人胚细胞提取物抗突变作用的研究

本文应用体外培养人淋巴细胞和小鼠骨髓微核与染色体畸变检测,研究了人胚细胞水提物(胚提物)的遗传毒性和抗突变效应。结果表明,(1)胚提物(3和30μg/ml,下同)可显著抑制培养人淋巴细胞的自发和γ-射线诱发的微核形成;(2)胚提物对培养淋巴细胞的自发染色体畸变无明显影响,但可显著抑制丝裂酶素C(MMC)诱发的染色体畸变; (3)胚提物显著抑制环磷酰胺诱发的小鼠骨髓多染性红细胞微核(PCE-MN)的增加; (4)胚提物的上述抗突变效应呈剂量依赖性增加。因此,作者认为,人胚细胞水提物是一种抗突变剂, 可望用于肿瘤的化学预防,并可用作为肿瘤放疗和化疗的辅助药物,以减少毒付反应和二次肿瘤的发生率。 Abstract:Genetially toxic and antimutagenic effects of the aqueous extracts of human fetal cells(HFCAE) against mutagen-induced chromosomal aberrations and micronucleus formation in human lymphocytes in vitro and bone marrow of mice were studied.HFCAE (3 and 30 μg/ml)significantly inhibited spontaneous and γ-rays-induced micronucleus formation and MMC-induced chromosomal aberrations in human lymphocytes in vitro.HFCAE (3 and 30μg/ml) strongly suppressed also micronucleus formation induced by CP in PCEs of mice.These antimutagenic effects of HFCAE were dose-dependent.Our results suggest that HFCE might be an antimutagen and have potential value in its clinical application.     

小麦灌浆特性的遗传研究Ⅰ.遗传模型及基因效应

利用8个小麦品种双列杂交的F~1|及其亲本, 按Hayman分析法研究了小麦籽粒灌浆特性的遗传规律。结果表明,小麦籽粒灌浆特性符合加性-显性遗传模型。基因作用以加性效应为主,呈部分显性。籽粒灌浆期的显性方向指向增效,籽粒灌浆速率的显性方向指向减效。所有性状均有较高的狭义遗传力h^2|~N|=0.71-0.93,可在杂种早代选择。     

用分子标记研究禾本科赖草属植物可溶性碳水化合物、色素积累和生长特性之间的遗传相关性

在低温条件下 ,冷季草的可溶性碳水化合物通常与紫色素的积累、生长的缓慢性及对寒冷的适应性具有相关性。Vrn_1基因对一年生冬性禾本科物种的春化、生长和可溶性碳水化合物的积累有重要作用。本研究以Ley muscinereus×L .triticoides的杂种F1开放授粉获得的F2 群体为材料 ,用 2 0 4个未定位的AFLP分子标记和几个基因组特定的与vrn_1相连锁的DNA标记检测了控制可溶性碳水化合物的积累、紫色素的积累和生长特性等几个数量性状的QTL。根据生长特性和适应性可将Leymuscinereus和L .triticoides区分开来。研究表明可溶性碳水化合物与紫色素的积累呈正相关 ,而且有关基因对这两种性状具有多效性。与之相类似 ,分蘖、叶发育、叶生长、草被剪后的再生长和地下茎的蔓延性这些性状之间也呈正相关 ,控制这些性状的基因具有多效性。但是可溶性碳水化合物的积累与生长的缓慢性无相关性。有几个分子标记包括与vrn_Xm1邻近的一个分子标记对叶可溶性碳水化合物的浓度和低温生长具有正效应。而与vrn_Ns1邻近的一个DNA标记对分蘖具有更加特别的效应。我们推测vrn_1对多年生赖草低温下叶可溶性碳水化合物的积累及生长习性具有数量效应。发现几个DNA标记对可溶性碳水化合物的积累及多个生长特性有较强的作用。研究结果暗示     

绿色高效液相色谱法分析四种虫草药材的游离和总甾醇含量

虫草类药材采用85%乙醇超声提取游离甾醇、采用0.5 mol/L氢氧化钾-乙醇溶液回流提取总甾醇,并用绿色溶剂(乙醇和水)固相萃取法纯化分析溶液。用HPLC-ELSD法测定麦角甾醇、胆甾醇和谷甾醇的含量,色谱柱为Poroshell 120 EC-C₁₈ (100 mm×4.6 mm, 2.7 μm),绿色流动相乙醇-水(89:11),流速为0.5 mL/min,结果表明所建立的分析方法3种甾醇成分在考察的浓度范围内,线性关系好、精密度和准确度高。20批虫草类样品均含结合型甾醇和游离型甾醇;冬虫夏草繁育品与野生品均含3种甾醇,两者含量相当;凉山虫草(野生品)、蛹虫草(培植品)、蝉花(野生品)可检测到麦角甾醇。该方法可有效鉴别冬虫夏草和其他3种虫草产品,为虫草类产品质量评价提升提供了依据。     

一种可高效转染的青鳉肌肉细胞系的建立与应用

在哺乳动物细胞系中转基因的效率相对较高而在鱼类细胞系中相对较低, 为了获得鱼类高效转基因细胞系, 我们从模式鱼类青鳉(Oryzias latipes)中分离和构建了肌肉细胞系OLM。该细胞系类似于纤维细胞, 在28℃ DMEM和10%的胚胎牛血清中培养了超过88代。通过染色体分析, 它属于两倍体并含有48条染色体。在脂质体介导下, 报告基因的转染效率可以达到40%, 在测试的其他鱼类细胞中转染效率最高。此外还构建了稳定转染转基因或者非编码RNA的细胞系。OLM细胞对常见的病毒SVCV、GCRV、SGIV等不敏感。综上所述, 研究在青鳉中建立了一种能高效转染的肌肉细胞系, 它适用于鱼类瞬时和稳定的转基因研究。     

Immune Responses and Protective Efficacy Induced by 85B Antigen and Early Secreted Antigenic Target-6 kDa Antigen Fusion Protein Secreted by Recombinant Bacille Calmette-Guérin

In an attempt to improve immune responses and protective efficacy, we constructed two recombinant bacille Calmette-Guérin （rBCG） strains expressing an 85B antigen （Ag85B） and early secreted antigenic target-6 kDa antigen （ESAT6） of Mycobacterium tuberculosis （MTB） fusion protein. Both rBCG strains have the same protein insertion but in a different order （Ag85B-ESAT6 and ESAT6-Ag85B）. The cultured supernatant of rBCG strains and the sera from the mice immunized with the fusion protein Ag85B- ESAT6 or ESAT6-Ag85B formed a band with a fraction size of 37 kDa, equalivalent to the sum of Ag85B and ESAT6. Six weeks after BALB/c mice were immunized with BCG or rBCG, spleen lymphocytes showed significant proliferation in response to culture filtrate protein of MTB. Compared with the BCG group, mice vaccinated with rBCG elicited a high level increase of immunoglobulin G antibodies to culture filtrate protein in the serum. The T-interferon levels in the lymphocyte culture medium supernatants increased remarkably in the rBCG1 group, significantly higher than that of the BCG immunized group （P〈0.05）. Four weeks after vaccination, mice were infected with M. tuberculosis H37Rv and a dramatic reduction in the numbers of MTB colony forming units in the spleens and lungs was observed in the two rBCG immunization groups. Although these rBCG strains were more immunogenic, their protective effect was comparable to the classical BCG strain, and there were no significant differences between two rBCG groups （p〉0.05）.     

半夏药材生品及其炮制品指纹图谱的比较研究

目的:该实验旨在用高效液相色谱法对半夏的生品及其炮制品的指纹图谱进行比较研究,通过半夏指纹图谱主峰的变化寻找半夏炮制前后其主要化学成分的变化。方法:采用75％乙醇(含1％的盐酸)对半夏药材生品及其炮制品进行提取, DiamonsilTM C18(150×4．6 mm,5um)色谱柱,0．1％磷酸溶液—乙腈梯度洗脱,洗脱时间定为50 min,检测波长217 nm,以精氨酸为对照品,对半夏的生品及其炮制品的指纹图谱的主峰数目和峰高进行比较分析。结果:该方法精密度和重复性RSD均小于3％,符合有关规定,半夏炮制后主峰数目发生变化。结论:半夏生品清制和姜制后,75％乙醇(含1％的盐酸)提取液中其所含精氨酸与半夏生品相比均有不同程度的下降,而且指纹图谱的主峰数目也有所变化,说明半夏炮制后其主要化学成分发生变化。