一种来源于酒曲地衣芽孢杆菌溶菌酶基因在毕赤酵母中的诱导表达及活性分析

利用梯度稀释法和划线纯化法对酒曲中的微生物进行分离纯化,将所得微生物进行液体培养并检测其溶菌酶活性。通过分子生物学方法进行菌种鉴定,得到一株具有溶菌酶活性的地衣芽孢杆菌。提取地衣芽孢杆菌全基因组,设计特异性引物,克隆基因序列Lyz并连接至毕赤酵母分泌型表达载体pPICZαA中,构建重组表达载体pPICZαA-Lyz。重组载体经电转化整合入甲醇型毕赤酵母菌株X33基因组中进行重组表达。摇瓶发酵结果显示,甲醇诱导72 h后,发酵液中溶菌酶活性为1 360 U/m L。酶学性质分析结果显示,重组地衣芽孢杆菌溶菌酶在pH3.0~9.0范围内可以保持较高的相对活性,具有良好的热稳定性。抑菌试验结果显示地衣芽孢杆菌溶菌酶对革兰氏阴性菌有抑菌作用。     

The Breeding of Mutant p53 and Neu/erb B2 Dual transgenic Mice: Both of the Genes were Over expressed Specifically in the Mammary Gland

为了研究乳腺癌发生与发展过程中突变型ｐ５３和Ｎｅｕ基因之间的相互作用,我们构建了ｐ５３／Ｎｅｕ双转基因鼠。用５只成年雄性Ｎｅｕ转基因鼠与１０只成年雌性ｐ５３转基因鼠交配,对１５０只雌性杂交后代鼠进行ｐ５３／Ｎｅｕ双转基因鼠的筛选。为此,本实验建立了ＰＣＲ一步鉴定法。即：在同一个反应管内能同时满足小鼠β酪蛋白基因、ｐ５３基因和Ｎｅｕ基因上三个片段（分别为０．５ｋｂ、１．２ｋｂ、１．７ｋｂ）的扩增反应者被断定为双转基因鼠（Ｆｉｇ．１）。传统的Ｓｏｕｔｈｅｒｎ分析（Ｆｉｇ．２）与ＰＣＲ一步法鉴定结果相吻合。证明：该法的准确率为１００％。进一步、随机取样,Ｎｏｒｔｈｅｒｎ分析（Ｆｉｇ．３）表明：双转基因鼠（２号）在哺乳笫二天即出现了ｐ５３基因的高表达。继而、在姓娠笫１０、１７天,哺乳笫１０、２１天也检测到该基因的表达。另外,免疫组化染色也检测到了ｐ５３和Ｎｅｕ蛋白（未展示结果）。     

广东内伶仃岛自然保护区的苔藓植物

报道广东内伶仃岛自然保护区的苔藓植物共１９ 科、３４ 属、６１ 种, 其中藓类１３ 科、２６属、５０ 种, 苔类６ 科、８ 属、１１ 种。全缘疣鳞苔（ Ｃｏｌｏｌｅｊｅｕｎｅａ ｓｃｈｗａｂｅｉ） 等３ 种苔类和拟阔叶小石藓（ Ｗｅｉｓｉａ ｐｌａｔｙｐｈｙｌｌｏｉｄｅｓ） 等１０ 种藓类为广东省新记录。分析了保护区内的苔藓植物区系特点, 并与车八岭、黑石顶、鼎湖山及南岭自然保护区的苔藓植物区系进行了比较。研究表明, 内伶仃岛的苔藓植物区系由于受地理位置及地形特征的影响而具有一定的特殊性。     

浙江椴树科及省沽油科三新变种

本文发表了椴树科及省沽油科三新变种, 即长柄南京椴Tilia migueliana var.longipes, 绒果田麻Corchoropsis tomentosa var.tomentosicarpa及野鸦椿Euscaphis japonica var.pubescens。     

被孢霉γ-亚麻酸高产菌株选育

利用紫外线复合氯化锂诱变高山被孢霉SM96,筛选出一株高产γ-亚麻酸的菌株TM11,产量比出发菌株(25mg/L)提高了近3倍。对影响其多不饱和脂肪酸产生的因子Mg2+,VB6,营养盐溶液,磷源,碳源,氮源酵母膏进行了正交试验,选出TM11最佳的培养基配方:MgSO4·7H2O1.0g,VB6150mg/L,酵母膏6g/L,葡萄糖100g/L,营养盐溶液1mL/L,K2HPO42g/L。在上述最佳培养基中TM11的生物量达18.0213g/L,总脂达10.8128g/L,GLA量达668mg/L。     

补体攻膜复合体致肾小球脏层上皮细胞粘附性改变研究

为探讨膜性肾病中补体攻膜复合体(MAC)介导蛋白尿机制,本研究制作了MAC致肾小球脏层上皮细胞(GVEC)亚溶破模型。通过对细胞局部粘附及相关蛋白的观察发现,MAC亚溶破致伤GVEC后,其粘附性发生改变。其机理与ECM分泌失调、膜硫酸化物质及整合素减少、细胞骨架重排有关。这些改变导致体内GVEC脱附,足突退缩融合,从而参与膜性肾病的蛋白尿产生。     

淫羊藿属植物中的黄酮类成分及其分类学意义

用HPLC法研究了具8位异戊烯基的黄酮醇甙类(A类)及一般结构的黄酮醇甙类(B类)在淫羊 藿属Epimedium L.中的存在和含量情况,得到一些具分类学意义的结论。1)依据化学成分可将 Epimedium 分为3群：A群,主要含A类成分;B群,主要含B类成分;AB群,两类化合物含量都高。B 群的8个类群(种或亚种)有多项演化程度较高的形态特征,它可能是Epimedium发展演化中较为进化 的一个分支群。—朋群的种类为本屑较原始的类群,因而在化学性状上有朋群→A群、AB群→B群的 演化趋势,与形态演化趋势基本相关。A、B、AB群的划分与现有分类系统不一致,也与花粉、染色体C 带的结果不很吻合。2)分布于地中海的E. alpinum因有较高含量的厶2类成分(A类中4'-OH的一类 化合物)而体现了与中国的原始类群的一些联系。3)E. davidii和E. ecalcaratum的化学成分几乎相 同,表明花瓣距的有无在Epimedium中的原始类群可能不具重要的分类价值。4)HPLC图谱为E.Х fanjingshanense这一杂交种的亲本来源提供了可靠的证据。本研究结果为建立一个合理的Epimedium的分类系统提供了新的依据。     

长白山次生针阔混交林乔木幼苗存活的影响因素分析

基于长白山次生针阔混交林样地, 以520个1 m × 1 m幼苗样方中胸径小于1 cm的乔木幼苗为研究对象, 选取2013年和2014年的幼苗调查数据, 运用广义线性混合模型(GLMM)分析了生物邻体和生境异质性对幼苗存活的影响, 探讨了次生针阔混交林幼苗存活影响因素及物种共存机制。结果表明: (1)适宜大树生长的局域生境同样也适宜幼苗的存活, 幼苗存活率与土壤含水量和有效氮等土壤养分显著正相关。(2)幼苗个体之间存在明显的竞争, 较多的幼苗邻体显著降低幼苗的存活率。同种大树邻体和同种幼苗邻体与幼苗存活显著负相关, 表明存在负密度制约效应。(3)随着幼苗年龄的增加, 生境异质性对幼苗存活的影响逐渐增大。该研究证实了密度制约效应和生境异质性对幼苗存活有着重要影响, 其相对重要性随着幼苗年龄级、功能群以及物种种类而变化。     

厦门同安湾定置网捕获鱼类的多样性及营养级特征

利用2012年4月至2013年3月在同安湾进行的定置网渔业资源调查资料, 探讨了该海域鱼类多样性及平均营养级特征。结果表明, 周年逐月共鉴定鱼类112种, 隶属于15目53科88属。渔获物组成以沿岸小型底层鱼类为主, 其中中上层鱼类15种, 中下层鱼类18种, 底层鱼类79种; 暖水性种类84种, 暖温性种类28种, 亚热带动物区系特征明显; 杂食性鱼类8种, 低级肉食性鱼类71种, 中级肉食性鱼类30种, 高级肉食性鱼类3种, 以低级肉食性鱼类为主。中华海鲶(Tachysurus sinensis)是夏、秋、冬三季的优势种, 六指多指马鲅(Polydactylus sextarius)、锯脊塘鳢(Butis koilomatodon)和髭缟鰕虎鱼(Tridentiger barbatus)是春、冬两季的优势种。重量和尾数多样性指数最高值均在11月, 分别为3.26和3.29; 最低值均在2月, 分别为1.78和1.77。鱼类种类存在明显的季节更替现象, 其月更替率6月最低, 为40.1%; 3月最高, 达68.6%。鱼类平均营养级也存在明显的季节变化, 其中3月最低, 为3.02; 1月最高, 为3.92; 周年平均营养级为3.52。与2003年调查资料相比, 鱼类种类数明显减少, 鱼类组成和优势种发生了很大的变化, 导致变化的主要原因可能是过度捕捞、栖息地破坏和环境污染等。     

过氧化氢胁迫促进产朊假丝酵母合成谷胱甘肽

谷胱甘肽(GSH)在生物细胞抵御外界环境条件的刺激和胁迫时起到非常重要的作用。考察了不同时间不同浓度过氧化氢胁迫和过氧化氢连续胁迫对产朊假丝酵母合成GSH的影响, 发现低浓度过氧化氢的连续胁迫对GSH的合成有明显促进作用。进一步在发酵罐上应用了低浓度过氧化氢(36 mmol/L)持续胁迫策略, 最终GSH产量为922 mg/L, 胞内GSH含量为1.64%, 比对照分别提高了7%和35%。