HCMV IE86对ARPE-19细胞周期的影响

目的:构建真核表达质粒pEGFP-N3-IE2,瞬时转染ARPE-19细胞,探讨其时视网膜色素上皮细胞周期的影响.方法:采用PCR方法从质粒pIEP86AD169扩增出IE2片段,将其定向克隆于pEGFP-N3,构建真核表达质粒pEGFP-N3-IE2,酶切、测序鉴定,脂质体介导瞬时转染ARPE-19细胞,RT-PCR、免疫荧光法分析IE2基因在mRNA和蛋白水平的表达.流式细胞仪检测转染前后细胞周期的变化.结果:成功构建重组质粒pEGFP-N3-IE2,并在被转染细胞中检测到IE2基因的表达;瞬时转染后细胞周期表现为S期细胞比例显著增高.结论:成功构建pEGFP-N3-IE2真核表达质粒,重组质粒能在ARPE-19细胞中顺利表达IE2,IE2基因可以引起ARPE-19细胞的细胞周期S期阻滞.     

昆虫细胞无血清培养

血清是细胞培养基常用的添加剂。目前应用最广泛的动物血清是胎牛血清。随着现代细胞生物学在细胞和组织培养方面的进步以及细胞培养方法的标准化,人们更多的注意到了胎牛血清收集中的伦理道德问题。按照3Rs的原则,科学家希望通过减少血清用量和开发使用血清替代物的方法来减少每年对血清的需求;另外由于血清成分并不明确,考虑到改进细胞和组织培养方法的要求,很多无血清细胞培养基陆续开发成功,成为替代胎牛血清的一个比较科学的方法。     

木聚糖酶XYNB分子中折叠股B1和B2间的疏水作用对酶热稳定性的影响

对来源于Streptomycesolivaceoviridis的高比活木聚糖酶XYNB进行同源建模,并结合嗜热木聚糖酶氮末端芳香族氨基酸疏水作用的结构分析,设计了XYNB的T11Y定点突变,观察XYNB分子中折叠股B1和B2的疏水作用对酶的热稳定性的影响。将突变酶XYNB′在毕赤酵母中表达,表达的XYNB′经纯化后与原酶XYNB(同样经毕赤酵母表达后纯化)进行酶学性质比较,结果表明,XYNB′的耐热性比XYNB有明显的提高,但最适温度与原酶一样为60℃。另外,XYNB′的最适pH、Km值及比活性均有一定的改变。实验证实了木聚糖酶XYNB的氮端芳香族氨基酸之间的疏水相互作用与其热稳定性相关,为进一步的结构与功能研究提供了优良的基因材料。     

紫杉菌属——中国新记录属

报道了口蘑科中国新记录属——紫杉菌属。并基于形态特征及分子系统学方法描述了中国新记录种粗壮紫杉菌,标本采自中国浙江省丽水市。该种的鉴别特征是子实体中型,菌盖浅黄褐色,中央黄褐色至深褐色,具有不连续的褐色锥状鳞片,菌褶直生,菌柄圆柱状,中实,基部略膨大,菌环以下污白色,具近似于盖上的锥状小鳞片,常脱落。菌环膜质,易脱落;担孢子椭圆形至宽椭圆形,表面具疣状纹饰,非淀粉质;褶缘囊状体和侧生囊状体缺失,菌盖鳞片由匍匐或半直立状菌丝组成,末端细胞圆柱状,无球针状囊状体,分支,具硬壳。     

人免疫球蛋白中肠道病毒71型中和抗体效价的测定

目的:对人免疫球蛋白和肠道病毒71型和抗体效价进行测定。方法:采用微量细胞病变法,以试验和毒株-01、毒株-02进行检测,对比三种试验检测结果的差异。结果:检测人免疫球蛋白中肠道病毒71型中和抗体效价范围在105~256之间,效价≥239为12批,占总批数的40%,效价≥256为10批,占总批数的33.3%;毒株-01检测效价范围约为224~476,平均滴度为334。3批静注肠道病毒71型平均滴度为1400,高于3个厂家10批人免疫球蛋白含量,(P<0.05)。毒株-02检测效价范围在195~620之间,平均滴度为330,与毒株-01的检测结果差异不明显,不具有统计学意义(P>0.05)。毒株-01和毒株-02检测的17批人免疫球蛋白的肠道病毒71型中和抗体平均滴度为333,效价≥256,可应用于临床重症治疗。结论:经检测,我国各厂家中的人免疫球蛋白中的肠道病毒71型中核抗体效价均为阳性,静注肠道病毒71型免疫球蛋白高于普通人免疫球蛋白的中和效价。     

淡水有害底栖蓝藻研究进展

底栖蓝藻在全球淡水水域内广泛分布,在河流、湖泊、湿地、泉水水域等均有发现。相比于浮游蓝藻,底栖蓝藻因其隐蔽性、采样困难等关注度较低。针对近十几年有害底栖蓝藻不断过量繁殖的情况,本文对有害底栖蓝藻种类、主要的环境影响因子、有害次级代谢物及监测分析方法进行了总结概括。阐述了在有害底栖蓝藻生物量集聚过程中,光照、温度、营养盐、基质、水流等主要环境因子间的交互关联,并指出藻垫小生境内有害底栖蓝藻与微生物群落间作用的重要性。分析了不同属种有害底栖蓝藻的代谢物种类及影响代谢物产出的因素,总结了目前定性和定量分析有害底栖蓝藻的方法并指出其不足,对预测、定位高水平的有害底栖蓝藻提出了建议。本文为进一步研究有害底栖蓝藻异常增殖机制和有效防控方法提供了参考和借鉴。     

自制变焦水透镜演示晶状体的调节作用

人体眼球的晶状体,实质上是焦距可变化的凸透镜.介绍一种以水为介质焦距可变化的凸透镜的制作过程及使用方法,利用这种变焦水透镜替代人眼球模型中的焦距不可变化的晶状体,进而直观地演示人眼成像的特点、人眼在观察远近物体时晶状体曲度变化的动态过程、假性近视眼的生理原因及矫正方法.     

R-spondin2调控Wnt/β-catenin信号通路的机制及其对骨骼系统的影响

R-spondin2 (Rspo2)是蛋白质家族RSPOs成员之一,其可以通过富含亮氨酸重复序列的G蛋白偶联受体4/5(leucine-rich repeat-containing G protein-coupled receptor 4/5,LGR4/5)、细胞表面跨膜E3泛素连接酶ZNRF3/RNF43 (zinc and ring finger 3/ring finger protein 43)、硫酸乙酰肝素蛋白聚糖（heparan sulfate proteoglycans,HSPGs）和含GTP酶激活蛋白质1的IQ基序（IQ motif-containing GTPase-activating protein 1,IQGAP1）来调控Wnt/β连环蛋白（catenin）信号通路,Wnt/β-catenin信号通路是目前研究最广泛且与基础骨生物学直接相关的信号通路,该通路中任何一环节出现问题都可能对骨的调控产生影响。近年来研究发现,Rspo2可以通过Wnt/β-catenin对成骨细胞（osteoblast,OB）、破骨细胞（osteoclast,OC）和软骨细胞产生作用,并参...     

渭北旱塬苹果园土壤紧实化现状及成因

本研究通过分析渭北旱塬苹果园土壤的紧实化现状及其诱导因素,找出影响当地苹果园健康发展的土壤退化隐性因素,为果园科学管理提供理论依据.分别选取种植年限＜10年(4～6年)、10～ 20年(14～16年)和＞20年(24～ 26年)的苹果园各4个,分析0～60 cm土层土壤容重和紧实度随土层深度的变化规律,探明果园土壤内部...     

短时极端高温对松毛虫赤眼蜂成虫致死作用及子代适合度的影响

极端高温天气事件在高产作物种植区频繁发生,潜在影响了寄生蜂对害虫的防控能力.为明确短时极端高温对松毛虫赤眼蜂Trichogramma dendrolimi Matsumura成虫致死作用及子代发育适合度的影响,本研究模拟夏季田间最高气温,以42℃高温处理松毛虫赤眼蜂成蜂0.5h和1 h,统计并观测了各处理条件下母代蜂致...