应用PBL教学法的病原生物学课程考核体系探讨*

PBL教学法是近年来受到广泛重视的教学改革模式,为适应新的教学改革与发展形势,推进教学创新,增强学生学习的主动性、积极性和创造性,急需建立一种适合于应用PBL教学法的课程考核体系。本文作者将学生的认知能力考核和PBL教学法紧密地结合起来,将考核贯穿于教学的全过程,在教学进程中对认知能力的各个层次进行全面的、连续性的考核,不但体现了考核的合理性、公平性和真实性,也有助于发挥PBL教学模式的优越性。     

人单核细胞系中HIV-1前病毒转录调节新型研究模型的建立

【目的】抗反转录病毒疗法(ART)能够有效控制人免疫缺陷病毒(Human immunodeficiency virus-1,HIV-1)的复制,但是不能将其完全清除。至2012年底,全球仍有3 500万HIV-1感染者,同年约160万人死于艾滋病(Acquired immune deficiency syndrome,AIDS)及其相关疾病。HIV-1感染难以根治的主要原因之一是机体内HIV-1潜伏储存库(Reservoir)的存在。HIV-1潜伏储存库主要由CD4+T细胞和单核巨噬细胞构成,与CD4+T细胞相比,目前研究者对单核巨噬系细胞中HIV-1病毒复制机制尚不明了,且缺乏适宜的研究体系。因此,为探讨单核细胞活化或分化信号对HIV-1复制的影响,我们建立了旨在研究HIV-1前病毒转录调控机制的人单核巨噬细胞系模型。【方法】构建env区域移码突变和nef区域携带EGFP或Nano Luc报告基因的HIV-1 NLn GFP-Kp或NLn Nano Luc-Kp重组病毒,分别感染2种人单核细胞系THP-1或U937细胞。通过有限稀释法制备单克隆细胞系,利用流式细胞术或Nano Luc荧光素酶活性分析检测报告基因的表达。筛选EGFP或Nano Luc阴性表达的细胞克隆,经激活剂佛波酯(Phorbol-12-myristate-13-acetate,PMA)刺激后鉴定潜伏感染的细胞克隆。【结果】研究中鉴定了4个HIV-1潜伏感染的细胞克隆。其中2个是表达EGFP的THP-1克隆,2个是以Nano Luc为报告基因的U937克隆。这些克隆在PMA刺激处理后皆有报告基因的表达,而在恒态条件下未检测到报告基因的表达。【结论】成功建立了4个HIV-1潜伏感染的人单核细胞系克隆,该模型有助于理解单核巨噬系细胞的HIV-1病毒复制机制,可能成为进一步研究HIV-1前病毒转录调控机制的有力工具。     

独行菜属植物叶片脉序的比较观察

对独行菜属（Ｌｅｐｉｄｉｕｍ）８种,１变种进行了叶片脉的比较观察,结果表明：它们的一级脉中等粗细,基部１～２对侧生,一级脉与二级脉连志成拟环结两行羽状脉;三级脉贯穿型或结网型,叶缘末级脉为不完全型,网眼大小,形状不规则,发育均为不完善型,可为探讨十字花科的系统演化提供一些形态学依据。     

原生质体融合选育赖氨酸高产菌种的研究

北京棒杆菌1134衍生株与枯草芽孢杆菌151衍生株的原生质体融合得到了一株可以甜菜糖蜜为原料,在摇床与小罐发酵均能稳定产赖氨酸6 50％以上的高产菌株——Q4413。Q441 3菌落形态类似于11 34株,而菌体形态区别于双亲,呈较短的杆状,无鞭毛,但有较稀疏的纤毛。生理生化研究表明：Q4413耐盐性、蔗糖发酵,石蕊牛奶试验产碱状况酷似于151株,而与1134株略有差异;运动性、糊精、柠檬酸盐利用,MR试验、酪素水解、明胶水解、石蕊牛奶还原,又酷似于1134株而区别于151株;04413的最适生长温度、pH值居双亲之间;Qq4413为原养型加三重抗性[Rifr,AECr Nalr];其细胞DNA含量与GC比测定结果均居双亲之中,而且生物量测定结果也均与双亲有一定的差异。     

黄河三角洲南部潮间带沉积环境对底栖叶绿素a分布特征的影响

2007年9月、2008年4月和2008年7月,在东营黄河三角洲南部潮间带进行了表层沉积物叶绿素a含量和粒径组成调查。结果表明:1)近岸区域叶绿素a含量由北向南逐渐增高,秋季和夏季叶绿素a含量分别为0.426～4.749μg.g-1(平均值为1.591μg.g-1)和0.307～5.195μg.g-1(平均值为1.832μg.g-1),由潮上线到潮下线呈下降趋势;春季叶绿素a含量为0.623～8.734μg.g-1(平均值为2.542μg.g-1),由潮上线到潮下线呈上升趋势;2)沉积物类型较为单一,由粉砂、砂质粉砂和粉砂质砂组成,中值粒径变化范围为0.025～0.081mm(平均中值粒径为0.045mm),由潮上线到潮下线逐渐增大;3)2007年9月叶绿素a分布主要受沉积物粒度的影响,与细颗粒物质含量、中值粒径的大小及各粒径沉积物含量极显著性相关(P0.01);2007年9月与2008年7月叶绿素a含量与细颗粒物质含量呈正比关系,在砂质底质中含量较低,在粘土质底质中含量较高;4)底栖叶绿素a与高程呈负相关,表明松软、平整、稳定的沉积物表面有利于底栖微型藻类的生长和繁衍。     

青霉属真菌Penicillium sp. CPCC 400786的抗病毒活性成分

采用抗艾滋病毒抑制剂筛选模型对一株青霉属真菌Penicillium sp. CPCC 400786发酵产物的乙酸乙酯提取物进行活性评价,结果显示,其对艾滋病毒有较强的抑制活性。采用正相硅胶柱、Sephadex LH-20凝胶柱和半制备HPLC等色谱技术对乙酸乙酯提取物进行分离纯化,从中分离得到8个化合物。通过波谱数据分析,分别鉴定为：oxalicine A（1）、oxalicine B（2）、cis-4,6-dihydroxymellein（3）、亚油酸（4）、十八烯酸（5）、肉豆蔻酸（6）、尿嘧啶（7）、胸腺嘧啶（8）。化合物1和2为杂萜类化合物。对化合物1-6进行了抗艾滋病毒（HIV-1）和抗甲型流感病毒（H1N1）的活性评价。结果显示,化合物1具有良好的抗H1N1活性,其IC₅₀值为38.5μmol/L,比阳性对照药利巴韦林稍弱（IC₅₀=20.5μmol/L）;化合物1和2具有抗HIV-1的活性,其IC₅₀值分别为22.4、67.8μmol/L;其他化合物未显示抗病毒活性。本研究为从青霉属中发现更多抗病毒活性杂萜分子提供了依据。     

冷胁迫下大麦幼苗根质膜水通道蛋白基因的表达

植物质膜水通道蛋白（plasma membrane intrinsic proteins,PIPs）是位于细胞质膜上具有选择性、高效转运水分的一类膜内在蛋白,参与植物生长发育的多个生理活动。本研究以大麦‘Haruna—nijo’为材料,对水培幼苗进行4℃冷胁迫,采用实时荧光定量PCR技术对胁迫期（4℃,48h）和温度恢复期（16℃,48h）两个过程的水通道蛋白PIPSs基因表达进行了分析;同期测定了根水导度（Lpr）、根长和苗高,分析冷胁迫下大麦根mF基因的表达与水分生理的关系。结果表明：大麦幼苗经4℃低温胁迫48h后,苗的生长明显受抑,根的生长无显著变化;温度恢复48h后,苗恢复生长,根的生长无显著变化;根水导度在胁迫期下降,恢复期急剧升高,均无显著差异。实时荧光定量PCR结果显示,根中表达量最高的是HvPIP1;2和HvPIP1;3,最低的是HvPIP1;1和HvPIP2;3;冷处理后HvPIPs表达童与对照比较总体百降,其HvPIP1;2、HvPIP1;3、HvPIP1;4、HvPIP1;5、HvPIP2;1、HvPIP2;2明显下调。恢复后大多数HvPIPS表达童增加．HvPIP1;1、HvPIP1;2、HvPIP1;5、HvPIP2;3显砉增如,HvPIP1;4、mPIP2;5表达量降低,但无显著轰异,研菀发现,冷弼迫后夫菱粮HvPIPs的表达情况总体下调,恢复生长大部分HvPIPs上调,结合根水导度的变化,推测大麦HvPIPs在抗冷反应中的作用复杂,冷害的不同阶段HvPIPs对水分吸收所起的作用不同。     

间作和净作条件下喜阴植物谢君魔芋的光合作用及光合诱导特征研究

为了解种植模式对谢君魔芋(Amorphophallus xiei)光合作用的影响,研究了间作和净作模式下谢君魔芋的光合作用和光合诱导特征。结果表明,间作模式下的谢君魔芋净光合速率(Pn)比净作模式的高18.97%,最大气孔导度(gs-max)比净作模式的小22.4%,且间作模式下谢君魔芋有较高的表观量子产额(AQY)、光饱和点(LSP)、羧化效率(CE)、叶绿素含量以及较小的暗呼吸速率(Rd)、光补偿点(LCP)、CO_2补偿点(Г*)。高光照诱导后,间作模式下的光合诱导状态(IS)大于净作模式,且在间作模式下光合诱导过程中达到最大光合速率(Pmax)和最大气孔导度(gs-max)的30%、50%所需时间较短;同时,光合诱导过程中达到Pmax和gs-max的30%、50%和90%的时间(t30%P、t50%P、t90%P和t30%gs、t50%gs、t90%gs)与gs-initial呈负相关关系。因此,玉米-魔芋间作下,谢君魔芋通过增大AQY和LSP、减小Rd和LCP等来提高光的利用能力及维持碳平衡;同时通过快速的光合诱导,提高对光斑的利用能力从而增加碳获得。