艾滋病患者肠道微生态与抗逆转录病毒治疗及耐药相关性研究新进展

艾滋病(AIDS)是一种由人类免疫缺陷病毒(HIV)引起的免疫缺陷性疾病,因其高传染性和不可治愈而备受关注。本文综述了HIV患者肠道菌群的变化与其发病机制、抗逆转录病毒耐药及肠道免疫激活的相关性。抗逆转录病毒治疗(ART)是降低肠道黏膜免疫和导致持续炎症的独立风险因素。肠道菌群参与或干扰抗病毒药物的代谢,造成肠道黏膜的通透性增加,微生物移位,激活不同的T细胞亚群的免疫活性,产生炎性因子导致CD4+细胞数量持续低下。某些特定的益生菌及粪菌移植(FMT)可调节HIV患者的肠道微生态的平衡,延缓AIDS的发病进程。     

泼尼松灌胃与肌内注射对大鼠骨密度、骨生物力学性能及骨代谢的影响

目的观察泼尼松灌胃与肌内注射两种不同给药方法对大鼠骨密度、骨生物力学及骨代谢的影响。方法将45只SPF级雄性SD大鼠随机分为3组（正常组15只、灌胃组15只、肌内注射组15只）,其中正常组大鼠作为阴性对照,予0.9%生理盐水灌胃2 m L/d;灌胃组大鼠给予泼尼松0.5 mg/（kg·d）灌胃;肌内注射组大鼠给予泼尼松0.5 mg/（kg·d）;12周后测定离体的大鼠椎体骨密度及血清β-CTX、PINP水平变化,采用三点弯曲试验测量股骨皮质骨最大载荷、弹性载荷、断裂载荷等生物力学指标。结果与正常组相比,灌胃组及肌内注射组大鼠椎骨骨密度值均显著性降低（P〈0.05）;与灌胃组相比,肌内注射组大鼠椎骨骨密度显著下降（P〈0.05）;与正常组相比,灌胃组及肌内注射组大鼠股骨的弹性载荷、最大载荷、断裂载荷均显著降低（P〈0.05）,肌内注射组与灌胃组大鼠的弹性载荷、最大载荷、断裂载荷相比差异无显著性（P〉0.05）。与正常组相比,灌胃组及肌内注射组大鼠中血清β-CTX水平均显著升高（P〈0.05）而PINP水平均显著降低（P〈0.05）,与灌胃组相比,肌内注射组大鼠血清β-CTX水平显著升高（P〈0.05）而PINP水平显著降低（P〈0.05）。骨组织切片HE染色显示：肌内注射组大鼠的骨小梁明显纤细疏松,造血组织明显减少,脂肪组织明显增多。结论泼尼松对大鼠的骨密度、骨生物力学及骨代谢指标都有影响,而肌内注射泼尼松比口服对骨密度、骨强度、骨代谢的影响更大,更易造成骨质疏松症。因此,建议临床使用泼尼松时选择口服作为给药方式更安全。     

家蝇抗菌肽Diptericin基因的克隆与分析

Diptericin是抗菌肽家族中的一员, 在昆虫先天免疫系统中起着重要作用。本研究通过EST序列筛选并结合RACE技术克隆了家蝇Musca domestica的Diptericin基因（Md-Diptericin, MdDpt）cDNA序列, GenBank登录号为FJ794602。其全长410 bp, 包含一个300 bp的完整开放阅读框（ORF）, 推导的氨基酸序列C端富含甘氨酸, N端富含脯氨酸, 同源性分析表明, 它与厩蝇Stomoxys calcitrans的Diptericin A mRNA相似性最高（identity=74%）。以邻接法（Neighbor-Joining, NJ）构建的系统关系表明, 家蝇Diptericin与其他双翅目昆虫的Diptericin起源于共同的祖先, 属于Attain_C超家族（Attacin_C superfamily）。基因定量分析表明, 大肠杆菌刺激后6～12 h, 家蝇幼体MdDpt表达出现明显上调。结果提示MdDpt基因在家蝇免疫防御过程中起着重要作用。     

家蝇半胱氨酸蛋白酶抑制剂基因MdCPI的克隆、表达及活性检测

半胱氨酸蛋白酶抑制剂是具有抑制半胱氨酸蛋白酶活性的一类蛋白超家族。本研究根据EST序列信息,通过RACE技术克隆得到1条家蝇Musca domestica半胱氨酸蛋白酶抑制剂基因MdCPI,该基因含有1个357 bp开放阅读框,编码118个氨基酸残基,推导的多肽N端17个氨基酸残基为信号肽序列。同源分析表明,MdCPI 氨基酸序列与红尾肉蝇Sarcophaga crassipalpis的CPI相似性最高（identity=51%）。以邻接法（NJ）构建的系统树表明,家蝇与其他双翅目昆虫CPI起源于共同的祖先,属于I25A型蛋白家族。为了解家蝇CPI对半胱氨酸蛋白酶的抑制活性,构建pET-17b-MdCPI表达载体,并转入大肠杆菌Escherichia coli BL21（DE3）进行重组表达。研究发现1 μg重组家蝇CPI能够抑制约14 μg木瓜蛋白酶的水解活性。结果表明MdCPI确属CPI家族,可能同其他家族成员具有相似的功能,参与免疫及生理调控。这些结果为研究MdCPI在家蝇体内作用机制奠定了基础。     

ITO石英晶体电极上不同内皮细胞浓度的粘弹性研究及药物作用评估

用石英晶体微天平(quartz crystal microbalance,QCM)和活细胞成像技术实时监测人脐静脉内皮细胞(HUVEC)在ITO石英晶体电极上的动态粘附响应过程。在ITO晶体电极上加入不同浓度的HUVEC,测定细胞在QCM上谐振频率以及耗散的实时变化。通过ITO电极与光学显微镜的联用,监测了HUVEC在药物处理前后的动态变化过程。用细胞粘弹性指数(QCM的动态电阻变化与频移变化之比,CVI=ΔR/Δf)表征细胞的粘弹性变化,同时通过活细胞成像技术的联用,实时监测细胞的形态变化。结果表明:细胞浓度为10万个/m L时,细胞在ITO电极上铺展完全且粘弹性最大。抑制剂y-27632和激动剂凝血酶thrombin药物处理细胞前后,在显微镜的实时监测下细胞形态变化不明显,但CVI粘弹性指数变化较大,说明QCM信号比光学信号更为敏感,且在药物筛选方面有有很大的应用前景。     

水曲柳FmABI5基因非生物胁迫及信号诱导的表达模式分析

ABI5（abscisic acid-insensitive 5）蛋白是一个响应ABA信号的碱性亮氨酸拉链类（basic leucine zipper,bZIP）转录因子。揭示了水曲柳FmABI5在非生物胁迫下的表达特征,为该基因在水曲柳中代谢调控功能的研究奠定基础。获得了水曲柳ABI5基因的全长,命名为FmABI5,应用生物信息学软件分析了水曲柳FmABI5基因的分子结构特征,利用PEG、低温（4℃）及盐（NaCl）进行非生物胁迫处理,利用脱落酸（ABA）和赤霉素（GA₃）进行信号诱导,分析FmABI5的表达特征。生物信息学分析表明该基因全长1 455 bp,含有完整的开放阅读框,编码484个氨基酸。FmABI5为不稳定类亲水性蛋白,不存在信号肽,具有跨膜能力,α-螺旋、延伸链、无规则卷曲分布于整个蛋白。分子进化分析结果表明,水曲柳FmABI5基因与芝麻的遗传距离较近,说明其亲缘关系较近;与马铃薯、潘那利番茄、水茄与甜椒的遗传距离较远,说明其亲缘关系较远。非生物胁迫结果表明,FmABI5基因表达水平随非生物胁迫处理时间不同而上下波动,但在处理6、48和72 h后,FmABI5基因对3种非生物胁迫处理都上调表达,说明FmABI5基因对非生物胁迫具有响应。信号诱导结果表明,外源的ABA与GA共同调节了FmABI5基因的表达。     

脊柱微创手术对骨质疏松性椎体骨折的疗效及安全性分析

目的：探究脊柱微创手术对骨质疏松性椎体骨折的疗效及安全性。方法：选取我院骨科于2008年3月-2011年3月收治的72例骨质疏松性椎体压缩骨折进行分组治疗,观察组（n=36）接受脊柱微创手术,对照组（n=36）接受传统保守治疗,对比两组患者术后生活情况、疗效及观察组术后并发症。结果：两组患者治疗前压缩椎体高度/病椎上下椎体高度和之半、椎体后凸Cobb角及骨块侵占椎管比率无明显统计学差异（P〉0.05）,治疗后上述指标均显著改善,观察组改善程度较对照组更为明显（P〈0.05）;观察组治疗优良率91.7%,对照组为58.3%,其中6例患者因症状加重转为手术治疗,观察组治疗效果明显优于对照组（P〈0.05）;观察组患者术后未出现内植物松动、断裂、形成假关节、截瘫等并发症,钉棒内固定系统坚强可靠;两组患者均获得有效随访,平均随访时间（9.7±2.5）个月,观察组平均下地时间（4.1±1.7）d,肌力恢复时间（3.7±0.8）周,Frankel神经功能均恢复E级;对照组平均下地时间（7.4±3.0）d,肌力恢复时间（5.9±1.4）周,Frankel神经功能评分：D级6例,E级30例。结论：脊柱微创手术能够有效改善骨质疏松性椎体骨折患者骨骼力学变化,可有效保证其术后恢复情况,疗效较好,且不会引发严重并发症,值得临床广泛推广。     

低氘水对小鼠免疫调节作用的研究

探讨低氘水(deuterium-depleted water,DDW)对小鼠免疫调节的作用。实验组小鼠以低氘水作为饮用水,对照组饮自来水,饲养6周,分别测定免疫蛋白IgG,,IgM的含量,脾脏指数和胸腺指数(mg/g),脾淋巴细胞增殖能力,迟发型变态反应,NK细胞活性以及T细胞亚群CD4+和CD4+/CD8+的变化,观察低氘水对小鼠非特异性免疫和特异性免疫功能的影响。结果低氘水能显著提高IgM,脾脏指数的水平和CD4+,CD4+/CD8+的含量。低氘水对小鼠非特异性免疫和特异性免疫功能具有一定的增强作用。     

补肾解毒方抗脑老化机制的体外研究

摘要 目的：探讨补肾解毒方含药血清抗脑老化的体外分子机制。方法：采用过氧化氢诱导制备人脑胶质细胞衰老模型，使用补肾解毒方含药血清干预以期达到对人脑胶质细胞衰老模型的治疗效果，CCK-8法检测细胞活力，采用β-半乳糖苷酶染色法观察衰老阳性细胞比例，活性氧荧光探针法检测胞内活性氧水平，流式细胞术检测细胞凋亡比例，qPCR检测细胞中衰老相关基因CXCL1、FOXO1、P16、IL1A、IGFBP3、IL6的转录水平。结果：补肾解毒方含药血清可显著增强细胞活力（P＜0.05），显著减少过氧化氢诱导的衰老阳性细胞比例（P＜0.05），降低活性氧水平，显著减少凋亡细胞比例（P＜0.01），下调IL1A、IL6、CXCL1、IGFBP3、FOXO1转录水平。结论：补肾解毒方含药血清可显著抑制过氧化氢诱导的人脑胶质细胞衰老，其可能与增强细胞活力、抗炎、抗凋亡、降低胞内活性氧水平等有关。     

睾丸彩色多普勒超声在男性不育症中的临床价值

目的:研究睾丸彩色多普勒超声(Color Doppler ultrasound,CDU)在男性不育症(Male infertility,MI)中的临床价值。方法:从2012年3月到2013年3月,选择56例于我院就诊的疑似MI患者作为研究对象。全部患者均予以CDU诊断,分析所得诊断结果。另根据精索静脉曲张(Cirsocele,CIR)情况进行分组,分成亚临床型CIR组(Sub-clinical Cirsocele,SCIR)(8例)与临床型CIR组(Clinical Cirsocele,CCIR)(16例),显示出两组患者的睾丸和附睾、精索静脉、睾丸内动脉(ITA)、睾丸包膜动脉(CA);分析其收缩期峰值血流速度(PSV)、舒张末期血流速度(EDV)、阻力指数(RI)与男性不孕症精液质量及与精子数量的相关性。结果:56例受检者中,共计37例检出异常,占比66.07%,CCIR组的精索静脉最大内径(DR)、瓦氏试验最大内径(DV)、最大Vmax及返流的持续时间(TR)水平均显著高于SCIR组,差异均有统计学意义(均P0.05)。根据Spearman法进行分析后发现男性不孕症精液质量及与精子数量与睾丸动脉(TA)、CA、PSV、EDV均呈正相关,与RI呈负相关;ITA、PSV、EDV与男性不孕症精液质量及与精子数量均呈负相关,与RI均呈正相关;此外,睾丸内动脉数量越多,精子数量越少。结论:CDU对MI疾病的诊断价值较高,结果较为准确,值得临床诊断推荐。