酿酒酵母二腺苷四磷酸磷酸解酶Ⅰ片段的表达、纯化及晶体培养研究

[目的]为了培养用于X-衍射的酿酒酵母二腺苷四磷酸磷酸解酶Ⅰ的蛋白晶体,为研究该酶的三维结构和功能打下基础;[方法]构建了表达酿酒酵母二腺苷四磷酸磷酸解酶Ⅰ片段(Apaldn16)的表达质粒,用核苷酸序列分析证明了克隆片段的正确性.将重组载体转化大肠杆菌表达菌株BL21(DE3),经.IPTG诱导后,用SDS-PAGE检测了蛋白的表达情况.将粗蛋白用Ni-NTA亲和层析分离,收集组分进一步用Superdex 75分子筛纯化.纯化后的蛋白用SDS-PAGE和质谱检验其纯度和正确性,然后用悬滴气相扩散法进行了蛋白结晶条件的初筛.[结果]成功地用大肠杆菌可溶性地高效表达了Apaldn16蛋白.得到了分子量约为36 kD的单一蛋白条带,纯度在95%以上.质谱结果证明该蛋白纯度高,分子量正确.将纯化后的蛋白用悬滴气相扩散法进行晶体初筛,得到了针状簇晶.此晶体经SDS-PAGE检测,证明为Apaldn16蛋白晶体.[结论]利用大肠杆菌高效表达体系可以正确表达Apalan16蛋白,蛋白经过纯化后,用悬滴气相扩散法可以生长出针状晶体,适合于进一步的三维结构研究.     

YAC介导的天蚕丝素基因向家蚕的转移──天蚕丝素基因-YAC克隆在家蚕的表达

本文为天蚕Antheraeyamamai丝素基因在家蚕Bombyxmori成功表达的首次报道。我们构建了天蚕丝素基因的YAC克隆,然后把含有该克隆的DNA溶液导入家蚕受精卵。分子杂交实验证明天蚕丝素基因已整合到家蚕基因组中。通过丝心蛋白氨基酸组分分析以及茧丝的溶解性比较,发现有部分转基因家委表达了天蚕丝素基因。F2代的转基因家蚕蛾的染色体DNA中同时还存在YAC序列,说明YAC对丝素基因具有介导作用。天蚕丝素基因以单拷贝形式存在于转基因家蚕中。     

鼎湖山森林凋落物量及营养元素含量研究

 本文研究了鼎湖山南亚热带常绿阔叶林和针叶林的凋落物量及凋落物中主要营养元素(N、P、K、Ca、Mg)的含量。8年的测定结果表明,两个森林类型的年均凋落物量(t·ha-1)及凋落物中主要营养元素的含量(t·ha-1·yr-1)分别为：常绿阔叶林9.056,0.220;针叶林2.695,0.032。凋落物中叶、枝和花果的百分组成及凋落特征各异。鼎湖山南亚热带常绿阔叶林的年均凋落物量低于热带雨林而高于暖温带落叶阔叶林,说明不同气候带的森林类型,其凋落物量是有差异的。与针叶林相比较,常绿阔叶林的凋落物量较大,凋落物中主要营养元素的含量较高,凋落物的分解速率也较快,因此从提高森林的质量和增强森林的生态效益来考虑,在造林绿化上应提倡多营造常绿阔叶林或针阔叶混交林。     

蛭弧菌类菌株JU-PX1的生物学特性和16S rDNA序列分析

[目的]研究蛭弧菌类菌株JU-PX1的噬菌特性、形态特征,并分析16S rDNA序列从而对其进行种属鉴定.[方法]采用双层平板法和三角瓶培养法研究蛭弧菌类菌株JU-PX1的噬菌特性,通过光镜和电镜观察其形态,利用16S rDNA序列的蛭弧菌类特异性引物以及细菌通用引物进行PCR扩增.[结果]JU-PX1对10株宿主菌中的6株具有噬菌作用,特别对大肠杆菌和副溶血弧菌侵噬能力较强.菌体呈弧状或杆状,单极鞭毛,大小为(0.2-0.5) μm×(0.8-1.2) μm,在其增殖阶段也有长约3.2 μm的较长个体.扩增后分别获得了一段长为831 bp和1 515 bp的DNA序列,进一步通过NCBI BLAST和MEGA 5.10等软件分析并构建了系统发育树.[结论]蛭弧菌类菌株JU-PX1属于噬菌弧菌属(Bacteriovorax),与海岸噬菌弧菌(Bv.litoralis)亲缘关系最近,两者的16S rDNA序列相似性为93％.     

术前经直肠腔内三维超声诊断复杂性肛瘘内口、分型的临床价值及对手术疗效的影响

摘要 目的：探讨术前经直肠腔内三维超声诊断复杂性肛瘘内口、分型的临床价值及对手术疗效的影响。方法：选择2021年1月至2022年6月我院收治拟行手术治疗的复杂性肛瘘患者84例,按照数字随机法分为研究组和对照组,每组42例。对照组术前行经直肠腔内常规超声检查,研究组术前行经直肠腔内三维超声检查。比较两组肛瘘内口术前诊断准确率、Parks分型检出准确率、手术疗效、住院时间、创口愈合时间,术前与术后肛门功能、术后并发症发生情况及复发率。结果：研究组肛瘘内口术前诊断准确率显著高于对照组（P<0.05）。研究组括约肌间型、经括约肌型、括约肌上型、括约肌外型术前诊断准确率显著高于对照组（P<0.05）。研究组治愈率为66.67%,显著高于对照组的42.86%（P<0.05）。研究组患者术后6个月肛门失禁Wexner 评分均显著低于对照组（P<0.05）,研究组患者住院时间、创面愈合时间均短于对照组（P<0.05）。两组术后并发症发生率、6个月内复发率比较无统计学差异（P>0.05）。结论：经直肠腔内三维超声诊断能够准确诊断肛瘘内口、瘘管走行,有利于提升复杂性肛瘘总体治疗效果,保护肛门功能。     

基于主成分分析的随机森林视网膜OCT图像分层算法研究

视网膜是层状结构,临床上可以根据视网膜层厚度改变对一些疾病进行预测和诊断.为了快速且准确地分割出视网膜的不同层带,本论文提出一种基于主成分分析的随机森林视网膜光学相干断层扫描技术(optical coherence tomography,OCT)图像分层算法.该方法使用主成分分析(principal component analysis,PCA)法对随机森林采集到的特征进行重采样,保留重采样后权重大的特征信息维度,从而消除特征维度间的关联性和信息冗余.结果表明,总特征维度在29维的情况下,保留前18维度训练速度提高了23.20%,14维度训练速度提高了42.38%,而对图像分割精度方面影响较小,实验表明该方法有效地提高了算法的效率.     

水稻品种种性研究 V。水稻优质品种主要性状的遗传参数与选择的关系

为改善人民生活和适应国际市场的需要， 稻米品质改良已引起重视。为了了解华南地区 现有水稻优质品种主要性状的遗传趋势，本试 验于1982-1983年以35和41个水稻优质品 种研究12个性状的一些遗传参数，以期为品质 育种在选择上提供参考。     

豚鼠胆囊内CGRP免疫反应阳性神经纤维的分布特点

应用免疫组织化学ＡＢＣ法，研究了降钙素基因相关肽（ＣＧＲＰ）免疫反应阳性神经纤维在豚鼠胆囊内的分布及分布特点。结果表明：胆囊内有较丰富的ＣＧＲＰ免疫反应阳性神经纤维，它们多呈念珠状膨大，在血管壁内及血管周围区域数量较多。胆囊颈部和胆囊管ＣＧＲＰ免疫反应阳性神经纤维的分布多于胆囊底部和体部。提示ＣＧＲＰ对胆囊的功能有调节作用。