OCT4 介导卵泡刺激素对永生化人卵巢上皮细胞株增殖、 凋亡和侵袭能力的影响

目的:探讨OCT4基因对卵泡刺激素作用下的永生化人卵巢上皮细胞株(Moody细胞)增殖、凋亡和侵袭能力影响。方法:将不同浓度的FSH(0、25、50、100mIU/ml)作用于Moody细胞48小时,应用Western-blot技术检测OCT4表达情况。采用慢病毒介导将重组质粒OCT4稳定转染至人卵巢上皮细胞株中,应用Western-blot法鉴定OCT4蛋白表达情况。FSH以50 mIU/ml作为工作浓度,实验对象分为4组:①siCon组,转染空载体的阴性对照组;②OCT4组:稳定转染OCT4基因的Moody细胞组;③FSH+siCon组:以FSH处理的siCon组;④FSH+OCT4组:以FSH处理的OCT4组。采用MTT比色法检测各组细胞的增殖情况,流式细胞仪检测各组细胞凋亡情况,Transwell侵袭实验检测各组细胞侵袭能力的变化。结果:(1)随着FSH浓度的增加,Moody细胞中OCT4蛋白表达逐渐增高,在FSH浓度为50 mIU/ml时达最高;(2)OCT4基因成功转染至Moody细胞中,经Western-blot检测该基因在细胞中进行蛋白高表达;(3)FSH+OCT4组细胞增殖活性明显增高,同时凋亡率降低,与另外三组相比差异具有统计学意义(P<0.05);(4)在FSH作用下,转染OCT4后明显增强了细胞的侵袭能力,与另外三组相比差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:OCT4介导了FSH对人卵巢上皮细胞增殖、凋亡、侵袭活性的调控。     

PEP-1 超氧化物歧化酶对大鼠脑缺血再灌注后Bcl-2 的影响

目的:观察细胞穿透肽-铜,锌超氧化物歧化酶(PEP-1-SOD1)预处理对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的改善作用及其脑保护机制。方法:线栓法建立大鼠局灶性脑缺血6h后再灌注损伤模型,进行神经行为评分,并通过HE染色在光镜下观察神经细胞损伤变化,免疫组化法检测B细胞淋巴瘤基因-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)蛋白的阳性表达。结果:盐水对照组(缺血再灌注组或模型组)神经障碍显著高于假手术组(P<0.05),与模型组相比,PEP-1-SOD1预处理组可降低神经障碍评分(P<0.05);光镜下,假手术组神经细胞结构正常,PEP-1-SOD1预处理组和缺血再灌注组均有不同程度的缺血再灌注损伤,PEP-1-SOD1预处理组较缺血再灌注组损伤轻;假手术组Bcl-2蛋白表达极弱,缺血再灌注组和PEP-1-SOD1预处理组在脑缺血再灌注后6h在缺血半暗带周围出现Bcl-2蛋白阳性表达,24h达到高峰,48h表达开始减少。与假手术组相比,PEP-1-SOD1预处理组和缺血再灌注组Bcl-2蛋白阳性细胞数显著增多(P<0.05);与缺血再灌注组相比,PEP-1-SOD1预处理组Bcl-2蛋白阳性细胞数显著增多(P<0.05)。结论:PEP-1-SOD1对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤有保护作用,PEP-1-SOD1可通过上调Bcl-2蛋白的表达发挥脑保护作用。     

FSH通过SATB1调控上皮性卵巢癌ES-2细胞的增殖和侵袭活性

目的:探讨特异AT序列结合蛋白1(specialAT-rich sequence-bindingprotein,SATB1)在卵泡刺激素(Follicle stimulating hormone,FSH)诱导的上皮性卵巢癌ES-2细胞增殖和侵袭中的作用。方法:以Real-time PCR检测不同浓度FSH(0、10、20、40、80mIU/ml)处理后SATB1基因mRNA表达水平的变化。实验分4组:①siCon组,转染si-阴性对照(si-Negative contro1)序列的实验组,对SATB1无干扰作用;②siSATB1组:转染特异性干扰下调SATB1的siSATB1序列;③FSH+siCon组:以FSH处理的siCon组;④FSH+siSATB1组:以FSH处理的siSATB1组。MTT法检测4组细胞的增殖情况,Western blotting技术检测4组细胞细胞周期蛋白(CyclinD1),基质金属蛋白酶2(MMP-2)的蛋白表达情况,Transwell侵袭实验检测4组细胞侵袭能力的变化。结果:1.FSH+siCon组的细胞增殖能力明显高于siCon组的细胞增殖能力,FSH+siCon组的Cyclin D1蛋白相对表达量0.90±0.08明显高于siCon组的0.37±0.01(P均<0.01),提示FSH具有促进ES-2细胞增殖的作用。2.FSH+siCon组的穿膜细胞数(302 12)个明显高于siCon组(139 19)个,FSH+siCon组的MMP-2蛋白相对表达量0.40±0.01明显高于siCon组的0.28±0.02,提示FSH具有促进ES-2细胞侵袭能力的作用。3.随着FSH浓度的增高,SATB1mRNA的表达量逐渐增加,分别为1,1.66±0.04,1.79±0.21,2.31±0.03,以FSH浓度为80mlU/ml时最显著(P<0.05)。4.FSH+siSATB1组的细胞增殖能力明显低于FSH+siCon组的细胞增殖能力,FSH+siSATB1组的Cyclin D1蛋白相对表达量0.22±0.02明显低于FSH+siCon组的0.90±0.08(P均<0.01);FSH+siSATB1组的穿膜细胞数(52 16)个低于FSH+siCon组的(302 12)个,FSH+siSATB1组的MMP-2蛋白相对表达量0.15±0.00明显低于FSH+siCon组的0.40±0.01(P均<0.01),FSH促进ES-2细胞增殖和侵袭的能力由于SATB1基因表达的下降而被阻断。结论:SATB1是FSH作用的重要靶分子,介导FSH对上皮性卵巢癌ES-2细胞系增殖、侵袭活性的调控。     

足癣患者治疗现状调查

目的了解中国足癣患者的治疗现状,加强临床医生对相关诊治指南推荐方案的认知和理解。方法中国医师协会皮肤科医师分会组织全国9家医院进行中国足癣患者治疗现状问卷调查。结果共收集到问卷690份,结果显示我国足癣患者大多数选择自行购买外用抗真菌药物治疗,最常选用的外用药物为咪唑类药物,往往以瘙痒和／或皮疹消失作为停止治疗的依据,治疗最长时间中位数为2周,在治疗足癣的疗程上显示出明显不足。足癣患者常合并甲真菌病等其他皮肤癣菌病,同时其家庭成员患病率也较高,在治疗足癣患者的同时,应积极治疗其合并的其他皮肤癣菌病,也应同时对患者家庭成员进行治疗。结论本研究对更加有针对性地制定合理足癣预防和治疗方案并加强患者宣教具有重要作用。     

医疗不良事件报告体系评述

医疗不良事件报告体系对于促进患者安全、提高医疗质量具有重要作用,但各国的报告体系模式有所不同。借鉴国外报告体系的成功经验,为建立和完善适合我国国情的医疗不良事件报告体系提供理论依据。     

上皮性卵巢癌中TFAP2A对hTERT表达的调节及其机制研究

摘要 目的：探讨在上皮性卵巢癌中TFA2A对hTERT表达的调节和作用机制。方法：采用免疫组织化学方法检测TFAP2A和hTERT蛋白在卵巢正常、交界及上皮性卵巢癌组织中的表达,采用Western Blot和qRT-PCR技术检测hTERT在敲减TFAP2A基因的SKOV3、CAOV3细胞中的表达水平、检测hTERT在过表达TFAP2A基因的HO8910细胞中的表达水平。在干扰TFAP2A的CAOV3细胞中或过表达TFAP2A的HO8910细胞中分别加入PI3K/AKT信号通路激动剂740-YP或抑制剂LY294002,检测相关蛋白表达变化,探讨TFAP2A、hTERT与PI3K/AKT信号通路的关系。结果：TFAP2A在71.88%的上皮性卵巢癌组织中呈高表达,hTERT在78.12%的上皮性卵巢癌组织中呈高表达; 将hTERT 和TFAP2A的免疫组化评分行Pearson相关性分析,两者间相关系数r=0.78,P＜0.001。Western Blot和qRT-PCR的结果均显示,在SKOV3和CAOV3卵巢癌细胞中,敲减TFAP2A后,hTERT的表达均明显下降,而在HO8910卵巢癌细胞中,增强TFAP2A基因表达后,hTERT的表达均明显上升。在CAOV3和HO8910处理细胞中,分别使用PI3K/AKT信号通路激动剂740-YP 或阻滞剂LY294002处理后,Western Blot 检验hTERT和PI3K/AKT通路蛋白的表达,发现激动剂740-YP 或阻滞剂LY294002可以逆转敲减或过表达TFAP2A引发的PI3K/AKT通路蛋白表达下调或上调,但不能逆转hTERT蛋白表达下调或上调。结论：在卵巢肿瘤组织中,TFAP2A和hTERT在上皮性卵巢癌组织中均呈高表达,且hTERT的表达和TFAP2A成正相关,在上皮性卵巢癌细胞中TFAP2A可调节hTERT的表达,且TFAP2A对hTERT的表达的调节不经由PI3K/AKT通路。     

Survivin细胞核表达与上皮性卵巢癌预后的关系

目的:探讨上皮性卵巢癌survivin的亚细胞表达的临床意义.方法:应用免疫组化,检测64例上皮性卵巢癌中survivin蛋白的表达.分别计数survivin的细胞核表达和细胞质表达.分析Survivin表达与上皮性卵巢癌临床病理特征及患者预后的关系.结果:Survivin在上皮性卵巢癌中主要在细胞核表达(33.3%),明显高于survivin的细胞质表达率(15.8%)(p=0.001).Survivin细胞核表达阳性率与上皮性卵巢癌的组织学分级的增高、临床分期的提高、淋巴结转移阳性、PCNA表达增加和不良预后呈正相关(p＜0.05),但与上皮性卵巢癌患者的年龄(p=0.29)、组织学类型无关(p=0.739).多因素Cox比例风险回归模型分析显示survivin的细胞核表达是上皮性卵巢癌的独立预后因素(p＜0.01).结论:Survivin细胞核表达是预测上皮性卵巢癌不良预后的一个独立指标.     

化学调控四季花龙眼成花座果的初步研究

不同化学试剂组合对四季花龙眼枝梢生长和成花座果研究表明,不同时期成熟的枝梢对四季花龙眼成花座果无重大的影响;乙烯利、多效唑和赤霉素三者共同作用可促进成花座果;当枝梢充分成熟时,树冠喷施乙烯利250mg·L-1+多效唑450mg·L-1,谢花3/4时再喷施赤霉素50mg·L-1,可以有效抑制四季花龙眼植株新梢的萌发,促使植株100%成花,并且花穗和果穗性状的综合表现最好。     

安徽含山上泥盆统叶肢介化石

国内晚泥盆世的叶肢介,曾在湖南长沙岳麓山上泥盆统岳麓组上部产Lioestheria yuelu-shanensis Zhang,在南京附近龙潭擂鼓台上泥盆统五通组顶部也发现一层叶肢介化石,仅有Lioestheria longtanensis Zhang一种,总的来说,晚泥盆世叶肢介化石发现较少。本文所描述的材料,是含山县清溪煤矿井口矸石堆的黑色含炭质粉砂质页岩中采集的。为查明其确切的层位,实测了主井井壁剖面,现     

新疆巴楚和柯坪地区奥陶纪——泥盆纪腹足类

描述腹足类化石１２属１２种,其中２新种,它们分别产于新疆巴楚和柯坪地区的奥陶纪－泥盆纪地层。