蛇毒纤溶酶原激活剂TSV-PA在昆虫细胞中的表达

将蛇毒TSV PA基因插入昆虫杆状病毒供体质粒pFastBacHTa中 ,在粉纹夜蛾Tn 5B1 4细胞中进行表达。SDS PAGE分析结果表明 ,表达产物为分子量 33kD的TSV PA蛋白 ,Western印迹分析也证实了此结果。酶活力测定结果表明 ,昆虫细胞表达的TSV PA蛋白具有较高活性     

冰川水和白雪茶提取物延缓人真皮成纤维细胞衰老的实验研究

本文主要研究了冰川水和白雪茶提取物对正常人真皮成纤维细胞的抗衰老作用及其潜在的机制。用冰川水和白雪茶提取物处理正常人真皮成纤维细胞,检测了不同处理对细胞活性、细胞外基质成分及其水解酶表达水平的影响。结果显示,冰川水和白雪茶提取物可以提高人真皮成纤维细胞的增殖活性和能量代谢水平,促进透明质酸和弹性蛋白的表达;此外,白雪茶提取物还可以促进I型胶原蛋白的表达和下调弹性蛋白酶的mRNA表达水平;两者共同作用时影响更显著。以上研究表明,冰川水和白雪茶提取物有延缓皮肤衰老的作用,作用机制与两者可增强成纤维细胞活力,提高外基质成分的表达水平并抑制部分成分的降解有关。     

水曲柳丙二烯氧化物合成酶基因FmAOS序列与表达模式分析

茉莉酸(jasmonic acid,JA)作为一种重要的信号分子参与了植物的生长发育过程,JA生物合成途径中的关键酶为丙二烯氧化物合成酶(allene oxide synthase,AOS)。本研究克隆了水曲柳(Fraxinus mandschurica)AOS基因,命名为Fm AOS。生物信息学分析表明该基因全长1 605 bp,具有完整的开放阅读框,编码534个氨基酸。Fm AOS为两性不稳定性蛋白,不存在信号肽,具有跨膜能力,亚细胞定位预测其存在于叶绿体中。三维建模分析表明该蛋白属于混和型。Fm AOS表达模式分析表明,其响应了寒冷、Na Cl、干旱等非生物胁迫及脱落酸(ABA)、赤霉素(GA3)等植物激素信号,但表达模式各不相同,说明Fm AOS参与了植物的生长发育和逆境胁迫的平衡。本文为Fm AOS功能的深入研究提供参考。     

用不同载体在大肠杆菌中表达汉滩病毒囊膜糖蛋白G1和G2

为提高汉瘫病毒囊膜糖蛋白G1和G2的表达水平,利用两种不同的表达载体pKK223－3和pGEX－4T－1构建G1和G2的表达质粒,其中PGEX－4T－1为融合蛋白表达载体。诱导所构建的G1和G2表达质粒表达G1和G2,用表达的G1和G2免疫小白鼠诱导产生的抗汉瘫病毒特异性的间接免疫荧光抗体摘度无明显差别,从而说明表达载体对汉瘫病毒G1和G2在大肠杆菌中的表达水平影响不大,表达水平都较低。同时,利用PGEX－4T－1构建G1和G2的部分多肽的表达质粒,但表达水平较完整的G1和G2无明显提高。     

根施甜菜碱对镍胁迫下小麦幼苗生长生理的影响

以普通小麦品种‘轮选988’为材料,采用溶液培养法,研究了根施不同浓度甜菜碱(1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、10.0、15.0、20.0mmol·L~(-1))对镍(100μmol·L~(-1) NiSO_4)胁迫下小麦根系生长的影响,以及4.0mmol·L~(-1)甜菜碱处理镍胁迫幼苗根系相关抗逆生理生化指标的变化。结果表明:(1)与不施加镍对照相比,镍胁迫下小麦幼苗的根长、株高、鲜重和干重分别显著降低了14.7%、11.7%、15.0%和16.7%。(2)与单独镍胁迫处理相比,小麦幼苗的根长、株高、鲜重和干重均随着根施甜菜碱的浓度逐渐增加且呈先升后降的趋势,并以4.0mmol·L~(-1)外源甜菜碱处理效果较佳。(3)与单独镍胁迫处理相比较,在4.0mmol·L~(-1)外源甜菜碱处理下,小麦幼苗根系超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)和抗坏血酸过氧化物酶(APX)活性分别升高了284.7%、40.3%、82.9%和20.4%,超氧阴离子自由基(O-·2)含量、过氧化氢(H_2O_2)含量和丙二醛(MDA)含量分别显著降低了50.6%、38.4%和40.6%,可溶性糖含量及游离脯氨酸(Pro)含量分别显著降低了19.2%、45.4%,而根系活力大幅上升了358.0%。研究认为,根施适宜浓度外源甜菜碱可显著增强小麦幼苗根系的抗氧化能力,恢复根系活力,从而有效减弱镍胁迫对小麦幼苗生长的伤害。     

石蒜属植物生物学特性及栽培技术研究进展(综述)

综述了石蒜属植物栽培技术和繁殖方法等研究,同时,结合生产实践经验对目前石蒜属植物栽培中存在的问题进行探讨,为更加合理有效地利用石蒜属植物资源提供理论与技术依据。     

汉滩病毒核蛋白羧基端多肽原核表达载体的构建及表达

本文为建立分型检测方法,探讨了汉滩病毒(Hantaan virus,HTNV)核蛋白羧基端多肽的抗原性。首先,分别构建编码HTNV核蛋白及其羧基端多肽的原核表达载体pRSETA—S、pRSETA—S—C;然后,将其转化入表达菌BL21(DE3)pLySs诱导表达,采用SDS—PAGE、Westem—blot进行鉴定。我们成功构建了pRSET A—S及pRSETA—S—C原核表达载体。SDS-PAGE显示目的蛋白大量表达,呈不溶状态,Westem—blot显现目的蛋白具有良好的抗原性。为大量制备分型用核蛋白多肽抗原创造了条件。     

磁化黄连素药液对小鼠肠推进运动的影响

目的:探讨磁化黄连素药液对小鼠肠推进运动的影响。方法实验分未磁化药液对照组、0.1T磁化药液组及0.25T磁化药液组,分别用未磁化的炭末混悬黄连素药液、0.1T及0.25T磁化的炭末混悬黄连素药液对小鼠进行灌胃,30min后颈椎脱臼法处死小鼠,计算小鼠的肠炭末推进率。结果:磁化黄连素药液显著增加小鼠的肠炭末推进率。结论磁化黄连素药液显著促进小鼠的肠推进运动。     

磁化黄连素药液对小鼠肠推进运动的影响

目的：探讨磁化黄连素药液对小鼠肠推进运动的影响。方法 实验分未磁化药液对照组、0.1T磁化药液组及0．25T磁化药液组,分剐用未磁化的炭末混悬黄连素药液、0.1T及0.25T磁化的炭末混悬黄连素药液对小鼠进行灌胃,30min后颈椎脱臼法处死小鼠,计算小鼠的肠炭束推进率。结果：磁化黄连素药液显增加小鼠的肠炭末推进率。结论 磁化黄连素药液显促进小鼠的肠推进运动。     

短毛柽柳不同部位中总黄酮含量及稳定性研究

目的：比较短毛柽柳中不同部位总黄酮的含量差异,研究黄酮化合物保存的条件,方法：采用超声波乙醇浸提法,在正交优先的最佳条件（料液比为1∶15,超声处理时间为40min,乙醇浓度为45%,超声温度50℃,提取3次）下提取不同部位总黄酮,并测定不同条件下其吸光度的变化。结果：柽柳花、叶、茎中总黄酮得率分别为24.585mg/g、25.623mg/g、41.726mg/g,柽柳中提取的黄酮溶液在光照、高温、高浓度蔗糖溶液和Na＋存在条件下不稳定;pH 4~7条件下较稳定;氧化剂对其稳定性的影响不大。结论：柽柳茎中总黄酮含量明显高于其他两个部位。柽柳黄酮保存时应避免接触碳水化合物和盐离子,在避光、常温、中性条件下保存。