RNA沉默技术及其在烟草抗病毒研究中的应用

RNA沉默技术是一项基因沉默新技术。在抗病毒研究中,人为地将与病毒或宿主基因（宿主基因编码的蛋白质对病毒很重要而对宿主本身作用很小或不起作用）同源的双链RNA（double strand RNA,dsRNA）导入生物体内,引起与其同源的基因发生沉默,从而抑制病毒复制,达到抗病毒的目的。因此,RNA沉默技术技术在抗病毒研究中倍受关注,并取得了显著成绩。主要对RNA沉默技术的相关知识及其在烟草抗病毒中的应用进展作一综述。     

赤眼鳟肉质氨基酸成分研究初报

测定了赤眼鳟肉氨基酸组成。结果表明 ,赤眼鳟肉含有 17种氨基酸 ,其中赖氨酸含量最高 ,总氨基酸中的必须氨基酸的质量分数为 5 7.8%。     

乳酸杆菌体外对大肠埃希菌O-78拮抗作用试验

目的：研究乳酸杆菌体外对大肠埃希菌O-78的拮抗作用。方法：将乳酸杆菌与大肠埃希菌O-78体外共培养观察拮抗情况及用电镜观察形态变化。结果：等量同时间接种,24h内乳杆菌就将大肠埃氏菌O-78全部抑杀;乳酸杆菌早24h接种,4-8h内将大肠埃希菌O-78全部抑杀;大肠埃希菌O-78早24h接种,在12-24h内全部被抑杀。电镜观察发现,经乳酸杆菌培养液处理,大肠埃希菌O-78细胞膜形态发生变化。结论：本试验中所用乳酸杆菌体外具有抑制杀死大肠埃希菌O-78的作用。     

大鼠牙胚成釉细胞中波形蛋白的免疫组化研究

目的：观察和研究波形蛋白在大鼠牙胚成釉细胞中的分布状况,探讨其在牙釉质形成中的作用。方法：取生后1,3,6,9d大鼠下颌切牙牙胚,用免疫组织化学方法显示其成釉细胞中的波形蛋白,并进行观察。结果：在1,3,6d的标本的成釉细胞中有不同程度的波形蛋白的阳性反应产物沉积。结论：在成釉细胞分泌形成牙釉质的过程中,有波形蛋白的存在,它们与成釉细胞的分化和牙釉质基质的形成相关。     

NUMB在口腔白斑和鳞癌中的表达变化及意义

目的:研究NUMB在口腔白斑和鳞癌中的表达及意义。方法:采用免疫组织化学法检测88例口腔正常黏膜、口腔白斑及口腔鳞癌石蜡包埋组织中NUMB蛋白的表达。结果:NUMB在口腔正常黏膜(95.7%)、口腔白斑(75%)及口腔鳞癌(4.7%)中均有阳性表达但是表达频率依次降低。NUMB在各个组中的阳性表达率具有统计学差异(P0.05)。结论NUMB阳性表达率随口腔组织恶性程度增高而减少的趋势提示该基因可能在口腔正常黏膜到口腔白斑再到口腔鳞癌的转化中起作用,NUMB有可能成为早期发现癌变的分子生物学标志之一。     

几种野生蔬菜硝酸盐及维生素C含量的研究

野生蔬菜不仅具有较高的营养价值,还有相当高的医疗价值。近代研究表明,过量的食入硝酸盐,会诱发消化系统癌变,而维生素 C 有防癌作用,因此硝酸盐和维生素 C含量为评价蔬菜品质的重要指标之一。一般栽培的叶菜类蔬菜如白菜、菠菜、苔菜等硝酸盐含量很高,平均存4000mg/kg 鲜重左右。野生蔬菜中的硝酸盐及维生素 C 含量如何呢?我们仅对几种分布广泛,食用历史较长,营养价值较高的野生蔬菜进行了研究,以期为科学地有选择性地开发野生蔬菜资源提供有价值的依据。     

同源重组法构建多功能农药降解基因工程菌研究

构建遗传稳定的多功能农药降解基因工程菌可以为农药污染的生物修复提供良好的菌种资源,然而,构建遗传稳定且不带入外源抗性的基因工程菌是一个难点。通过以受体菌的16S rDNA为同源重组指导序列、sacB基因为双交换正筛选标记构建同源重组载体,二亲结合的方法将甲基对硫磷水解酶基因（mpd）整合到呋喃丹降解菌Sphingomonas sp.CDS1染色体的16S rDNA位点,分别成功构建了含1个和2个mpd基因插入到rDNA位点且不带入外源抗性的基因工程菌株CDSmpd和CDS-2mpd。同源重组单交换的效率为3.7×10^－7～6.8×10^－7。通过PCR和Southern杂交的方法验证了同源重组事件。基因工程菌遗传稳定,能同时降解甲基对硫磷和呋喃丹。甲基对硫磷水解酶（MPH）的比活在各生长时期均高于原始出发菌株,比活最高达6.22 mu/μg。     

病程相关基因启动子片段与GUS的融合基因在拟南芥中的表达

PR1是拟南芥 (Arabidopsis thaliana L.) 系统获得抗性的一个标志基因。利用PCR技术,从拟南芥中扩增并克隆了PR1基因的启动子片段。将该启动子片段与GUS报告基因拼接,构建成含有PR1-GUS融合基因的重组表达质粒。经根癌农杆菌介导转化,得到了转基因的拟南芥植株。用已知的系统获得抗性激活剂处理转基因植物,检测到GUS活性。因此,这一转基因体系可以作为一种简便、灵敏的实验体系以筛选激活植物系统获得抗性的化合物。     

介导细胞间相互作用的重要分子——钙粘着蛋白（Cadherins）

钙粘着蛋白（Ｃａｄｈｅｒｉｎｓ）作为细胞粘着分子中的一个大家族,其成员多达几十种,它们在形态发生（包括细胞的聚集、迁移和分化等）过程中具有极其重要的作用。本文就钙粘着蛋白结构、分布及其功能的研究进展作了较为全面的概述,同时简要讨论了钙粘着蛋白的信号调节机制等。目前,有关钙粘着蛋白的研究趋势已从单纯强调新的分子的发现转变为更为深入、细致地研究它们的结构,它们与配体、受体和反受体的相互作用,信号传导及其调节机制,以及它们在复杂的生命活动中的生物学功能。对于它们的研究正方兴未艾。     

蔗茅EfMYB1基因的克隆与表达分析

为了充分利用蔗茅(Erianthus fulvus)野生资源,挖掘其优良的抗性基因,丰富转基因甘蔗育种候选基因库,该研究结合蔗茅转录组数据,以蔗茅99 1无性系为试验材料,利用RT PCR技术克隆蔗茅MYB基因,并对其进行生物信息学分析及胁迫表达分析,以解析蔗茅的耐寒机理,为转基因甘蔗育种奠定理论基础。结果表明：(1)成功克隆得到一个蔗茅MYB基因,命名为EfMYB1基因(登录号ON586646)。(2)生物信息学分析表明,EfMYB1基因全长1 000 bp,ORF为759 bp,编码251个氨基酸;编码蛋白具有一个保守的SANT结构域,无跨膜结构和信号肽,有多个磷酸化位点;二级结构与三级结构主要以α螺旋和无规则卷曲为主;与南荻相似性最高,遗传距离最近。(3)qRT PCR分析结果发现,EfMYB1基因在蔗茅根和叶组织中的相对表达量随低温胁迫时间的持续而逐渐显著上调,并于胁迫72 h时达到最大值,而在茎中的表达则几乎没有变化;茉莉酸甲酯胁迫下,EfMYB1基因的相对表达量呈先升高后降低的趋势,且在处理6 h时达到最高值;脱落酸胁迫下EfMYB1基因的表达水平较0 h时极显著降低。研究认为,EfMYB1基因属于低温胁迫响应基因,可能参与蔗茅低温胁迫下的应答反应。