全文获取类型
收费全文 | 956篇 |
免费 | 59篇 |
国内免费 | 338篇 |
出版年
2024年 | 9篇 |
2023年 | 32篇 |
2022年 | 39篇 |
2021年 | 32篇 |
2020年 | 21篇 |
2019年 | 34篇 |
2018年 | 31篇 |
2017年 | 20篇 |
2016年 | 16篇 |
2015年 | 27篇 |
2014年 | 46篇 |
2013年 | 24篇 |
2012年 | 26篇 |
2011年 | 28篇 |
2010年 | 19篇 |
2009年 | 31篇 |
2008年 | 35篇 |
2007年 | 35篇 |
2006年 | 71篇 |
2005年 | 30篇 |
2004年 | 42篇 |
2003年 | 36篇 |
2002年 | 27篇 |
2001年 | 20篇 |
2000年 | 71篇 |
1999年 | 33篇 |
1998年 | 18篇 |
1997年 | 29篇 |
1996年 | 21篇 |
1995年 | 17篇 |
1994年 | 33篇 |
1993年 | 25篇 |
1992年 | 38篇 |
1991年 | 35篇 |
1990年 | 43篇 |
1989年 | 36篇 |
1988年 | 16篇 |
1987年 | 23篇 |
1986年 | 20篇 |
1985年 | 17篇 |
1984年 | 19篇 |
1983年 | 11篇 |
1982年 | 12篇 |
1981年 | 11篇 |
1980年 | 10篇 |
1979年 | 9篇 |
1975年 | 8篇 |
1974年 | 7篇 |
1964年 | 8篇 |
1957年 | 7篇 |
排序方式: 共有1353条查询结果,搜索用时 15 毫秒
121.
1956年以来,四川省各地质队在二郎山一带,采集了大量的中泥盆世早期的床板珊瑚,经笔者初步研究,计有8属,13种,其中新种5,新变种1,未定种2。在进行整理工作时,承俞建章教授和盛莘夫先生的鼓励,并详细审阅文稿,提出宝贵意见,笔者谨致以衷心的感谢。此外,地质部地质科学研究院磨片室磨制薄片,吴留生同志摄制图片,本所张志诚同志修改俄文摘要,笔者对以上各位以及惠赠标本的各位地质人员,在此一并致谢。 相似文献
122.
论奇异珊瑚属(Idiophyllum) 总被引:3,自引:0,他引:3
一、前言Idiophyllum Cao,1975属的构造比较复杂,是志留纪四射珊瑚中比较特殊的类型,对这类珊瑚的详细研究,有助于认识晚奥陶世至中志留世四射珊瑚演变发展的历史。Idiophyllum属的分类位置,自建属以来,争议较多,不同的作者对它的定义范围及其系统归属持不同的看法。在陕南、川北一带中志留统宁强组中。Idio- 相似文献
123.
构建并筛选表达HIV-1 gag蛋白的重组鸡痘病毒,并对其进行鉴定。首先设计引物通过PCR技术扩增HIV-1 gag基因,将其连接到pMD18-T载体上,测序正确后将其克隆入本实验室自行构建的鸡痘病毒穿梭载体pTKET中,获得重组质粒pTKET-HIV gag。然后将其与鸡痘病毒FPV282E4株共转染原代鸡胚成纤维细胞(CEF)进行同源重组,以增强型绿色荧光蛋白(EGFP)为筛选标记,通过噬斑筛选获得重组病毒,应用PCR,RT-PCR,Western blot方法对重组病毒进行鉴定和遗传稳定性分析。结果:通过10次噬斑筛选,PCR检测表明目的基因已整合到重组鸡痘病毒基因组中,RT-PCR,Western blot结果表明HIV-1 gag在感染细胞内成功表达且具有抗原性。连续传代20次,PCR,RT-PCR,Western blot均能检测到外源基因的整合、转录和表达,且未能扩增出FPV-TK基因,表明重组病毒遗传稳定性良好,而且病毒已经纯化。结论:成功获得表达HIV-1gag的重组鸡痘病毒,为进一步免疫试验研究奠定基础。 相似文献
124.
一种固定化酶的新载体——对氨基苯砜乙基(ABSE-)交联琼脂 总被引:1,自引:0,他引:1
1.8%琼脂经环氧氯丙烷交联后,在碱性条件下与对β-硫酸酯乙砜基苯胺(SESA)反应制得了对氨基苯磺酰乙基-(ABSE)-交联琼脂。醚化反应最适pH 是10。控制SESA 加入量制得含有107~1216微克分子苯胺基/克干重琼脂载体。2.ABSE-交联琼脂经重氮化后可在pH6.4~8.0偶联核酸酶P_1,每克琼脂可结合105~120毫克核酸酶P_1,固定化酶活力为4280单位/克干重固定化酶。活力回收可达18~35%。3.偶联时硫酸铵的存在可稍微提高固定化核酸酶P_1的活力,但其稳定性却比对照的差。4.载体上苯胺基含量过多会不利于所固定化的酶显示活力;用α-萘酚封闭残留的苯胺基,可以明显增加固定化酶的稳定性。 相似文献
125.
胡萝卜素产生菌三孢布拉霉(Blakeslea trispora)的老化现象及其特征。其老化菌株通过菌丝接触,将老化性状传递给正常菌株。并通过转变正常菌株的孢予,使老化性状传递给后代。菌丝的老化伴随着体内胡萝卜素的消失。 相似文献
126.
127.
利用重组Pichia pastoris生产腺苷甲硫氨酸 总被引:33,自引:0,他引:33
为改造甲醇利用型酵母Pichia pastoris来生产腺苷甲硫氨酸(SAM,S-adenosyl-L-methionine),我们将一个带有SAM合成酶基因的胞内表达质粒转化入Pichia pastoris菌株GS115,经过G418抗性筛选得到一株有两个基因拷贝的转化子。该菌在含有甲醇和甲硫氨酸的培养基中生长5d后,其细胞内的SAM的产量比原始菌株提高了30余倍。对该菌生产SAM的培养基中的碳源与氮源进行了优化,结果显示碳源的控制对该菌SAM产量的影响很大。在试管水平,该菌在含有0.75%的L-methionine并且碳源和有机氮源经过一定程度优化的培养基中,生长6d后SAM产量达到1.58g/L。 相似文献
128.
目的:探究尖波间期和无尖波恢复期颞叶癫痫大鼠模型的海马CA1网络theta节律随癫痫发展进程的变化规律。方法:14只成年雄性Wistar大鼠(200~250 g)麻醉后开颅,在海马的背侧埋入一个双极性钢电极(直径小于1 mm),在颅骨上埋入三个不锈钢皮质电极,在左和右额皮质内分别植入两个电极,在小脑埋入参考电极,粘合颅骨,检测、记录大鼠脑电图;之后腹腔注射癫痫诱发药物,匹罗卡品氢氯化物(pilocarpine hydrochloride,310 mg/kg),30 min后给予大鼠莨菪碱 (scopolamine, 1 mg/kg);借助14只大鼠在嗅行(exploration)时脑深部记录(SEEG),应用Gabor小波时频能量分析估算断裂段数(以350 ms为1段),与总段数的比值定义为断裂比,用来衡量theta节律断裂程度,分别计算了癫痫发展进程的早期(D7)和晚期(D25)中两个邻近尖波之间时间段(定义为尖波间期)和随后无尖波恢复期theta节律断裂比,与注射前脑电图比较。结果:① 与对照脑电图比较,癫痫诱发大鼠的D7和D25的theta节律断裂比显著升高(P<0.05),并且D7远高于晚期D25;② 在无尖波恢复期,theta节律断裂比与尖波间期相当 (P<0.05)。结论:癫痫尖波直接导致了theta节律断裂,断裂程度将随癫痫发展进程而动态变化,早期伤害尤其严重。 相似文献
129.
【目的】比较恒定链(invariant chain,Ii)CLIP的2个片段(PBS、GBS)影响免疫载体增强体液免疫的效果。【方法】首先,构建了基于小鼠Ii功能片段与新城疫病毒抗原肽F2的6个嵌合体(Cyt/TM/F2、Cyt/TM/F2/GBS、Cyt/TM/PBS/F2、Cyt/TM/F2/TRIM、Cyt/TM/F2/GBS/TRIM、Cyt/TM/PBS/F2/TRIM);其次,定向克隆至原核表达载体pET-32a中,并转化大肠杆菌Rosetta(DE3)诱导表达和纯化目的蛋白;最后,免疫小鼠,经间接ELISA法测定血清抗体效价,以及比较分析不同嵌合体免疫组免疫效果。【结果】一是所构建的含不同Ii功能片段/F2嵌合体的6个免疫组,均比单独F2的免疫组提高抗体水平1.5-4.9倍;二是在上述6个免疫组中,含CLIP的PBS或GBS的免疫组比不含CLIP的免疫组增强1.6-2.4倍;三是含PBS比含GBS的免疫组增强1.5倍。【结论】Ii胞浆区、跨膜区具有增强免疫效果的作用,而CLIP的PBS在Ii免疫载体中的作用优于GBS。 相似文献
130.
本文报告了应用端胚绒毛尿囊膜小块法测定A2型与B型病毒滴度和A2型的中和抗体的结果。对本法作了改进,并指出影响病毒和抗体滴度的一些因素。采用血凝抑制常规法、血凝抑制加温法和尿膜小块中和法测定了以往流成活疫苗试验人体的免疫前血清中和抗体,并与疫苗接种后的病毒分离率(代表生存性)和抗体升高率(代表免疫原性)联系起来进行分析,证明被接种者原来的免疫水平对活疫苗的生存性和免疫原性测定结果有很大的影响。在这3种抗体测定方法中,中和法最灵敏,血凝抑制加温法次之,常规法最濿。 相似文献