巴西橡胶树HbAIH基因的克隆及表达分析

鲱精胺亚胺水解酶(Agmatine iminohydrolase,AIH)是植物通过精氨酸途径合成多胺过程中的重要酶之一。本研究首次从巴西橡胶树中克隆了AIH基因HbAIH。序列分析结果表明HbAIH全长1 462 bp,开放阅读框长为1 137 bp,编码378个氨基酸。预测 HbAIH 蛋白的分子量是42.28 kD,等电点为5.09,是一个亲水性蛋白。氨基酸相似性比对结果表明HbAIH与大戟科木薯MeAIH、蓖麻RcAIH和麻风树JcAIH等具有很高相似性,且含有植物AIH中高度保守的与酶活性位点形成和参与底物结合的11个氨基酸位点。qRT-PCR 分析表明,HbAIH表达无组织特异性,在雌花中表达量最高,树皮、茎尖、胶乳、叶片和雄花中表达量依次降低。HbAIH在不同发育时期叶片中的表达存在变化,稳定期表达量最低,淡绿期最高,说明HbAIH可能参与橡胶树叶片发育过程。此外,低温、干旱、高盐、过氧化氢、乙烯利、茉莉酸甲酯处理以及橡胶树死皮的发生均能引起HbAIH表达变化。这些结果说明HbAIH可能参与了橡胶树生长发育、产排胶调控及逆境应答过程。     

山羊磷脂氢谷胱甘肽过氧化物酶生物信息学分析

旨在克隆山羊磷脂氢谷胱甘肽过氧化物酶(PHGPx)基因cDNA全序列并进行序列分析.提取山羊睾丸中总RNA,利用RT-PCR和RACE技术,扩增山羊PHGPx基因cDNA序列并对其生物信息学进行分析.结果表明,山羊PHGPx基因cDNA序列全长844 bp,共编码199个氨基酸;山羊与牛、猪、人和小鼠的氨基酸序列同源性均大于90％;山羊PHGPx蛋白二级结构功能区域属谷胱甘肽过氧化物酶家族,预测23-24和28-29氨基酸位点有潜在的信号肽位点;UPGMA算法构建该物种间分子系统进化树,山羊与牛先聚为一类,再分别与猪、鼠、人、鸡聚类,最后与蜜蜂聚类,与物种动物学分类基本吻合.首次克隆了山羊PHGPx基因,具有GSH-Px家族典型特征,研究结果将为PHGPx基因表达分子调控研究提供一定的理论依据.     

衣霉素诱导大鼠心肌细胞内质网应激凋亡模型的构建

目的:通过衣霉素诱导内质网应激建立新生大鼠心肌细胞凋亡模型。方法:不同浓度、不同时间的衣霉素作用于原代培养乳鼠心肌细胞,通过MTT实验和流式细胞术测定心肌细胞的存活率和凋亡率,Western blot检测内质网应激蛋白GRP78,CHOP表达水平。结果:①与阴性对照组相比,衣霉素具有损伤心肌细胞的作用,并呈现剂量与时间依赖关系(P<0.05,n=12)。②通过流式细胞术判断心肌细胞死亡的性质,当衣霉素浓度为100ng/ml,作用72h时,心肌细胞存活率和凋亡率分别为57.4±3.2%(n=12),25.9±5.8%(n=3)。提示衣霉素损伤细胞的形式主要为凋亡性死亡。③内质网应激蛋白GRP78和CHOP表达于6h开始增加,24h达到峰值,随后呈下降趋势。结论:应用衣霉素成功诱导SD乳鼠心肌细胞内质网应激凋亡模型,衣霉素的最佳诱导浓度为100ng/ml,作用时间为72h。     

腹腔镜早期子宫内膜癌手术临床疗效分析

目的:探讨腹腔镜下早期子宫内膜癌分期手术与开腹手术的临床疗效的差异.方法:回顾性研究2008年1月～2012年10月在我院行子宫内膜癌分期手术的84例患者临床资料,手术病理分期为ⅠA～Ⅱ期.其中腹腔镜分期手术40例,开腹分期手术44例,比较2组手术时间、术中出血量、淋巴结清扫数目、术后胃肠功能恢复时间、并发症、术后住院时间.结果:腹腔镜组手术时间长于开腹组,两者相比具有统计学意义(P＜0.05);腹腔镜组术中出血量显著少于开腹组(P＜0.05);淋巴结清扫总数显著多于开腹组(P＜0.05);腹腔镜组在排气时间、尿管拔除时间、术后出院时间均显著早于开腹组(P＜0.05);两者并发症方面无统计学差异(P＞0.05).结论:腹腔镜分期手术较开腹手术更具微创价值,是治疗早期子宫内膜癌稳妥可行的选择.     

宽体沙鳅消化系统的结构

运用形态解剖和组织学方法对宽体沙鳅消化系统进行了研究.宽体沙鳅的胃呈U形;消化道较短,为体长的1.02±0.05倍.咽部粘膜层味蕾发达;未见食道纵肌层;胃分贲门部、盲囊部和幽门部,贲门部具胃腺,盲囊部环肌层发达,幽门部肌肉层3层,呈纵-环-纵排列,幽门括约肌发达;肠各段组织结构无明显差异;肝脏2叶,左叶发达;胰腺组织弥散在肝、脾、胃、肠等的系膜上或随血管的分支进入肝脏组织内.     

不同数量的2kDa富苯丙氨酸的碱性短肽（BOP）和乙醇酸氧化酶结合

乙醇酸氧化酶（GO）只含40 kD亚基却具有多个等电点（pI）.我们曾报告GO含40 kD酸性亚基和68 kD碱性亚基,组成3种GO同工酶［1~6］.后来证实,68 kD亚基由14个2 kD富苯丙氨酸的碱性短肽（BOP）和40 kD亚基组成［7］.现在进一步证实,不同数量的BOP和乙醇酸氧化酶结合,组成多种GO-BOP复合体GC.这些复合体具有不同的pI、乙醇酸氧化酶活性和吸收曲线,但SDS-PAGE和免疫反应相同.在低电压和短时间的醋酸薄膜电泳中,GO和BOP不会解离,GC呈现强碱性（pI>10.0）;在高电压的毛细管等电聚焦电泳(cIEF)中,GO和BOP发生不同程度解离,导致GC不聚焦,或聚焦为不同带,pI为7.4/6.8/6.2/5.3.BOP存在于各种动植物和微生物以及血纤维蛋白原中.     

马尾松中的抗氧化成分

从马尾松(Pinus massoniana)枝条中分离得到21个已知化合物,经波谱学方法将其结构鉴定为7,13,15-abietatrien-18-oic acid (1),12-methoxy-7,13-abietadien-18-oic acid (2),15-methoxy-7,13-abietadien-18-oic acid methyl ester(3),12-hydroxydehydroabietic acid(4),dehydroabietic acid(5),15-hydroxydehydroabietic acid methyl ester (6),3β-methoxyserrat-14-en-21-one (7),3β-methoxy-30-hydroxyserrat-14-en-21-one(8),β-sitosterol (9),(±)-pinoresinol(10),(±)-matairesinol(11),(-)-nortrachelogenin(12),balanophonin (13),cedrusin (14),pinocembin (15),5-methoxypinosylvin (16),pinosylvin (17),1,2-bis-(4-hydroxy-3-methoxyphenyl)-propane-l,3-diol(18),cleistophostaudin(19),lignoceryl ferulate(20)和coniferaldehyde (21).其中化合物12,14,18和21在DPPH抗氧化模型上显示一定的抗氧化活性,其EC50值分别为11.36,6.76,14.07和13.33 μg· mL-1.化合物2～4,6～8,10,11,13,15～21均是从该植物中首次分离得到.     

真菌孢子三种计数方法相关性的探讨

以对数期生长旺盛的黑曲霉、白地霉和康宁木霉孢子为试验材料,分别用血球计数法、比浊法和平板菌落计数法进行计数,用所测得的孢子数分别与其对应的OD值建立回归方程,方程分别为y=2.193×10-2 8.714×10-8x、y=6.472×10-2 7.251×10-8x和y=5.571×10-2 7.163×10-8x。3种真菌孢子计数方法所测得的孢子数与其对应OD值均有极显著的直线回归关系(P<0.01),计数真菌孢子时用比浊法测得OD值带入方程便可快速准确地得出孢子数目。因此,可用比浊法替代血球计数法和平板菌落计数法,作为实验室计数真菌孢子的首选方法。     

丛生丝孢酵母菌的生物学特性观察

探讨了丛生丝孢酵母菌的生物学鉴定特性。采用真菌培养法观察丛生丝孢酵母菌的培养特性、同化试验;耐受试验测定对放线菌酮的耐受性;体外双相形态转换试验确定霉菌相及酵母相;微量稀释法进行抗真菌药物敏感试验;温度耐受性试验、干燥试验、紫外线照射试验测定其抵抗力;小鼠腹腔接种法观察其侵袭力。本菌为双相型真菌,经分离培养该菌呈现真菌所特有的菌落特征,在沙氏肉汤中呈菌膜和沉淀生长;玉米粉琼脂小培养,在镜下可见到大小不等圆形和卵圆形孢子。对10种糖类同化试验阳性,不分解尿素,还原硝酸盐。对氟康唑等4种抗真菌药均敏感;对温度、干燥、紫外线有一定耐受力;侵袭力较弱,组织内酵母相呈细胞内感染。结论观察丛生丝孢酵母菌的生物学鉴定特性,对丛生丝孢酵母菌的实验室鉴定奠定基础和临床诊断提供依据。