利用FLP/frt重组系统产生无选择标记的转基因烟草植株

在植物转基因植株产生过程中,对转化细胞进行抗性筛选是通用程序,转化细胞的抗性一般是抗生素抗性或除草剂抗性,将赋予转化细胞抗性的选择标记基因删除是提高转基因植物生物安全性的重要措施。来自于啤酒酵母的FLP/frt位点特异性重组系统可有效删除同向定点重组位点frt之间的基因。通过多步骤重组,建立了可在植物中广泛应用的FLP/frt位点特异性重组系统。该系统包括含有frt位点的植物表达载体pCAMBIA1300-betA-frt-als-frt和含有由热诱导启动子hsp启动的FLP重组酶基因的植物表达载体pCAMBIA1300-hsp-FLP-hpt。利用二次转化的方式将二者先后转入烟草植株,热激处理后,热诱导型启动子hsp调控的重组酶FLP基因的表达催化位于选择标记基因als两侧同向frt位点间的重组反应,有效地删除了选择标记基因als。41%的经热激处理的二次转化植株发生了选择标记基因的删除,表明该系统在获得无选择标记基因的转基因植株中有很好的应用价值。     

转AtNHX1基因玉米的产生及其耐盐性分析

以玉米(ZeamaysL.)骨干自交系DH4866、齐319和鲁原16106的胚性愈伤组织为材料,采用农杆菌介导法将AtNHX1和hpt基因转入玉米培养细胞,经筛选获得了抗潮霉素的愈伤组织并再生植株。经PCR检测和Southernblot验证,确定了22.8%的再生植株为转基因植株。农杆菌液浓度、愈伤组织基因型及共培养时间对转化率均有明显影响。外源基因在转基因植株后代中的分离呈多样性,在部分株系中表现出孟德尔遗传规律。耐盐筛选表明,一些转基因植株及其后代具有很好的耐盐性,部分株系可在0.8%-1.0%NaCl溶液浇灌下萌发和生长。Northern杂交表明,植株耐盐性提高与AtNHX1基因的转录水平相一致。     

植物的基因对基因抗病性学说

植物的基因对基因抗病性学说促进了寄主与病原物相互作用分子机制研究的深入。介绍近几年来对Avr基因和R基因的特性,二之间的相互作用机制以及R基因信号传导途径等方面的研究进展。     

鲁梅克斯的组织培养和植株再生

1植物名称鲁梅克斯K-1杂交酸模(Rumexpatientia×Rumex tianschanicus). 2材料类别幼嫩花序. 3培养条件培养基为:(1)诱导和增殖培养基:MS 6-BA 1 mg·L-1(单位下同);(2)生根培养基:1/2MS NAA 0.2.培养基(1)、(2)附加200 mg·L-1水解酪蛋白、30 g·L-1蔗糖、6.5g·L-1琼脂,pH 5.8～6.0,120℃灭菌20 min.培养温度为(26±2)℃,光照8～10 h·d-1,光照度为800～1000lx.     

利用FLP/frt重组系统产生无选择标记的转基因烟草植株

在植物转基因植株产生过程中,对转化细胞进行抗性筛选是通用程序,转化细胞的抗性一般是抗生素抗性或除草剂抗性,将赋予转化细胞抗性的选择标记基因删除是提高转基因植物生物安全性的重要措施。来自于啤酒酵母的FLP/frt位点特异性重组系统可有效删除同向定点重组位点frt之间的基因。通过多步骤重组,建立了可在植物中广泛应用的FLP/frt位点特异性重组系统。该系统包括含有frt位点的植物表达载体pCAMBIA1300-betA-frt-als-frt和含有由热诱导启动子hsp启动的FLP重组酶基因的植物表达载体pCAMBIA1300-hsp-FLP-hpt。利用二次转化的方式将二者先后转入烟草植株,热激处理后,热诱导型启动子hsp调控的重组酶FLP基因的表达催化位于选择标记基因als两侧同向frt位点间的重组反应,有效地删除了选择标记基因als。41%的经热激处理的二次转化植株发生了选择标记基因的删除,表明该系统在获得无选择标记基因的转基因植株中有很好的应用价值。     

脱落酸对玉米胚芽和大豆子叶线粒体呼吸的影响

在提取玉米和大豆线粒体后,以ABA处理线粒体,发现在不同底物存在下,ABA均可增加线粒体的耗氧速率,呼吸速率随ABA浓度变化的结合常数（Kd）值为1．43μmol／L。ABA对4态呼吸的促进作用更为显著,因而导致呼吸控制下降,P／O比降低。蛋白质合成抑制剂环己酰亚胺不影响ABA的效应。以ABA预处理大豆子叶,虽然也促进了呼吸作用,但不改变呼吸控制和P／O.     

低温对不同磷水平下玉米叶片几种与光合作用有关的生理指标的影响

采用砂培方法检测低温低磷下玉米自交系‘齐319’和‘99038’苗期叶片几种与光合作用有关的生理指标变化。结果表明:低温(昼/夜,10℃/8℃)胁迫下,2个自交系的净光合速率(Pn)、作用光下的实际PSII光化学效率(ΦPSII)、光系统II(PSII)的原初光能转化效率(Fv/Fm)和PSII潜在活性Fv/Fo均下降;低磷(磷浓度为1.95mg·L-1)下,低温对Pn、ΦPSII、Fv/Fm和Fv/Fo的影响更明显;低温胁迫下的叶绿素含量和生物量减少,可溶性糖含量增加;多磷(磷浓度为19.50mg·L-1)下无机磷和总磷含量增加,低磷下则下降。在相同的条件下,‘99038’的生物量、Pn、ΦPSII、Fv/Fm和Fv/Fo的降幅均小于‘齐319’,可溶性糖含量增加幅度则比其高。