玉米根冠脱落细胞中微丝分布的荧光显微观察（简报）

The detached root cap cells from maize seedlings comprised of round-shaped cells, ellipse-shaped cells and longitude-shaped cells. By using fluorescein-iso-thiocyanate-phalloidin(FITC-Ph) as fluorescent probe and treatment with cytochalasin B (CB) or HMC toxin, a host-specific toxin from Bipolaris (Helminthosporium) maydis race C, the distribution and variation of microfilaments (MFs) in detached cells were investigated. The results were as follows (i) the round-shaped cells had intense fluorescence, but the network of MFs was not distinct. There was clear MFs network in the cytoplasm of both ellipse-shaped and longitude-shaped cells. The distribution of MFs in detached cells seemed to be relevant to their shape and vigor. (ii) the fluorescence of detached cells of Charrua cytoplasmic male sterility(cms-C) maize was decreased after treatment with HMC-toxin. The cause of this outcome was unclear. We only obtained the pictures of the distorted protoplast membrane and dead cells owing to treatment with HMC-toxin. The distribution of MFs of detached cells of Normal(N) cytoplasmic maize was not affected by HMC-toxin, and their protoplasts shank slightly. (iii) CB could change the distribution of MFs in detached cells of both cms-C maize and N maize to disordered arrangement.     

水稻黑条矮缩病毒第九号基因片段的克隆和表达

应用RTPCR技术从表现玉米粗缩病症状的玉米叶片中分离克隆了水稻黑条矮缩病毒(Rice blackstreaked dwarf virus, RBSDV)的第九号片段S9(GenBank登录号 AF540976),并测定了全序列。将该片段的第一个开放读码框(S91)在原核表达载体pET21d中进行了高效表达,表达产物进行N 端氨基酸序列测定,与理论推测的序列完全一致。将表达产物纯化后制备了抗体,经Western blotting从感病玉米叶片中检测到了该蛋白。     

初中"生态系统及其组成"一节教学设计

创设问题情境在探究中形成生态系统的概念.通过合作学习,应用旧知识在新情境下分析解决新问题形成生态系统组成的有关概念.通过合作学习,应用概念图策略展示对概念理解的深度和广度,及时进行评价、反馈、矫正.在学习过程中获得重要的生物学概念,培养学生合作交流能力、分析问题解决问题的思维能力、应用有效的学习策略进行梳理知识、自我评价和反思的能力.     

黄喉拟水龟产卵行为的观察

在人工环境条件下对黄喉拟水龟(Mauremys mutica)的产卵行为进行了观察,统计了6年的气温与产卵情况,发现每年2～4月平均气温之和与4月份的产卵量正相关(P＜0.05),2～4月的气温决定了每年初始产卵的提前或推后.观察了黄喉拟水龟的产卵行为,发现其产卵巢址通常选择在高出产卵场平面(36.378±7.140)cm(n=30)的地方.根据黄喉拟水龟产卵过程的固有行为特征,将其整个产卵过程分为六期:第Ⅰ期选巢、第Ⅱ期挖掩体、第Ⅲ期掘巢穴、第Ⅳ期产卵、第Ⅴ期盖巢穴和第Ⅵ期回水体.对产卵过程各期时间与窝卵数线性回归分析表明:第Ⅰ期、第Ⅱ期、第Ⅲ期、第Ⅴ期、第Ⅵ期及整个产卵过程所需时间均与窝卵数无关;而第Ⅳ期产卵时间与窝卵数呈显著正相关.揭示了窝卵数越少,母龟在产卵场消耗的能量对应于投入到每一枚卵的能量就越多;而窝卵数越多,则恰好相反.     

脂肪因子visfatin的调节与功能多样性

内脏脂肪素(visfatin)是一种由内脏脂肪细胞分泌的分子质量为52 ku的蛋白质细胞因子．基因序列分析显示其cDNA编码序列与前B细胞集落增强因子(PBEF)同源且在进化中高度保守．Visfatin被发现具有多种迥然不同的生物活性：通过与胰岛素受体相互作用,在不同的情况下visfatin可表现出类胰岛素或抗胰岛素样作用;在细胞质中,visfatin具有烟酰胺磷酸核糖转移酶(Nampt)活性,能够催化烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)的生物合成;作为分泌型的细胞因子,visfatin还可以诱导多种炎性因子的表达,如TNFα、IL-1β和IL-6．Visfatin与一些代谢疾病和急、慢性炎性疾病的关系日益受到重视,如糖尿病、肥胖、急性肺损伤、类风湿性关节炎、败血症、心肌梗塞和炎性肠病等．最近,对visfatin的启动子区及其单核苷酸多态性(SNP)的研究,进一步深化了人们对其在疾病发病机制中作用的认识．重点讨论visfatin的结构、功能多态性以及它与多种疾病的关系．     

紫荣莉的花部综合特征与繁育系统

采用定株观察,运用花粉-胚珠比、联苯胺-过氧化氢法、杂交指数和套袋实验等方法,对紫茉莉（Mirabilis jalapa L．）的开花状态及繁育系统进行了研究。结果表明：种群花期一般为6—10月,单花花期一般为2—3d;单花花期依其形态和散粉时间可分为散粉前期、散粉初期、散粉盛期、花闭合期、凋谢期5个时期;在花闭合时期,晴天有66．80％的花的柱头在闭合花冠内,阴天时有81．65％的花的柱头在闭合花冠内,雨天柱头在闭合花冠内的花可达99．22％;按照杂交指数,其繁育系统属于自交亲和,有时需要传粉者;P／O值约为269,判断繁育系统类型属于兼性自交;开花6h左右,柱头的可授性最强,此时花粉活力、置落在柱头上的花粉数及其在柱头上的萌发率都达到最高。套袋实验显示,紫茉莉自然条件下没有无融合现象,繁育系统为自交、异交亲和,以自交为主,但有时也需要传粉者;在长期的环境选择压力下,紫荣莉选择将更多的柱头留在闭合花冠内,是其对不利环境条件的一种适应进化策略。     

野生及笼养猕猴SV40T抗原基因检测方法的建立

目的建立猴外周血单核细胞SV40DNA的PCR检测方法,对猕猴SV40T抗原基因进行检测。方法使用PCR方法对分别来自野外（云南宁蒗71只、景东60只）及笼养猕猴（64只）的SV40大T抗原基因进行检测,同时对扩增出的阳性结果进行测序。结果在195份样本中,有4只来自野生猴样本扩增出SV40大T抗原基因（3．1％,4／131）,1只来自笼养猴样本扩增出SV40大T抗原基因（1．6％,1／64）。测序结果显示：猴血样本扩增片段序列与GenBank中的SV40大T抗原C-末端的基因序列片段有15个核苷酸不同（3．3％差异）,与SV40．776标准株的序列基本一致,但SV40—776在nt3020处有一缺口。结论云南野生及笼养猕猴猴群均能检出SV40T抗原基因。因此建立SV40病毒的DNA检测技术,对用于科研及疫苗生产的实验猕猴的病毒学质量控制具有重要意义。     

中日实验动物科技发展之比较

实验动物科技包括科学与技术两个方面,实验动物学是以实验动物为对象,专门研究实验动物的遗传育种、饲养繁殖、质量监测和开发应用的科学,这是一门多学科、综合性新兴边缘学科;而实验动物技术则是实验动物学形成与发展的方法学或手段。两者相辅相存,互为依托,是密不可分的一个整体。日本实验动物科技经过几十年的稳定发展,     

猕猴结核分枝杆菌PCR检测方法的建立与初步应用

目的建立猕猴结核分枝杆菌PCR快速检测方法。方法根据GenBank中报道的人型结核分枝杆菌标准株H37RV全基因序列,针对其中致病性结核分枝杆菌所特有的保守区域ESAT-6设计一对引物进行TouchdownPCR反应,利用此方法对100份野生来源猕猴全血标本进行检测,并与传统的PPD实验和咽拭子抗酸染色实验结果作比对。结果抽取33份野生来源猕猴的外周血,提取DNA进行扩增,扩增片段经纯化、回收克隆测序后用BLAST软件进行同源性对比,与GenBank中报道的序列基本相同,检测标本中有4份（4／33）为阳性,其中3份（3／33）标本与结核菌素试验和咽拭子抗酸染色试验结果相符合。结论建立了从猴全血中直接检测猴结核分枝杆菌DNA的TouchdownPCR方法,具有敏感性和特异性高,且简便的优点。     

血细胞分离机大量采集实验猕猴外周血单核细胞方法探讨

目的使用COBE Spectra血液成分分离机大量采集实验猕猴外周血单核细胞（PBMCs）,继而可从中分离得到外周血造血干细胞（PBSC）,为进一步利用猕猴开展免疫学研究、基因治疗提供足够的目的细胞,探讨采集的关键技术,建立安全、有效的采集方法。方法体重为4～5 kg的实验猕猴5只,采集前一个月内分3次进行自体或异体血液于4℃储备共120 mL,用于采集时填充管路。5只猴采集前接受rhGM-CSF 20μg/kg皮下注射动员4～5 d,麻醉动物后行股动脉穿刺,选择自动外周血干细胞收集程序（Auto-PBSC）进行采集。采集结束后管路中血液以10 mL/min回输给动物3～5 min。结果生长因子连续注射第4天外周血白细胞数增至最高,收获细胞数量随循环血量和采集次数增加而增多。经动员的所有猴能够采集到需要的PBMC,最多达9.9×108,采集次数1～3次,循环血量达750～1420 mL,实验结束后1只猕猴因心脏衰竭死亡。结论人用血细胞分离机可用于4～5 kg实验猕猴PBMC的大量采集。由于动物不同于人体,为保证采集成功需要选用适合于猕猴的程序,采集前做好储血和生长因子动员准备,稳定的麻醉保定,提高抗凝剂比例,积极处理并发症是关键。