荧光物质(MFA、MFB)的分离、结构鉴定及金华地区高产菌株的筛选

采用硅胶柱层析及制备型液相色谱仪对红曲米中两种荧光物质进行分离纯化,使用高效液相色谱法(HPLC)检测荧光物质纯度,然后使用高分辨质谱(ESI-HRMS)对两种荧光物质进行分析,得到两种荧光物质的分子量分别为356和384,ESI-MS/MS二级质谱把两者鉴定为monasfluore A (MFA)和monasfluore B (MFB);从金华地区红曲米中分离得到10株红曲菌株,经固态发酵采用HPLC法分析,筛选获得1株高产MFA、MFB的菌株WZWZ,该菌株发酵制得红曲米中MFA含量为3.63 g/kg,MFB含量为7.29 g/kg,对WZWZ菌株进行外观形态学及显微观察、ITS基因序列测定与分析,最终将菌株WZWZ鉴定为紫色红曲霉(Monascus purpureus)。     

介绍一个半微量单向混合白细胞培养方法

人类混合白细胞的反应,主要受控于组织 相容性复合体HLA中的D区基因^[3]o D区基 因产物在器官移植中起重要作用,并直接参与 T淋巴细胞的激活和免疫调节^[6]。运用同位素 掺人技术作混合白细胞培养（MLC）比培养后 作形态计数,能更有效地以淋巴细胞的增殖强 度来判别这些基因产物的个体差异。目前国外 所采用的微量技术需要配备半自动细胞收集器 及其它微量设备^[4],国内一时还难以普遍运用。 为此我们采用国产塑料小管,以常规技术发展 了一个相应的半微量单向混合白细胞培养方 法,发现利用最适条件并作倾斜培养使细胞充 分接触,能够提高实验系统的分辨力,从而有可 能缩短培养时间,以利尽快检测出不同遗传背 景个体间反应性的差异。     

CRISPR/Cas9系统在疾病研究和治疗中的应用

基因组编辑技术(Genome editing technology)是一种通过人工手段在基因组水平对DNA序列进行改造的遗传操作技术,包括特定DNA片段的插入、敲除、替换和点突变.其中,依赖核酸酶的基因组编辑技术的基本原理是在基因组的特定位置产生双链DNA断裂(Double-stranded break,DSB)后通过...     

不同水稻种质在不同生育期耐盐鉴定的差异

以21份水稻(Oryza sativa)种质为材料,用1.5%Na Cl处理种子8天后测定发芽率。在苗期用不同浓度NaCl水培处理10天,测定叶片死亡率等指标和高亲和性K+转运基因(HKT)家族变异。在成株期选3份种质,用不同浓度NaCl盆栽处理,在开花期和籽粒蜡熟期测定植株可溶性糖和生物量等指标,以明确各种质不同生育期的耐盐差异和关键指标。结果表明,在NaCl胁迫下,种子发芽率受到显著影响。苗期盐胁迫后,各种质的平均叶片死亡率变幅最大。在被鉴定的8个耐盐种质中,HKT家族的7个基因除OsHKT2;4外均存在。在≤1 g·kg–1盐胁迫下植株可溶性糖含量表现出刺激增长效应。CG15R单株生物量与盐浓度呈正相关,且随盐浓度的增加而缓慢增长。在≤1 g·kg–1时,中花9号的生物量随盐浓度的增加而增加。水稻耐盐性具有明显的阶段发育特异性,且不同发育阶段的耐盐性之间无相关性。叶片死亡率与蜡熟期生物量可分别作为苗期和成株期耐盐鉴定的关键指标。CG15R可作为高耐盐种质进行深入分析和利用。     

L-赖氨酸产生菌FH128菌株的研究(Ⅰ)FH128菌株的选育及摇瓶发酵

以赖氨酸产生菌Ａ１１１（ＨＳ－、ＡＥＣｒ）为出发株,经化学诱变剂ＭＮＮＧ（Ｎ－甲基－Ｎ′－硝基－Ｎ－亚硝基胍）及单氟醋酸处理获得单氟醋酸抗性突变株Ｆ７９,摇瓶发酵产Ｌ－赖氨酸盐酸盐７．０％～７．５％,对糖转化率３８％～４０％,分别比Ａ１１１株提高约２５％及２０％。然后,再以Ｆ７９菌为亲株经ＭＮＮＧ及噻唑丙氨酸处理获得噻唑丙氨酸抗性突变株ＦＨ１２８,在适宜的培养条件下,摇瓶发酵产Ｌ－赖氨酸盐酸盐８．５％～９．５％,最高产酸率１１％,对糖转化率４５％～５０％。在１６Ｌ自控发酵罐发酵,产Ｌ－赖氨酸盐酸盐１２％～１４％,对糖转化率４０％～４５％;在２０～１００ｍ３发酵罐发酵,产酸率为８．５％～９．５％,对糖转化率４０％～４２％,提取总收率８０％～８５％,成品（饲料级Ｌ－赖氨酸盐酸盐）质量符合国家标准（ＧＢ８２４５－８７）。ＦＨ１２８菌株遗传性能稳定,营养要求粗放,工艺较简单,便于工业化,二年前已应用于工业生产。     

吸入性速发型青霉素过敏反应1例

吸入性速发型青霉素过敏反应１例段丽君张立新富伟沈阳军区总医院北陵医院内科（１１００３１）患者：女性,５３岁,因冠心病入院,既往有青霉素高度过敏史,有因他人的青霉素液溅入角膜致过敏性休克史,入院时患者血压２０／１２ＫＰａ,入院当日下午１３：３０分,患者...     

在蛙胚切片中应用正丁醇透明和苏木精整染的方法介绍

在教学上,常用蛙卵做脊椎动物发生的观察材料。由于蛙胚切片染色方法繁琐,卵黄易破碎,往往得不到满意的切片,因此,我采用正丁醇脱水,取得较满意的效果。这种方法的优点有二:(1)能与水、酒精及石蜡互溶,故脱水之后可不经过二甲苯透明而直接进行石蜡浸透包埋。(2)脱水时很少引起组织收缩和变脆。采用苏木精-伊红整染,其特点是颜色鲜艳,无过染现象。 1.取材于3—5月到郊外池塘或稻田采集材料(蟾蜍或青蛙卵),一般在上午八时左右采集,此时的蛙胚处于囊胚期,以后各期可在双筒解剖镜下进行鉴别,选择所需的发育时期的胚胎,分别进行固定。 2.固定用Tellyesniczky氏液(重铬酸钾0.5克、冰     

红霉菌种保存及制片方法的改良

链孢霉（ＮｅｕｒｏｓｐｏｒａＣｒａｓａ））属真菌的子囊菌纲。其个体小,生长迅速,易于在简单的化学培养基上生长,便于培养,后代能产生较大的群体。它还具有象高等生物那样的染色体,尤其是它的无性世代是单倍体,不论显性或隐性基因都可以从表型上直接表现出来,便...     

多通道流动电泳技术及其在蛋白质、酶和抗体纯化中的应用研究

提出一种新型制备电泳方法即多通道流动电动电泳技术,建立了微机控制的电泳设备,考查了操作条件对设备分离效率的影响。应用该技术进行牛血清清蛋白(BSA)-牛血红蛋白(HBB)混合物的连续分离,每小时从含BSA、HBB备37．Omg的蛋白质混合物中分离出13．6mg的BSA和20．Omg的HBB。应用该技术进行尿激酶粗品的纯化,可将其比活力由4 000IU／mg提高到4×10⁴IU／mg以上．产量在10×10⁴IU／h以上。将该技术与(NH₄)SO- 沉淀方法结合,从15ml免疫鼠血清中分离出12．5mg高纯度尿激酶抗体IgG,产量为2．1mg／h。上述结果证明多通道流动电泳技术其有分离速度快、精度高和可操作性好等优点,在生物产品分离领域中具有广阔的应用前景。     

一株牛源阿卡斑病毒的分离鉴定

阿卡斑病毒(Akabane virus,AKV)是能引起牛、绵羊、山羊流产、早产、新生胎儿畸形的虫媒性RNA病毒。为了解家畜虫媒病毒在我国西南边境地区的分布和流行情况,本研究对中缅边境西盟县的52份牛抗凝血和140份血清(牛70份、羊70份)中的蓝舌病病毒(Bluetongue virus,BTV)、鹿流行性出血热病毒(Epizootic hemorrhagic disease virus,EHDV)、AKV等虫媒病毒进行检测与分离,通过ELISA及qRT-PCR方法检测病毒,通过核酸阳性抗凝血接种BHK细胞传代以分离病毒,通过设计特异性引物,扩增分离毒株S基因721bp片段及M基因816bp片段,通过克隆测序及中和试验以鉴定病毒,最终从38号牛的抗凝血中分离到一株AKV,TCID50为10-3.5/0.1mL,经比对,分离株S片段与日本KS-2/Mo/06毒株亲缘关系最近,核苷酸同源性为97.66%,M片段与中国DHL10M110毒株亲缘关系最近,核苷酸同源性为96.56%。本研究首次报告了从云南边境地区牛群中分离到AKV,证实了西南边境存在AKV的流行,为AKV在我国的流行病学和边境地区疫病风险防控提供了重要参考及有力依据。