猪轮状病毒vp4基因的克隆及其在昆虫细胞中的表达

本研究扩增猪轮状病毒中国分离株JL94株VP4蛋白主要抗原编码区基因(1-756bp),将测序结果与国外分离株进行比较;将该基因片段同载体pMel BacA连接后,与杆状病毒DNA共转染入昆虫细胞Sf9,经蚀斑筛选纯化重组病毒并再感染Sf9细胞获得vp4基因的表达,对表达的VP4蛋白进行Western blot分析和血清中和抗体试验。结果表明：JL94株VP4主要抗原编码区基因与国外分离株CRW-8株、Gottfried株该基因片段氨基酸同源性分别为96．43％和67％,说明JL94株与CRW-8株属同一VP4血清型,而与Gottfried株属不同血清型。JL94株vP4主要抗原编码区氨基酸最大变异处位于aa81-aa207。vp4基因在昆虫细胞中表达量占细胞总蛋白的20％,Western Blot证实表达蛋白有良好的生物学活性。所表达的蛋白免疫小鼠产生中和抗体,阻断JL94在MA104细胞上引起的细胞病变。     

灵芝富碘实验中氨基酸含量的探讨

在灵芝TW液体深层富碘培养过程中,碘元素能显著提高灵芝菌丝体中氨基酸的含量,不富碘的灵芝菌丝体氨基酸含量为26.95％,在培养基中添加0．1％碘化钾而获得的富碘灵芝菌丝体及富碘锌锗硒灵芝菌丝体氨基酸含量分别为35．37％、35．86％,另外其氨基酸的组成也相对发生了显著的变化,因而推测碘元素可能是灵芝中某些氨基酸含成过程中的辅基或是其激活因子。     

戊糖片球菌热胁迫应答机制探究

目的 以发酵柚子皮中分离到的戊糖片球菌WPPE03、WPPE04作为研究对象,用标准株CGMCC1.2695作为对照,探索其热胁迫相关机制。方法 通过平板计数法,确定戊糖片球菌的热适应条件和热致死条件;采用扫描电子显微镜观察细胞热应激前后形态学变化;应用RT-qPCR分析热休克蛋白及细胞膜脂肪酸合成相关基因转录水平变化,阐明热胁迫机制。结果 确定了三株戊糖片球菌热适应条件（47℃,60 min）和热致死评价条件（62℃,15 min）;发现了热致死条件处理菌体,膜表面会出现凹陷、皱褶,部分菌体出现破裂、胞内物质外溢等现象,而热致死条件处理前先经过热适应处理,菌体破裂现象明显减少;同时,证明了热应激处理过程中,相关热休克蛋白基因表达显著上调（P<0.05）,脂肪酸合成相关基因表达发生了变化。结论 研究戊糖片球菌的热应答相关机制,可为合理开发、利用具有发酵性能的戊糖片球菌提供借鉴。     

健康人肠道中溶血菌的调查与分子鉴定

目的 调查无临床症状健康人肠道内有无溶血菌的存在,并利用分子方法对溶血菌进行鉴定。方法 通过血平板分离培养,对17例无临床症状个体肠道内溶血菌的存在情况做了3周的动态调查,对分离到的溶血菌的16SrDNA进行ARDRA（Amplified Ribosomal DNA Restriction Analysis）酶切分型,将溶血菌分为不同类型,最后利用ERIC—PCR指纹图谱技术对不同类型的溶血菌进行菌株水平的鉴定。结果17例个体中发现5例个体能检测到溶血菌,其中4例个体（A～D）只有1次样品检测到溶血菌,而个体E在3周的5次采样中均能检测到溶血菌。根据ARDRA酶切图谱将溶血菌分为2种类型,Ⅰ型16SrDNA全长测序后与蜡状芽胞杆菌（Bacillus cereus ATCC 10987）序列同源性达99％,Ⅱ型与大肠埃希菌菌（Escherichia coli CFT 073）的16SrDNA序列同源性达99％。结论 在健康个体肠道内也有溶血菌的存在,且溶血菌的存在可能与机体的疲劳程度和饮食情况有关。     

应用免疫荧光技术检测肺微小根毛霉的感染

近几年因医源性导致患者机体免疫功能低下或受损有所增加,从而使深部丝状真菌感染有逐年上升的趋势,由于检测上的种种原因,大部份是尸检后发现,难以鉴定到属种,对临床治疗带来直接影响,为进一步探讨丝状真菌的快速诊断,我们从肺活组织中分离出的微小根毛霉,注射接种到不同剂量的~(60)Co-γ辐照鼠体内后,间隔一定时间,用间接免疫荧光法检测,发现3GY辐照后14—28日检出率是41.87%(皮下注射),66.66%(腹腔注射),7GY、5GY、1GY的辐照均低于3GY,除与根霉有交叉反应外,曲霉、青霉、白色假丝酵母等均无交叉反应。     

双歧杆菌微生态调节剂的人体服用效果实验

双歧杆菌微生态调节剂的人体服用效果实验中德联合研究院江西南昌３３００４７魏华付金衡佘世望江西乳品厂梅国和徐书升１材料与方法１．１菌种双歧杆菌ＢＤ－２,中德联合研究院生物工程室分离。１．２材料双歧杆菌试液（含１０９个／ｍｌ）;实验动物：１８－２２ｇ昆明...     

微小根毛霉的感染治疗研究

微小毛霉感染途径、感染部位、感染机理研究的基础上,进一步探讨机体受损不同程度,微小根毛霉感染不同药物治疗效果。本实验选用5GY、7GY等不同剂量的60Co照射18～20g♀LACA小鼠,每只鼠接种六千万个微小根毛霉的孢囊孢子,设对照组。通过氟康唑,野山花治疗,观察其治疗效果和小鼠活存情况及感染部位等。结果证明：5GY、7GY两种不同剂量60Co照射感染后,从活存时间、体重、治疗后的感染只数,感染部位等均有差异。7GY60Co照射后,腹腔注射六千万个微小根毛霉的孢囊孢子,感染后分别以氟康唑、中草药野山花进行治疗,野山花治疗组小鼠体重平均高于氟康唑的治疗组。活存35日后处死,平均每只鼠体重由原来的19.3g增加到24.2g。氟康唑治疗组10目前全部死亡,每只鼠平均体重由原来的19．2g减少到1487g。5GY照射后接种六千万个微小根毛霉孢囊孢子采用野山花、氟康唑进行的治疗效果,可看出两组治疗鼠体重与对照组无明显差异。但是从治疗效果看出,5GY照射感染治疗后,野山花治疗效果优于氟康唑治疗组,治疗后野山花组感染2只,氟康唑组感染5只。野山花治疗组感染了脾、肺、淋巴结等三个组织,氟康唑治疗组感染了肝、脾、肾、淋巴结等五个组织,而检出比例比野山花治疗组高。结果证明微小根毛霉均对脾、肾侵害严重。     

丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)参与调节斑马鱼卵母细胞第一次减数分裂的恢复

旨在阐明MAPK的激活在斑马鱼(Danio rerio)卵母细胞第一次减数分裂恢复中的作用。用17α,20β双羟孕酮(17α,20β-DHP)单独作用及17α,20β-DHP与U0126(MAPK上游信号MEK阻断剂)共同作用两种方法,分别培养斑马鱼卵母细胞。采集不同培养时间的卵母细胞,经裂解变性后利用SDS-PAGE电泳和Western Blot蛋白质免疫印迹技术,检测MAPK磷酸化变化,并且观察生发泡破裂(GVBD)发生情况。结果表明,斑马鱼卵母细胞在17α,20β-DHP诱发下6h基本发生GVBD,MAPK活性在2h明显升高,一直到6h都保持在较高水平。而加入U0126后,斑马鱼卵母细胞MAPK活性受到明显抑制,同一时间GVBD发生率均低于对照组斑马鱼卵母细胞。以上结果表明,MAPK参与调节斑马鱼卵母细胞第一次减数分裂的恢复,是斑马鱼卵母细胞GVBD正常发生所必需的。     

不同生理阶段、避孕方式和感染状态对阴道乳酸杆菌影响的研究

目的调查不同生理阶段、避孕方式、感染因素对女性阴道乳酸杆菌数量的影响。方法收集南昌大学第二附院妇产科就诊的176例妇女的主要资料并采用qPCR方法定量分析阴道分泌物中乳酸杆菌数量,分泌物涂片和革兰染色后在显微镜下观察记录其感染状态。结果非绝经期组不同年龄段乳酸杆菌数量差异无统计学意义,绝经期组乳酸杆菌数量减少;不同避孕方式组的阴道乳酸杆菌数量差异无统计学意义;细菌性阴道病和假丝酵母菌感染组阴道乳酸杆菌数量较正常组差异均有统计学意义。结论生理阶段、细菌性阴道病和假丝酵母菌感染是影响女性阴道乳酸杆菌数量的主要因素。     

豆豉发酵中的微生物和功能性组分研究动态

豆豉是一种以大豆为原料经微生物发酵而制成的传统发酵食品,它具有营养丰富、药用价值高的特点。本文比较了4种类型豆豉的制造工艺差别,以及形成的不同风味成分和功能成分,分析了不同豆豉中的主要发酵微生物及群系与其作用,为进一步研究豆豉的现代生产工艺提供了资讯。