Microdystrophin基因重组腺病毒的构建及转染mdx骨髓间充质干细胞的表达

构建含有人microdystrophin基因的重组腺病毒,来感染dystrophin基因敲除小鼠mdx的骨髓间充质干细胞(ＭＳＣ)进行基因修饰,为同种异体基因修饰的干细胞移植治疗ＤＭＤ疾病奠定基础。用NotⅠ酶切含microdystrophin基因的pBSK-MICRO质粒,获得microdystrophin基因。片段回收后定向插入腺病毒穿梭质粒pShuttle-CMV,获得重组质粒pShuttle-CMV-MICRO。PmeⅠ线性化重组质粒pShuttle-CMV-MICRO,去磷酸化后回收后与腺病毒骨架质粒pAdeasy-1共电转化BJ5183感受态细胞。同源重组后用选择性培养基筛选阳性克隆,提取质粒,用脂质体介导转染293细胞,通过观察293细胞病变及PCR扩增目的基因等方法鉴定重组的腺病毒。然后将病毒上清转染DMD模型鼠mdx小鼠的骨髓间充质干细胞,通过RT-PCR以及间接免疫荧光检测microdystrophin的转录及蛋白表达。成功构建了含有microdystrophin基因的重组腺病毒,病毒滴度为5.58×10¹²vp/mL。间接免疫荧光检测可见microdystrophin蛋白在mdx小鼠MSCs中高效表达。该重组腺病毒载体的构建及成功转染到mdx MSCs内表达为下一步用microdystrophin基因修饰的mdx MSCs进行同种异体移植治疗ＤＭＤ疾病奠定了基础。     

高渗盐液对蟾蜍坐骨神经干C纤维动作电位的影响

本实验采用电生理学方法观察了不同浓度的高渗任氏液（以下简称盐液）对蟾蜍坐骨神经干Ｃ纤维动作电位幅度和传导速度的影响。结果表明：（１）Ｃ纤维动作电位幅度和传导速度与高渗液作用时间均呈显著负相关;（２）Ｃ纤维动作电位的消失时间随盐液渗透压增加而明显提前,但Ｃ纤维动作电位的消失是可逆的;（３）Ａ和Ｃ类纤维比较,Ｃ纤维动作电位幅度较低,传导速度较慢,但高渗盐液作用后动作电位消失时间却明显短于Ａ纤维。以上结     

广西青天葵野生资源现状

以走访调查和实地调查相结合的方法对青天葵野生资源在广西的分布、药材品种、群落特征、资源蕴藏量等情况进行了调查。结果表明:青天葵在广西主要分布在石灰岩地区,其药材品种按商品规格分为小叶和大叶2种,小叶青天葵为该文的调查对象毛唇芋兰,大叶青天葵为同属植物毛叶青天葵,亦当作青天葵出售和使用;青天葵生长群落结构在不同产区略有差异;由于人为过度采挖和生态环境条件的变化,广西青天葵野生资源的分布面积逐年减缩,蕴藏量急剧减少。经调查,广西青天葵野生资源蕴藏量(鲜品)仅为4 815 kg。建议采取各种积极的措施保护青天葵野生资源,保证青天葵的可持续利用。     

微卫星DNA在吉戎兔亲子鉴定中的应用研究

选用Sat2、Sat3、Sat4、Sat5、Sat7、Sat8、Sat12、Sat13、Sat16、Sol08、Sol28、Sol30、Sol03 等13个微卫星位点PCR扩增30只吉戎兔的基因组DNA,然后在8%聚丙烯酰胺凝胶上电泳分型,检测结果为平均等位基因数为3.46个,平均杂合度（H）为0.578,平均多态信息含量（PIC）为0.531,双亲资料未知时13个位点的累计非父排除率（PE1）为0.935226,置信度低于80%,一亲本资料已知时13个位点的累计非父排除率（PE2）为0.999329,置信度为95%。由于所鉴定兔群的母本资料已知,因此基因型的分型结果能有效确认18只仔兔子的真父。     

2012年第3期《遗传》封面说明

2006年,日本京都大学的Yamanaka研究组在《Cell》上率先报道了利用逆转录病毒感染技术,把转录因子Oct3/4、Sox2、Klf4和cMyc导入胚胎或成年小鼠的成纤维细胞中,诱导出与胚胎干细胞极为相似的多能性干细胞,并将其命名为诱导多能性干细胞(Induced pluripotent stem cells,iPS细胞)。相较于胚胎干细胞,iPS细胞的生产不需要卵母细胞或早期胚胎细胞,因而不涉及胚胎毁损等伦理问题;此外,利用自体来源的iPS细胞进行移植治疗将可避免异体间的免疫排     

禄丰腊玛古猿

云南禄丰,过去以“恐龙之故乡”闻名世界,而今又将以“人类之摇篮”名传全球。重大的发现云南禄丰位于昆明西北60公里,在它的县城北面9公里的唐山坡上,有一个小煤窑叫石灰坝煤场,这就是禄丰腊玛古猿化石的产地。 1975年5月,禄丰县文化馆王正举同志根据当地群众的反映到石灰坝煤窑调查时,发现了一颗第三纪古猿的下臼齿化石,以及一些哺乳动物化石。这一新     

中国雉鸡减数分裂SC组型和有丝分裂染色体组型的比较研究

以微铺展-硝酸银染色技术制备中国雉鸡SC标本。电镜的定量SC组型分析表明:中国雉鸡的SG组型和有丝分裂染色体组型有良好的一致性。并对个别SC与其相应的有丝分裂染色体在长度、形态上的差异以及SC组型分析在鸟类细胞遗传学研究中的可能意义进行了讨论。     

Uncv无毛小鼠无毛基因的分子克隆及序列分析

目的 探讨Unev无毛小鼠的无毛性状与无毛基因(hairless gene,hr)的相关性.方法 参照Gen-Bank上公布的小鼠的hr序列,设计5对引物,用RT-PCR方法对本单位培育的Unev无毛小鼠hr的编码区序列进行了克隆与分析.结果 获得了Unev无毛小鼠及野生型hr的全部编码区序列(3546 bp).Unev无毛小鼠hr基因与野生型小鼠hr基因的长度及序列完全一致,同源性为100%.与GenBank上发表的国外小鼠hr基因序列(Z32675)相比,同源性为99.7%,共10个碱基发生了突变,其中2个碱基突变导致了相应的氨基酸突变;和昆明小鼠的hr(AY547391)相比,同源性为99.6%,共12个碱基发生了突变,其中3个碱基突变导致了相应的氨基酸突变;但这些突变是由种属差异造成的.结论 Uncv无毛小鼠的无毛性状产生与hr基因无关.     

洱海流域湖泊大型底栖动物群落结构及空间分布

2009年5月对洱海及其流域内的海西海、茈碧湖和西湖3个小型湖泊进行底栖动物群落结构调查,以期阐明该流域湖泊底栖动物群落结构现状及其与水环境因子关系.结果表明:洱海底栖动物密度为1556ind·m-2,生物量8.9g·m-2.主要以摇蚊、霍甫水丝蚓和萝卜螺为密度优势种,相对丰度分别为43.5%、39.5%和8.6%;生物量优势种为刻纹蚬、萝卜螺和摇蚊.GIS插值显示,洱海北部密度最高,中部沿岸区生物量最高,南部密度和生物量均较低,Shannon多样性指数以湖岸区较高.其余3个湖泊以线虫、摇蚊科、颤蚓科和幽蚊科为主,其中以茈碧湖的密度和生物量最高(260.8ind·m-2和1.14g·M-2).CCA分析表明:洱海底栖动物主要受水体TP和Ca2+浓度的影响,贡献率分别为34%和27%;西湖与洱海群落组成最相似,主要由水体中较高的TN含量引起.对比历史数据可知,洱海寡毛类和摇蚊科比例继续增加,表明湖泊有机污染进一步加重.     

双侧锁骨下静脉交替置管与单纯右侧锁骨下静脉置管血培养对比研究

目的探讨双侧锁骨下静脉交替置管与单纯右侧锁骨下静脉置管在ICU患者中的应用效果。方法将我科收治的50例患者随机分为实验组和对照组各25例,两组患者均行锁骨下静脉置管,实验组采用双侧锁骨下静脉交替置管,对照组采用传统的单纯右侧锁骨下静脉置管,观察两组患者的一次置管成功率、置管时间和术后血肿发生情况,并于置管后1、2、3、5天于穿刺口取样及拔管前取导管血、拔管后导管头端行细菌培养,比较两组细菌培养的情况。结果两组患者的一次置管成功率、置管操作时间和术后血肿发生率比较,差异有统计学意义(均P0.05);术后导管相关感染发生率比较,差异无统计学意义(P0.05)。结论双侧锁骨下静脉交替置管术的应用效果优于单纯右侧锁骨下静脉置管术。