羊痘病毒P32基因真核表达载体的构建、表达及其免疫原性

通过PCR方法扩增全长P32基因和截去跨膜区的P32基因(MP32),将其分别克隆到真核表达载体pcDNA3.1( )和已插入CpG序列的pcDNA3.1-CpG中,构建pcDNA3.1-P32、pcDNA3.1-CpG-P32和pcDNA3.1-CpG-MP32质粒;用脂质体法转染BHK-21细胞,通过间接免疫荧光(IFA)试验验证其表达效果;经肌肉免疫注射健康BALB/c小鼠,用间接ELISA法检测抗体;在免疫后的第3、5周取免疫小鼠的脾细胞,用流式细胞仪检测CD4 和CD8 T细胞亚群.结果所构建的真核表达载体在BHK-21细胞中都能表达P32蛋白;免疫小鼠血清在免疫第2周后均能检测到羊痘特异性IgG抗体;免疫组小鼠脾脏CD4 T细胞数目和CD4 /CD8 T细胞比值明显高于对照组.结果提示,所构建的真核载体可诱导小鼠产生特异性体液免疫应答,并能刺激小鼠产生较强的细胞免疫应答.     

浙北马尾松人工林鸟类捕食松毛虫幼虫的研究

对浙北马尾松人工林的鸟类区系及数量动态以及鸟类捕食松毛虫幼虫进行了实验观察。松毛虫可按季节分为三个世代阶段,各世代阶段的种群密度波动较大,而相应的鸟类平均密度却较稳定。利用防鸟围网采用样方对照法调查鸟类捕食松毛虫幼虫的作用,4至9月鸟类移走实验虫数的4.7—22.2％。但不同时期,不同地块鸟类的捕食作用不同。     

“一枝好”育发液促进毛发生长及机制探讨

目的:考察利用新疆维吾尔族传统药物研制成的"一枝好"育发液促进毛发生长的效果,并探讨其可能的作用机制。方法:采用硫化钠溶液建立昆明小鼠化学性脱发实验模型,将30只昆明小鼠随机分为实验组、阳性对照组(章光101育发剂)、空白对照组,以毛发评分、毛长、毛重以及毛囊数为指标,考察小鼠新生毛发生长情况。对脱毛后21天的脱毛区皮肤毛长、毛重、毛囊数进行测量和统计分析。并利用MTT法初步探讨"一枝好"育发液对人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)增殖的影响。结果:实验组脱毛区体毛生长评分及毛长,与空白对照组差异显著,并且略高于阳性对照组。对小鼠毛重与毛囊数的统计结果显示,与空白对照组和阳性对照组相比,实验组均有显著性差异(P0.01,P0.001)。"一枝好"育发液能够促进人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)增殖。结论:利用新疆维吾尔族传统药物研制成的"一枝好"育发液,能够显著促进小鼠毛发生长,初步推断其作用机制与促进毛囊生长和促进血管内皮细胞增殖有关。     

骶神经电刺激对急性脊髓损伤大鼠肠黏膜免疫屏障功能的影响

目的:观察骶神经根电刺激对急性完全性脊髓损伤大鼠肠黏膜免疫屏障功能的影响。方法:56只Wistar大鼠分为正常组(SG=8只)、脊髓损伤组(CG=24只)和骶神经电刺激组(EG=24只)。CG、EG (分别设24、48和72 h组,8只/组)。CG、EG大鼠均于全麻下用Fehlings法98 g动脉瘤夹横行钳夹行脊髓损伤并植入骶神经刺激电于右侧骶3神经孔。CG不进行干预,EG行骶神经电刺激。刺激参数:电压4 V,波宽210μs,频率15 Hz,刺激10s,间歇20 s。每次持续10 min,间歇10 min,共2 h。早8:00-10:00,晚6:00-8:00两次。分组采集标本,进行HE染色光镜、透射电镜组织学观察、Western blot方法检测组织锌指蛋白A20、NOD2和CD68蛋白表达量。结果:(1)肠道形态学观察:光镜和电镜观察脊髓损伤后黏膜结构破坏明显,肠腔细菌和杂质进入破损的肠黏膜上皮细胞、M细胞和经细胞间连接缝隙进入黏膜下,引起局部炎症反应;经电刺激后均有了很大程度改善。(2)锌指蛋白A20:与SG相比,CG各小组A20表达均明显降低(P<0.01);与SG、C...     

迷走传入的投射区在电刺激颈走神经中枢端引起的降压反应中的作用

文献报道迷走传入直接或间接投射至多个脑丘。本工作分别检验这些脑区在迷走传入引起的降压,降心率反应中的作用。在乌拉坦麻醉、双侧切断颈迷走神经的大鼠,将普鲁卡因微量注入孤束核β－内啡肽抗血清注入延髓头端腹外测区均可明显减小电刺激颈迷走神经中枢引起的降压和降心率反应,但分别将心得安,β－内啡肽抗血清注入室旁核或普鲁卡因注入最后区对Ｄｐｖ和心率减慢反应均无明显影响,保留右侧颈迷走神经的大鼠,在甲基阿托品（     

应用RAPD技术分析奥利亚罗非鱼和尼罗罗非鱼的基因多态性

以随机扩增多态DNA技术(RAPD）分析了奥利亚罗非鱼和尼罗罗非鱼两个养殖群体的群体内及群体间遗传关系,并探讨了该技术在种群鉴定中的应用。RAPD引物筛选结果表明,所测试的20个随机引物中(Table 1),除一个引物未扩增出任何片段外,其余19个引物均扩增出1～11个大小不等的片段,长度大部分在500—3000bp之间,共扩增出220个片段,平均每个引物产生55个片段。两群体间共有片段70条,大部分引物的扩增产物具有种间多态性,种群间相似系数为0.727。以筛选的引物对两种群不同个体(Fig．1,Table 2)及种群混合样品(Fig.2,Table 3)进行RAPD分析。结果表明,不同引物在扩增图谱上表现很大差异：奥利亚罗非鱼不同个体间表现为一致的扩增图谱,种内相似系数达1000,显示了其种群内遗传变异的缺乏;尼罗罗非鱼种内相似系数为0．827,个体间存在不同程度的多态性;两个种群间的相似系数分别为0．767和0.742,表明种间有较高的同源性,遗传距离为0．235,略低于国外的报道．此外,两个养殖群体间的扩增图谱比较也暗示了遗传渐渗现象的存在。实验表明,RAPD标记可以作为一种可靠的遗传标记,用于不同鱼类种群的鉴定,RAPD分析方法是一种快速,简便且行之有鼓的鉴定鱼类种群的方法。     

信息管理系统下胸腔镜胸膜固定术治疗恶性胸腔积液

目的:分析基于信息管理系统的胸腔镜滑石粉胸膜固定术控制恶性胸腔积液患者术后的并发症,死亡率及生存时间。方法:2011年9月至2014年10月,一共400个患者完成了胸腔镜辅下滑石粉胸膜固定术。对手术前后的患者的并发症,死亡率,成功率和中位生存时间进行评价。结果:中位随访时间为40个月(范围4-61月)。所有患者的呼吸困难症状都得到明显缓解。围手术期死亡率为0。患者对这一手术的耐受性良好,没有观察到明显的副作用。院内死亡率为2%,胸膜固定的成功率为85%。较差的KS评分及胸腔积液诊断到完成胸膜固定术之间的时间延误与院内死亡的发生明显相关。乳腺癌的生存情况最好,其次为卵巢癌,淋巴瘤和胸膜间皮瘤。结论:胸腔镜滑石粉胸膜固定术是一项安全有效的操作,胸膜固定的成功率较高,呼吸困难会能够得到长期有效的控制。     

双抗体免疫技术分离豚鼠肝白蛋白mRNA及其翻译特性的研究

从真核细胞中分离特定的mRNA对于基因表达的调控、基因分离及结构功能的研究是重要的手段。至今从不同种属的动、植物组织中已分离出大约近三十种mRNA,所选用的材料大部分是只能或主要是合成单一蛋白的系统,从这些组织中抽提mRNA较为容易,既可以从组织中直接分离,又可在得到多核蛋白体后按常规提纯。然而,在分离组织中含量少的mRNA时就遇到困难,近年来发展起来的双抗体免疫沉淀技术,相当好地     

牙髓紫卟啉菌内毒素对炎症性细胞因子的介导作用

牙髓紫叶琳菌ＡＴＣＣ３５４０６是近年来新发现的重要致病性专性厌氧菌,采用改良酚－氯仿－石油醚法提取牙髓紫卟啉菌ＡＴＣＣ３５４０６内毒素脂多糖,通过Ｋｒａｍｅｒ测定法、软琼脂细胞培养法以及胸腺细胞增殖法测定脂多糖的细胞生物学活性。结果显示：纯化脂多糖可不同程度地诱导小鼠模型生成肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）、集落刺激因子（ＣＳＦ）和白介素－１（ＩＬ－１）,并在一定范围内呈剂量依赖型,提示牙髓紫卟啉菌内毒素在动物模型和细胞模型中具有显著的细胞生物学和免疫学活性．     

基于遥感技术的森林健康研究综述

遥感技术可以有效完成复杂时空尺度海量信息的收集处理,其与森林健康研究的交叉、融合大大提高了复杂时空尺度上森林健康研究的表达能力.目前,森林健康遥感研究正处于各学科交叉、融合、调整,由静态向动态、单一向复杂、零散向系统转变的关键发展时期,但缺乏对森林健康问题的全面考量、逻辑安排和系统的顶层设计.在把握森林健康活力、组织结构和恢复力核心理念的基础上,从森林资源调查、森林生态功能评估、森林健康风险控制和森林植被参数提取四个方面构建和丰富基于遥感技术森林健康研究体系,对国内外森林健康遥感研究进行综述.通过对以上研究内容的总结分析,明确基于遥感技术的森林健康研究各领域的研究进展,及其在理论、技术和应用方面的不足.分析认为:(1)未来应加强森林生态和遥感技术重大基础理论研究,以明确森林结构、过程、功能与遥感数据之间的耦合关系;(2)发展完善新型遥感技术、遥感数据解译算法与软件工具,提高遥感数据的精确度、利用率和利用效率;(3)提升森林健康遥感研究成果的科技转化水平,推进快速分析评价与辅助决策功能研究,指导相关森林健康经营活动和科学研究的开展,以及林业政策的制定.