院2010级临床医学专业本科学生48人,依据随机数字表法分为对照组和观察组,选择具有丰富教学经验且从事教学工作10年以上的教师进行心血管内科的授课,选择具有代表性的临床病例进行讲解,对照组采用传统知识传授型(LBL)教学法,观察组采用PBL教学法,授课3周后,评价两组学生的考试成绩、临床操作技能和课程满意度。结果:考试成绩结果显示观察组基础知识得分与对照组差异无统计学意义(P0.05),而病例分析和临床操作结果显示观察组得分显著高于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。观察组对课程的满意度为83.33%,对照组为54.17%,观察组显著高于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。结论:PBL教学法联合病案式在心血管内科教学查房中较LBL具有显著的优势,值得在临床实习教学工作中推广应用。     

血浆游离DNA全基因组甲基化测序的实用稳定性评估

随着液体活检技术的发展,血浆游离DNA成为当前的研究热点之一。血浆游离DNA的全基因组甲基化测序被认为在癌症检测等医学应用拥有巨大潜力,但目前尚缺乏针对该实验流程的实用稳定性评估。文中利用两名志愿者在不同时间采样的血浆游离DNA,在不同实验平台分别进行DNA甲基化的重亚硫酸盐转化前建库(Pre-BS)、转化后建库(Post-BS)和常规DNA建库,获取多因素影响下的测序数据样本。在此基础上,建立了一套血浆游离DNA测序数据分析的质量控制参考流程,综合评估了血液采集提取、游离DNA建库测序过程的实用稳定性,为血浆游离DNA全基因组甲基化测序应用于临床液体活检提供实用性的基础参考。     

云南紫胶虫种群数量对地表蚂蚁多样性的影响

为了弄清云南紫胶虫种群数量对地表蚂蚁多样性的影响,于2009年12月至2010年5月,采用陷阱法调查了云南省墨江县雅邑乡不同紫胶虫种群数量样地(样地Ⅰ有效枝条寄生率为60%、样地Ⅱ为30%、样地Ⅲ为10%、样地Ⅳ不放养紫胶虫)地表蚂蚁多样性。1)物种组成及相对多度:在样地Ⅰ中采集蚂蚁标本1136头,26种,常见种为棒刺大头蚁(Pheidole spathifera)、伊大头蚁(Pheidole yeensis)和贝卡盘腹蚁(Aphaenogaster beccarii),样地Ⅱ中共采集蚂蚁标本984头,24种,常见种为中华小家蚁(Monomorium chinensis)、棒刺大头蚁、伊大头蚁和皮氏大头蚁(Pheidole pieli),样地Ⅲ中采集蚂蚁标本607头,24种,常见种为粗纹举腹蚁(Crematogaster macaoensis)、中华小家蚁和棒刺大头蚁,样地Ⅳ中采集蚂蚁标本419头,12种,常见种为横纹齿猛蚁(Odontoponera transversa)、中华小家蚁和伊大头蚁;2)多样性:相对多度大小为Ⅰ>Ⅱ>Ⅲ>Ⅳ;蜜露仅提高地表蚂蚁个体数及出现频次,而对物种丰富度无显著影响;3)群落相似性:不同紫胶虫种群数量影响地表蚂蚁群落结构组成;4)指示物种:样地Ⅰ中指示物种为长足光结蚁(Anoplolepis gracilipes)和沃尔什铺道蚁(Tetramorium walshi),样地Ⅲ中指示物种为二色狡臭蚁(Technomyrmex bicolor),样地Ⅱ和Ⅳ中无指示物种。紫胶虫种群通过蜜露资源能维持较高的地表蚂蚁多度,并影响地表蚂蚁活动,改变地表蚂蚁群落结构。     

利用气相色谱-质谱联机测定土壤氨基酸手性异构体13C富集比例

氨基酸手性异构体的转化与更新程度在表征土壤有机质的循环转化机制方面具有重要意义.为有效区分土壤中原有的和利用外加碳源新合成的氨基酸,本文建立了稳定同位素培养 气相色谱/质谱联机测定土壤氨基酸手性异构体¹³C富集比例的方法.由于培养过程中加入的¹³C葡萄糖被迅速利用形成氨基酸碳骨架,因而利用质谱技术可检测同位素的富集强度的变化.外加葡萄糖直接合成氨基酸的比例可利用质谱碎片(F+n)的相对强度变化来评价（n为质谱碎片F中含有的碳原子数目）;而源于葡萄糖的¹³C同位素在氨基酸分子中的富集程度是所有同位素峰相对强度变化的总和.¹³C在目标化合物中的富集比例用原子百分超（APE）评价,D 氨基酸的APE还需进一步利用水解诱导的外消旋化系数校正.¹³C在目标化合物中的富集程度可反映各氨基酸手性异构体的碳循环速率大小,是研究土壤氨基酸动态变化的有力工具.