蓝藻水华堆积处理池中微囊藻毒素降解细菌的分离及降解特性

微囊藻毒素(microcystins, MCs)近年来由于蓝藻水华在世界范围内频发而受到广泛关注。从太湖北部蓝藻水华堆积处理池中分离出一株微囊藻毒素降解细菌SW1, 经16S rDNA序列分析鉴定为鞘氨醇单胞菌(Sphingopyxis sp.)。SW1的生长最适pH为中性(pH 6-8), 但也能生长于pH 10条件下。SW1对MCs的两种异构体MC-LR和MC-RR具有高降解活性, 并表现出一级反应动力学特征, 其降解速率常数分别为0.35/h和0.28/h。温度和pH对SW1降解活性有很强影响: 在温度为22-37℃, pH中性或弱碱性条件下(MC-LR, pH 6-9; MC-RR, pH 7-8), SW1具有高降解活性; 而在低温和强碱性条件下其降解活性受到强烈抑制。聚合酶链式反应(PCR)表明SW1及蓝藻水华堆积处理池均含有mlrA的同源基因, 表明处理池中存在MCs的生物 降解。       

微生物发酵产光学纯度D-乳酸研究进展

D-乳酸作为一种重要的手性中间体和聚乳酸合成的原料,其生产已越来越受到人们的重视。然而,低光学纯度D-乳酸在很多领域的应用都受到限制。微生物发酵法能够生产高光学纯度的D-乳酸。除了乳酸生产的传统菌株-乳酸细菌,研究者们还通过基因工程的手段不断探索其它种属菌株利用更廉价的可再生资源高产光学纯度D-乳酸的可行性。介绍了D-乳酸的物化性质及其在工业生产、化学加工和聚乳酸合成中的应用,并详细综述了国内外发酵法生产光学纯度D-乳酸的最新研究进展,着重介绍了采用基因工程育种策略提高菌株的D-乳酸产量、转化率、生产强度以及光学纯度,降低副产物的合成,扩大底物利用范围的研究成果。所涉及的菌株包括:乳酸细菌、大肠杆菌、谷氨酸棒杆菌以及酵母等。这些研究表明,应用基因工程手段改造生产菌株的代谢途径是选育D-乳酸发酵生产菌株的发展趋势。最后还对D-乳酸发酵生产的前景进行了展望。     

去除致癌基因的EB病毒潜伏膜蛋白1的重组腺病毒的构建及其免疫效果

为进一步研究利用EB病毒潜伏膜蛋白1(LMP1)进行免疫治疗的可行性,构建了含有去除致癌基因的EB病毒LMP1片段(LMP1△)的穿梭质粒pAdTrack CMV LMP1△,将它与腺病毒骨架质粒pAdEasy 1用电转染的方法共同导入大肠杆菌BJ5183中,在宿主菌重组酶的介导下进行同源重组。通过抗性筛选,获得含有重组腺病毒基因的质粒;然后再通过脂质体将重组腺病毒质粒导入腺病毒包装细胞HEK293细胞中,在HEK293细胞E1蛋白的反式作用下,病毒被包装。将包装病毒的细胞裂解上清进行PCR鉴定证实,病毒DNA中含有目的基因的特异性片段。RT PCR证明了外源基因在真核细胞中得以转录,免疫酶和Westernblot的结果也显示,LMP1△蛋白在真核细胞得到表达。将扩增后的病毒感染HeLa细胞,测定病毒滴度为3.0×109PFU/ml。为初步探讨其免疫效果,采用肌肉注射和滴鼻的方式感染Balb/c纯系小鼠,免疫酶检测其特异性抗体,LDH法检测特异性CTL的杀伤作用,结果发现,两种免疫途径均可诱发小鼠针对LMP1的特异性体液免疫和细胞免疫,而且Ad5作为免疫对照组的小鼠则没有引起相应的免疫反应。     

重组人干细胞因子的研究

利用基因工程的方法制备了高纯度的人干细胞因子,并对制备的重组人干细胞因子的结构和生物活性进行了研究。结果表明rhSCF在磷酸盐缓冲液中以非共价的二聚体形式存在,其精确分子量、质量肽谱、氨基酸组成及N端、C段序列等均与理论值一致,二硫键位置正确。rhSCF单用或与rhG-CSF合用,对猴外周血造血祖细胞有明显的动员作用。     

短小芽孢杆菌抗药性质粒pCJ3的分离及分子特性的研究

从短小芽孢杆菌中分离出具有四环素抗性的质粒pCJ3,经抗性消除试验、转化活性测定、琼脂糖凝胶电泳分析和电镜观祭等方面试验得到证实。电镜观察表明pCJ3质粒DNA分子具有共价闭合超螺旋环状和开放型环状两种构型。根据经验公式计算其分子量为4.33×106。     

鸟氨酸脱羧酶参与孕酮诱导的卵成熟过程吗？

Ornithine decarboxylase (ODC) activity increases by 2 times in the process of progesterone-induced Bufo oocyte maturation (Table 1). Tumor promotor phorbol ester (PMA) is unable to affect both basal and stimulated ODC activity (Fig. 5) although it is capable of elevating the rate of steroid-induced maturation (Fig. 4). Spermine can inhibit significantly ODC activity of oocytes (Fig. 3). Hormone-stimulated ODC activity falls by 17% when Bufo oocytes are cultured in the alkaline Ringer's solution containing 5 mM spermine (pH 11.6) (Fig. 2). The period, however, is shortened by more than 50% during which the oocytes undergo GVBD (Fig. 1). Otherwise, spermine is found to repress ODC activity in dose dependent manner when microinjected in Bufo oocytes (Fig. 3). But oocytes undergo GVBD with a frequency of more than 80% when progesterone-induced increment of the enzyme activity is totally inhibited in the oocytes injected with approximately 50 nl 4.0 mM spermine. The conclusion may emerge from the above-stated results that increased ornithine decarboxylase activity is not essential for progesterone-induced Bufo oocyte maturation. In addition, ODC activity begins to increase rapidly when endogenous spermine level has been lowered to the largest extent in the maturation process. Therefore the endogenous spermine probably acts as a physiologically negative regulator of ODC activity since exogenous spermine inhibits seriously ODC activity of Bufo oocytes.     

细黄放线菌5406孢子粉用于早稻谷种催芽

在批林批孔运动中,我们试验用细黄放线菌(Actinomyces microflavus) 5406孢子粉于早稻谷种催芽。和其他催芽方法相比,用这种方法催芽的秧苗苗高、叶宽、茎粗、株重,同时还可节省人力和物力。在试验过程中,结合现实阶级斗争开展批林批孔,打击了阶级敌人的破坏,提高了社员的路线斗争觉悟,促进了科学实验的开展。     

苏芸金杆菌以色列变种在不同培养基上的产毒能力

苏芸金杆菌以色列变种(Bacillus thuringiensis subsp.israelensis)对蚊幼虫的杀虫活性,主要在于蛋白质晶体,而营养条件对晶体的合成有着重要影响。据研究,苏芸金杆菌不同血清型对培养基的要求各有差异。关于适合苏芸金杆菌以色列变种产生毒力的培养基,特别是     

Y—box结合蛋白的研究进展

Y-box元件是指存在于一些基因的启动子或增强子中的一类顺式调控元件。其核心序列为“CCAAT”。对一些基因启动子中的CCAAT序列进行点突变和基因缺失的实验,证实这个顺式调控元件在基因转录调控中扮演重要角色。自1987年以来,人们从不同种类细胞核内检测到多种能与CCAAT元件结合的因子,如人类组织细胞中的CTF、NPI、YB1、CBP、CP1、CP2、dbp1、dbpB;大鼠及其他一些     

小麦雪霉叶枯病菌侵染过程中的细胞学研究

采用电镜技术研究了小麦雪霉叶枯病（Ｇｅｒｌａｃｈｉａｎｉｖａｌｉｓ）侵染过程的细胞学特征,电镜观察发现,分子孢子萌发产生的芽管由孢子细胞壁内层延伸而成,病菌侵入寄主体内后,胞间菌丝先在寄主细胞间扩展,随后胞间菌丝侵入坏死的寄主细胞,形成细胞内菌丝;胞间菌丝和胞内菌丝在形态结构上无明显差异,在病菌扩展过程中,寄生细胞发生了一系列的病理变化,并最终坏死消解,寄主细胞的变化可能与病菌分泌的毒素有关。