生物技术方法生产香草醛研究进展

香草醛是重要的香味物质之一,广泛应用于食品、饮料和医药工业中。本文综述了生物技术方法生产香草醛常用的前体物质、所用微生物降解相应前体物质的代谢途径、对代谢途径中的酶进行的分子水平和基因水平的研究以及在转化工艺等方面的研究进展。     

高强度酒精连续发酵

从多株酒精酵母菌株中筛选出S.cerevisiaeKG作为酒精生产菌株。该菌株具有较好的酒精发酵活力和絮凝性。使用具有细胞循环的连续发酵双罐系统,酒精生产强度达到30.5（g／1.h）。根据该系统的动力学模型,讨论了获得高强度酒精连续发酵的途径。     

棉铃虫核型多角体病毒HindⅢ—K片段的核苷酸序列及其分析

测定了棉铃虫核型多角体病毒基因组ＤＮＡ的Ｈｉｎｄ Ⅲ－Ｋ片段苷酸序列。该片段全长３２５５ｂｐ,含可编码大于４０个氨基酸残基的多肽的开放阅读框１５个,包括多体蛋白基因编码区３’端４８９ｂｐ和蛋白激酶ＨａｖＰＫ基因编码区８０１ｂｐ。     

利用环形染色体构象捕获技术对Bci11b基因座位在细胞核内空间组织的研究

环形染色体构象捕获（4c）技术实现了在全基因组范围内捕获与4c靶位点发生相互作用的基因座位,因而通过4C相关技术可以进一步研究靶基因座位在细胞核内的空间组织形式。该文以ABclllb基因座位作为4C分析的靶位点,通过优化4C分析的反向巢式PCR扩增条件,实现4C分析PCR的高效扩增：并通过有限克隆筛选与普通测序分析相结合的方法,在全基因组范围内捕获到一些与BcHlb基因座位发生潜在相互作用的基因座位。这些基因座位与靶位点间的相互作用既有发生在相同染色体内的,也有发生在不同染色体之间的。这些基因座位间的相互作用表明了Bclllb基因座位在细胞核内复杂的空间组织形式。     

人碱性成纤维细胞生长因子基因克隆、cDNA5'端修饰及在大肠杆菌中的表达

采用cDNA PCR技术 ,从人胎盘cDNA文库DNA中克隆了人碱性成纤维细胞生长因子 (hbFGF)基因。用PCR突变法对其 5 端序列进行修饰 ,将天然和修饰后的hbFGF基因分别克隆至表达载体 pBV2 2 1,免疫印迹和SDS PAGE结果证明 ,经修饰后的基因在大肠杆菌DH5α中获得了表达 ,表达量占菌体总蛋白的 9%。     

乙型溶血性链球菌分离方法的研究

慢性扁桃体炎往往成为风湿病和肾小球肾炎的病灶,一般认为发生合并症与乙型溶血性链球菌的感染有关。但从扁桃体炎患者分离到乙型溶血性链球菌的阳性率却不高。其原因主要是大部分乙型溶血性链球菌常深居扁桃体陷窝内、在厌氧环境中繁殖,用常规的需氧血平板培养很难分离到真正致病菌。所以改进分离方法。是临床迫切需要解决的问题。为此,     

嗜酸乳杆菌在模拟胃肠环境中抗性的研究

采用MRS培养基,模拟胃肠环境,即低pH值（1.5～4.5）。高胆汁盐（0.1％～0.4％）对嗜酸乳杆菌抗性进行了研究。同时对肠道中致病性大肠杆菌、金黄色葡萄球菌的拮抗特性以及服用抗生素后嗜酸乳杆菌的耐药性进行了研究。结果表明,嗜酸乳杆菌在pH2.5～4.5时具有较强的生存能力,6h活菌数仍达 10⁷cfu/mL以上,pH1.5条件下仍有部分存活。在0.1％～0.3％胆汁盐条件下4h活菌数仍达106cfu/mL以上,且能在0.4％胆汁盐中存活。同时,对致病性大肠杆菌和金黄色葡萄球菌具     

肿瘤DNA疫苗佐剂研究进展

对近年来在增加肿瘤DNA疫苗免疫原性、提高肿瘤DNA疫苗效力方面所取得的进展予以综述。简要阐述了以下几种较有效的增强肿瘤DNA疫苗效力策略的机制和进展：（1）以细胞因子表达质粒为佐剂;（2）以质粒编码的趋化因子、协同刺激分子、共刺激分子、补体为佐剂;（3）以CPGODN为佐剂;（4）其他一些佐剂。     

里氏木霉双基因同步缺失菌株的构建与甘露聚糖酶表达研究

在里氏木霉中建立了一个快速的双基因位点同步同源重组新方法,较好解决了里氏木霉基因逐个敲除周期长等问题。研究以里氏木霉自身甘露聚糖酶基因（man5A）为重组表达的报告基因,通过一步转化,将该基因定点整合入纤维二糖水解酶Ⅰ（cbh1）基因位点,同时缺失主要的两个纤维素酶基因（cbh1、cbh2）,得到重组工程菌Man12。将重组工程菌Man12与出发菌株Tu6Δku70进行摇瓶发酵,结果显示,重组菌株的甘露聚糖酶产量比出发菌株提高10倍,而纤维素酶产量降低了60%,胞外总蛋白分泌水平降低了40%。Real-time PCR检测甘露聚糖酶基因（man5A）的转录水平,发现重组菌株较出发菌株提高了25倍。在里氏木霉中首次报道了通过一步转化实现两个基因同步定点整合的方法,对利用基因工程手段构建高效表达重组蛋白的里氏木霉工程菌株具有一定的指导意义。