肝素酶在医药领域应用的研究进展

肝素酶是一类能够特定切割肝素或硫酸乙酰肝素中α-1,4糖苷键并将其裂解成有活性寡糖片段的酶,主要分为真核生物肝素酶(Heparanase)和原核生物肝素酶(Heparinase)。由于原核生物肝素酶是一种高效绿色的生物催化剂,因此近年来在医药领域的应用性研究逐渐被重视。文中结合本课题组相关工作,归纳介绍了原核生物肝素酶通过作用于硫酸肝素蛋白聚糖(HSPGs)生成肝素小分子,抑制肿瘤细胞增殖方面的应用;原核生物肝素酶在制备第三代创新型抗凝血药物低分子量肝素(Low molecular weight heparin,LWMH)和超低分子量肝素(Ultra low molecular weight heparin, ULMWH)方面的应用;原核生物肝素酶作为肝素拮抗药物等医药领域的重要应用;并展望了原核生物肝素酶的未来应用前景及挑战。     

来源于嗜热真菌Talaromyces leycettanus JCM12802的类膨胀素基因鉴定及功能探究

挖掘新颖的类膨胀素基因,丰富类膨胀素基因资源,探究其功能,加深我们对类膨胀素及其作用机制的认识,促进其工业应用。通过RT-PCR的方法从嗜热真菌Talaromyces leycettanus JCM12802中克隆得到了一个1 196 bp的类膨胀素基因Tlexlx1,并与大多数真菌来源的膨胀素相比,Tl EXLX1缺少一个N端的CBM结构域。Tl EXLX1与来源于Penicilliopsis zonata的假定蛋白ASPZODRAFT_140583具有最高的序列相似性81%,与Penicillium digitatum Pd1来源的Expansin-like protein 1相似性为56%。同时构建野生型Tl EXLX1和含有Tl SWO1的N端CBM区的突变型CBM-Tl EXLX1重组质粒并在毕赤酵母中表达纯化,并对其基本性质进行分析。该基因含有1个内含子(83 bp),编码370个氨基酸和一个终止密码子。Tl EXLX1推导氨基酸序列包括一个22个氨基酸的N端信号肽序列,一个类GH45结构域和一个类膨胀素结构域。结果表明,重组蛋白Tl EXLX1和融合蛋白CBMTl EXLX1具有较高的葡聚糖酶活性(地衣多糖:7.2 U/mg和17.2 U/mg;大麦葡聚糖:4.4 U/mg和9.4 U/mg)和微弱的微晶纤维素水解活性。以地衣多糖为底物时,二者的最适作用温度和pH一致(60℃和6.0)。Tl EXLX1可以破坏微晶纤维素整齐光滑的表面结构,与商业纤维素酶有一定的协同效果。获得新型的类膨胀素蛋白,有一定的水解活性,在木质纤维素降解等工业中存在潜在的应用价值。     

土壤—植物根际磷的生物有效性研究

土壤－植物根际磷的生物有效性研究李法云高子勤（辽宁大学生物系,沈阳１１００３６）（中国科学院沈阳应用生态研究所,１１００１５）ＳｔｕｄｙｏｆＰｈｏｓｐｈｏｒｕｓＢｉｏｌｏｇｉｃａｌＡｖａｉｌａｂｉｌｉｔｙｉｎｔｈｅＳｏｉｌ＿ｐｌａｎｔＲｈｉｚｏｓｐｈ...     

高原红细胞增多症患者红细胞二磷酸甘油酸和氧亲和力变化的探讨

在海拔４３００ｍ地区,对１８名移居汉族、２４名世居藏族和２１名高原红细胞增多症（ＨＡＰＣ）患者测定了２,３—二磷酸甘油酸（２,３—ＤＰＧ）和肺通气功能,并进行了血气分析。结果显示：ＨＡＰＣ患者的全血和红细胞内２,３—ＤＰ６浓度均显著高于健康组,但世居、移居健康组之间无明显差异。ＨＡＰＣ组的红细胞２,３—ＤＰＧ和Ｐｄｏ＿２呈显著负相关（ｒ＝—０．７７１,Ｐ＜０．０１）,而在健康组无显著相关（ｒ＝—０．２６,Ｐ＞０．０５）。ＨＡＰＣ组与健康组相比,ｐＨ、Ｐａｏ＿２和Ｓａｏ＿２降低,Ｐａｃｏ＿２和肺泡动脉氧分压差增高。ＨＡＰＣ病人Ｐ＿（５０）为３．７５±０．６６ｋＰａ,健康组为３．４０±０．１２ｋＰａ（Ｐ＜０．０５）,Ｐ＿（５０）与２,３－ＤＰＧ呈正相关（ｒ＝０．５９２,Ｐ＜０．０５）。ＨＡＰＣ组最大呼气中段流量和５０％肺活量最大呼气量明显低于健康组（Ｐ＜０．０１）。本研究提示：①ＨＡＰＣ患者的低氧血症可能与血中２,３－ＤＰＧ浓度过高有关;②轻度肺功能异常亦可促使红细胞进一步增多。     

允许性高碳酸血症对大鼠机械通气相关性肺损伤NF-kB 表达的影响

目的：探讨允许性高碳酸血症对大鼠机械通气相关性肺损伤（VILI）时NF-kB 表达的影响。方法：健康雄性Wistar 大鼠30 只,体重220～280 g,采用随机数字表法,将大鼠随机分3 组（n=10)：对照组（C 组）保留自主呼吸、机械通气肺损伤组（V 组）和 VILI+ 高碳酸血症干预治疗组(H 组)行机械通气4 h。采用吸气相高气道压机械通气模式制备机械通气相关性肺损伤模型。H 组通 过调整吸入的CO2浓度来维持动脉血PaCO2分别为80～100 mmHg。于机械通气15 min 时、机械通气1 h、2 h和4 h 时记录 MAP,采集股动脉血样,进行动脉血气分析,记录PaO2;机械通气结束时,测定支气管肺泡灌洗液(BALF)中总蛋白、TNF-琢和巨噬 细胞炎症蛋白-2（MIP-2）的浓度;取肺组织,测定湿干重比（W/D 比）、细胞间粘附分子（ICAM-1）和NF-kb 蛋白的表达水平,并观 察病理学结果,进行肺损伤评分。测定肺组织丙二醛（MDA）含量及过氧化物歧化酶（SOD）活性。结果：与C 组比较,V 组和H 组 肺损伤评分、W/D 比、ICAM-1表达水平、BALF中总蛋白浓度、TNF-alpha和MIP-2 浓度、MDA 含量和肺组织NF-资B 活性升高,PaO2 降低（P<0.05）;与V 组比较,H 组肺损伤评分、W/D 比、ICAM-1表达水平、BALF 中总蛋白浓度、TNF-alpha和MIP-2 浓度和肺组织 NF-kB 表达降低,SOD活性增强,PaO2升高（P<0.05）。结论：允许性高碳酸血症可下调NF-资B的表达,从而抑制炎症反应减轻大 鼠机械通气相关性肺损伤。     

PBL和TBL的双轨教学法在胸外科专业学位研究生教学中的应用

目的:研究PBL联合TBL的双轨教学法在胸外科专业学位研究生教学中的应用。方法:选取进入我院进入科室进行临床工作的硕士研究生及博士研究生共60人,随机分为教学改革组与传统教学组,每组30人,教学改革组采用PBL联合TBL教学法。在为期1年时间结束后,分别采用闭卷考试、小组成员互评及导师对学员的评价等多种评价模式比较教学改革组与传统教学组的学习效果。同时还采用闭卷考试与问卷调查方式评价教学效果。结果:教学改革组客观成绩与学习效果即出科考试成绩、增设考试成绩与对专业知识掌握程度的客观成绩优于传统教学组,差异具有统计学意义,并且PBL联合TBL的双轨教学法对于提高学生临床思维培养能力、表达能力、交流能力均优于传统教学组,并且提高了学生在实习期间的热情度。结论:联合PBL和TBL的双轨教学发在胸外科专业学位研究生教学中有较好的效果。     

椎体成形术和椎体后凸成形术治疗老年人骨质疏松性压缩性骨折的疗效比较

目的:比较经皮椎体成形术(percutaneous vertebroplasty,PVP)和经皮椎体后凸成形术(percutanous kyphoplasty,PKP)治疗骨质疏松性压缩性骨折(Osteoporotic vertebral compression fracture,OVCF)的疗效。方法:回顾性分析2011年5月到2014年4月我院收治的老年骨质疏松性脊椎压缩性骨折患者共120例124椎,其中PVP术66例70椎,PKP术54例54椎。病椎范围从T6至L5。比较两组病人术前1天、术后第2天椎体恢复高度,后凸角变化;术前1天、术后第2天、末次随访时间疼痛视觉模拟评分(Visual analogue scale,VAS);术前1天、末次随访时间Oswestry功能障碍指数(Oswestry Dability Index,ODI),平均住院日(average length of stay,ALOS)和住院费用。结果:随访3~35个月,平均17.4月,术后椎体高度恢复情况:PVP组vs PKP组组间差异无显著(8.05±0.59 mm vs 7.44±0.53 mm,P=0.440)。两组术后后凸角均变小(PVP组10.33,PKP组9.96,P=0.731),两组间差异无显著性;患者的VAS评分(术前PVP组8.65±0.14,PKP组8.44±0.15,P=0.750;术后PVP组2.91±0.12,PKP组2.85±0.13,P=0.443)两组间差异无显著性;ODI术前、术后两组间比较差异无显著性;平均住院日两组间差异无显著性(P=0.854),平均住院费用差异有显著性(P=0.000),PVP术住院费用显著低于PKP术。结论:两种手术方式临床疗效没有差异,但PVP术住院费用显著低于PKP术,PVP术是基层医院老年人OVCF治疗的合适的治疗方式。     

分离自云南省的本森顿酵母属菌株的分子系统发育研究

从采自云南省的一份水稻茎杆样品上分离出一株产生掷孢子的酵母菌ＣＨ２．３１０。化学分类学研究表明该株菌的主要泛醌类型为Ｑ－９，其全细胞水解液中不存在木糖，故被归入本木顿酵母属中，在该属中Ｃ上０在形态和生理生化性状上最相近的种粝和本森顿酵母，在Ｃ上０能在无外源维生素２基中生长关不可同化Ｄ－葡糖醛酸而与该种的原始描述不符。基于小亚基ｒＤＮＡ（ＳＳＵｒＤＮＡ）全序列的分子系统学分析显示，在所有已描述的本木     

美国启动大规模探索癌细胞基因组变化的研究

美国国立卫生研究院（NIH）旗下的国立癌症研究所（NCI）和国立人类基因组研究所（NHGRI）于2005年12月宣布，他们启动了一项应用基因组分析技术、特别是大规模基因组测序技术、旨在加速对癌细胞在分子水平上理解的综合性的研究计划。     

HeLa细胞内DNA的抗酶(Dnase Ⅰ)组分和AFM直接观察

从HeLa细胞提取的DNA经DNaseⅠ酶解后,发现有两种抗酶组分(B和C).凝胶电泳结果显示组分B的分子大小要超过20000bp,而组分C的分子大小相当于40～50bp.这两种组分在原子力显微镜下的形态都明显不同于标准的双链DNA,其中组分B与以前观察到的λ-DNA变异结构较为相似,组分C则未见报道,根据其分子的表观宽度和高度推测可能为四链结构.此外,荧光实验还表明这两种组分可与EB相互作用,使其荧光增强.