藏红花素对白血病患儿骨髓树突状细胞体外增殖作用的影响

目的:探讨藏红花素(crocin)对白血病患儿骨髓树突状细胞体外增殖作用的影响。方法:采用Ficoll-Hypaque法分离急性白血病患者骨髓液单个核细胞,将本实验分为六组。培养至第9天,在倒置显微镜下观察各组细胞形态,对各组细胞进行计数,并行瑞氏-姬姆萨染液染色,在油镜下观察典型树突状细胞的形态,应用流式细胞仪检测各组细胞免疫表型。结果:结果表明,实验各组均得到一定数量典型的DC,对照组中未见,实验各组细胞数目明显高于对照组,差异有显著统计学意义(P<0.01)。在加入细胞因子的各组中,以E组即加入藏红花素1.25mg/ml组细胞数最高,而C组细胞数与D组细胞数比较无显著差异(P>0.05)。培养至第9天,流式细胞仪免疫分析显示C、D、E、F各组CD1a+、CD83+、HLA-DR+细胞比例明显高于A、B两组(P<0.01),差异有显著统计学意义,A、B两组之间比较差异无统计学意义(P>0.05)。D、F组与C组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。E组与C、D、F组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:藏红花素能促进树突状细胞增殖,其促进树突状细胞增殖的能力明显弱于细胞因子的联合作用。藏红花素协同细胞因子促进树突状细胞的成熟具有浓度依赖性,在藏红花素浓度为1.25mg/ml时作用最强,而浓度过高或过低时均未表现出明显的促进作用。     

23例儿童霍奇金淋巴瘤临床分析

目的：分析儿童青少年霍奇金淋巴瘤（HL）患者的病理特征、临床表现及其预后影响因素。方法：收集青岛大学医学院附属医院血液儿科2001年5年至2013年8月收治的23例经病理确诊的儿童青少年HL患者的临床资料,采用Fisher确切概率法等进行各组间差异检验。结果：确诊病例共23例,中位年龄7.5岁,男：女发病比例=6.7：1,Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期、Ⅳ期分别占13.0%、26.2%、30.4%、30.4%;结节性淋巴细胞为主型（NLPHL）1例（4.3%）,经典型HL22例（95.7%）：混合细胞型（MC）10例（43.5%）,淋巴细胞为主型（LP）11例（47.9%）,结节硬化型（NS）1例（4.3%）;受累部位以颈部淋巴结最多见,其次依次为纵隔、腹腔及腹膜后、脾、骨骼、肺组织等,其中巨大纵隔肿块者2例;具有B症状者8例（34.7%）。化疗2个疗程评估总有效率为100%,完全缓解（CR）率69.6%,部分缓解（PR）率30.4%。Ⅰ期和Ⅱ期患者CR率100%,明显高于Ⅲ期和Ⅳ期患者（50%）,P〈0.05;23例患者7例复发,复发率Ⅲ期和Ⅳ期患者为46.2%,Ⅰ期和Ⅱ期患者为11.1%,前者高于后者（P=0.0098）;有B症状与无B症状患者之间复发率有显著统计学差异（P=0.019）;2例有巨大包块患者皆复发;各病理分型与疾病的复发间差异无统计学意义（x2=2.695,P〉0.05）。结论：儿童霍奇金淋巴瘤预后相对较好,但Ⅲ期和Ⅳ期、合并B症状及大肿块或大纵隔肿瘤的患者复发率高,应依据疾病危险度分层治疗,以期更好的预后。     

一氧化氮与植物耐盐性

盐胁迫是制约植物生长发育的主要环境因子之一,信号分子一氧化氮（NO）参与调节植物的耐盐性,本文介绍近年来NO合成及其与植物耐盐性关系的研究进展,并讨论了NO可能的作用机制。     

Beclin-1蛋白在霍奇金淋巴瘤中的表达及其临床意义

目的:探讨beclin-1蛋白在霍奇金淋巴瘤(Hodgkin lymphoma,HL)组织霍奇金里斯细胞(Hodgkin Reed-Sternberg,HRS)的表达及其与HL患者临床特征之间的关系.方法:收集2001年1月至2012年1月青岛大学医学院附属医院初发的HL患者61例和同期反应增生性淋巴结炎患者35例的组织标本为研究对象,通过免疫组化检测beclin-1蛋白在HL组织HRS细胞、反应性细胞及反应增生性淋巴结组织中的表达情况.结果:①HL与反应增生性淋巴结组织中beclin-1蛋白的阳性表达率分别为64％(39/61)和86 ％(30/35),HL组的beclin-1蛋白表达明显低于反应增生性淋巴结炎组,两者之间差异有统计学意义(P＜0.05);而在同一HL组织中,HRS细胞beclin-1蛋白的表达明显低于反应性细胞,差异有统计学意义(P＜0.05).②不同组织分型的HRS细胞beclin-1蛋白的表达有差异,淋巴细胞消减型(lymphocyte depletion,LD)HRS细胞beclin-1蛋白的表达明显低于混合细胞型(mixed cellularity,MC)及结节硬化型(nodular sclerosis,NS),差异有统计学意义(P＜0.05),富于淋巴细胞型(lymphocyte rich,LR)与混合细胞型、富于淋巴细胞型与结节硬化型、富于淋巴细胞型与淋巴细胞消减型、混合细胞型与结节硬化型之间HRS细胞beclin-1蛋白表达差异无统计学意义(P＞0.05).③HL组织中HRS细胞beclin-1蛋白表达水平与患者Ann Arbor分期、B症状及血清LDH值有关(P＜0.05),而与年龄、性别、巨大肿块及血沉无关(P＞0.05).结论:Beclin-1蛋白在HL中HRS细胞的表达明显降低,且与HL的恶性程度及侵袭性明显相关;beclin-1表达降低可能参与了HL发生发展.     

B细胞性非霍奇金淋巴瘤中CHFR mRNA的表达与其临床病理特征关系的研究

目的:探讨CHFR(checkpoint with FHA and ring finger)基因在B细胞非霍奇金淋巴瘤(B-NHL)中的表达水平及其与临床病理特征之间的关系.方法:采用荧光定量PCR方法检测81例B细胞非霍奇金淋巴瘤组织和38例淋巴结反应性增生组织(RH)CHFR mRNA的表达水平.结果:①81例B-NHL组织中低水平表达CHFR mRNA,其中2例表达缺失;而在淋巴结反应性增生组中该基因全部表达,差异有统计学意义(P＜0.05).②B-NHL患者中Ⅰ+Ⅱ期组和Ⅲ+Ⅳ期组CHFR mRNA表达存在差异,Ⅲ+Ⅳ期表达水平低于Ⅰ+Ⅱ期,差异有统计学意义(P＜0.05);B-NHL组按IPI评分分0-1分组和2-5分组,高评分组CHFR mRNA表达量低于低评分组,差异具有统计学意义(P＜0.05);而CHFR mRNA表达量与年龄、性别、有无症状、LDH水平及ECOG评分无相关性.结论:CHFR表达水平的降低在非霍奇金淋巴瘤的发生过程中具有一定作用,并与其恶性程度及进展相关.     

藏红花素对白血病患儿骨髓树突状细胞体外增殖作用的影响

目的：探讨藏红花素（crocin）对白血病患儿骨髓树突状细胞体外增殖作用的影响。方法：采用Ficoll-Hypaque法分离急性白血病患者骨髓液单个核细胞,将本实验分为六组。培养至第9天,在倒置显微镜下观察各组细胞形态,对各组细胞进行计数,并行瑞氏-姬姆萨染液染色,在油镜下观察典型树突状细胞的形态,应用流式细胞仪检测各组细胞免疫表型。结果：结果表明,实验各组均得到一定数量典型的DC,对照组中未见,实验各组细胞数目明显高于对照组,差异有显著统计学意义（P〈0.01）。在加入细胞因子的各组中,以E组即加入藏红花素1.25mg/ml组细胞数最高,而C组细胞数与D组细胞数比较无显著差异（P〉0.05）。培养至第9天,流式细胞仪免疫分析显示C、D、E、F各组CD1a＋、CD83＋、HLA-DR＋细胞比例明显高于A、B两组（P〈0.01）,差异有显著统计学意义,A、B两组之间比较差异无统计学意义（P〉0.05）。D、F组与C组比较,差异无统计学意义（P〉0.05）。E组与C、D、F组比较,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论：藏红花素能促进树突状细胞增殖,其促进树突状细胞增殖的能力明显弱于细胞因子的联合作用。藏红花素协同细胞因子促进树突状细胞的成熟具有浓度依赖性,在藏红花素浓度为1.25mg/ml时作用最强,而浓度过高或过低时均未表现出明显的促进作用。     

5'-Aza-CdR 对B细胞淋巴瘤的抑制作用及对瘤细胞CHFR 表达和甲基化的影响

目的:探讨5-氮杂-2'-脱氧胞苷(5'-Aza-Cd R)对人伯基特淋巴瘤Raji裸鼠移植瘤的抑制作用,以及对瘤组织中CHFR表达和甲基化的影响。方法:1皮下接种Raji细胞悬液构建荷瘤裸鼠模型18只,并随机分为实验组和对照组,分别予腹腔内注射等体积的5'-Aza-Cd R(1μg/g)及生理盐水,计算肿瘤体积大小,绘制肿瘤生长曲线,24天后比较两组移植瘤体积大小和重量。2分别从移植瘤组织中提取DNA及RNA,应用实时荧光定量PCR检测CHFR m RNA的表达,甲基化特异性聚合酶链反应(MSP)检测CHFR基因甲基化情况。结果:1实验组移植瘤生长速度较缓慢。实验结束时,实验组移植瘤体积、重量与对照组相比,差异有显著统计学意义(P0.01)。2实验组瘤细胞中CHFR m RNA的表达水平(3.69±1.20)与对照组(1.04±0.30)相比,差异有显著统计学意义(t=3.94,P0.001)。3实验组中的甲基化条带与对照组相比明显变暗,同时出现非甲基化条带,对照组中CHFR基因启动子只有甲基化条带被扩增。结论:5'-Aza-Cd R能抑制人伯基特淋巴瘤的生长,诱导瘤细胞CHFR m RNA表达增加,其机制可能为5'-Aza-Cd R使甲基化的CHFR启动子发生去甲基化。     

CHFR, PARP-1基因对B细胞淋巴瘤Raji细胞增殖和凋亡的影响

摘要 目的：探讨CHFR与聚(ADP-核糖)聚合酶1(PARP-1)基因对B细胞淋巴瘤Raji细胞增殖和凋亡的影响。方法：用5-Aza-dC处理Raji细胞,后通过qRT-PCR检测CHFR的mRNA表达水平,western blot评估CHFR、PARP-1的蛋白表达。经CHFR慢病毒转染Raji细胞后,用qRT-PCR和western blot评估RAJI细胞中的CHFR、PARP-1变化。通过CCK-8法测定细胞的增殖情况,流式细胞术检测细胞周期的变化。结果：与对照组相比,经5-Aza-dC处理 Raji组的CHFR mRNA表达显著上调(P <0.01),PARP-1 mRNA水平和蛋白表达水平明显降低(P <0.05)。与对照组相比,ShRNA组CHFR的mRNA表达显着下调(均P <0.01),PARP-1 mRNA和蛋白表达水平升高(P <0.05)。CCK结果显示CHFR ShRNA组细胞活力明显低于对照组(P <0.05)。流式细胞术结果显示CHFR沉默后细胞凋亡率降低(P <0.05)。结论：CHFR可能通过PARP-1调控B淋巴细胞的增殖和凋亡。