基因组改组技术选育耐酸性琥珀酸放线杆菌

以琥珀酸产生菌Actinobacillus succinogenes CGMCC 1593为出发菌,分别经过紫外线-甲基磺酸乙酯(UV-EMS)和紫外线-硫酸二乙酯(UV-DES)诱变处理,得到7株耐酸性有所提高的突变株.以此作为候选菌库,经3轮原生质体递进融合,筛选获得4株可以在pH 5.6下生长的改组菌株.其中改组菌株F3-21在pH 5.6的完全液体培养基中生长的OD值是原始菌的7倍,在pH 5.2条件下仍能生长;其摇瓶发酵48h琥珀酸产量较原始菌株提高48%.在5L发酵罐中进行分批发酵,当控制pH在较低值(5.6～6.0)时,F3-21厌氧发酵48h积累琥珀酸38.1g/L,较出发菌株提高了45%;当控制pH在6.5～7.0时,F3-21厌氧发酵32h积累琥珀酸40.7g/L.F3-21在5L发酵罐中进行补料分批发酵,厌氧发酵72h,产琥珀酸达67.4g/L.结果说明基因组改组技术能够改进琥珀酸放线菌的耐酸性能及其琥珀酸的产量.     

Nesfatin-1及MCH对大鼠胃酸分泌和胃运动的影响

目的:本实验主要探究nesfatin-1对胃运动和胃酸分泌的影响,以及弓状核(ARC)-下丘脑外侧区(LHA)nesfatin-1神经通路在该过程中的作用。方法:采用逆行追踪和免疫组织化学染色实验观察ARC-LHA nesfatin-1神经通路的构成;在体胃运动实验观察nesfatin-1对胃运动的影响以电刺激ARC对胃运动的影响;采用幽门结扎法测量胃液和胃酸分泌量。结果:LHA微量注射nesfatin-1抑制胃运动和胃酸分泌,但是预先注射黑色素浓集激素(MCH)受体拮抗剂PMC-3881-PI减弱nesfatin-1对胃运动和胃酸分泌的抑制作用。电刺激ARC后,胃收缩幅度和频率显著增强,胃酸分泌明显增多。nesfatin-1抗体或PMC-3881-PI对电刺激ARC诱导的胃运动没有显著影响,但是能够改变电刺激ARC诱导的胃酸分泌。结论:ARC-LHA间nesfafin-1通路可调控大鼠胃运动和胃酸分泌,并且黑色素浓集激素也参与调节该过程。     

灭虫精的杀虫活性及田间防治褐飞虱的应用研究

灭虫精(Imidacloprid通用名称吡虫啉)系一种内吸性杀虫剂,属硝基亚甲基化合物,对稻飞虱具有极强的生物活性。室内测定褐飞虱付Nilapavarta lugens Stal 3龄与5龄若虫LD₅₀值分别为2.55x10^-5μ/头与6.78x10^-5μg/头,其毒力回归方程分别为Y=r5.6231+1,0486X和Y=5.2091+1.2389X。实验表明,该药具有极好的触杀和胃毒作用,稻田应用的有效剂量为15～30g/hm²,是扑虱灵常规用量的1/5～1/10。田间药效特征突出地表现为速效(1-3d)、持效(4-10d)和残效(11d以上)的三段效应,90%以上的防治效果可维持在40d以上.试验还表明,灭虫精田间应用表现出在飞虱和天敌之间的良好选择性,对稻田益蛛基本无害,是一种很有前途的稻田应用杀虫剂。     

鱼类免疫组织和细胞的研究概况

近几十年来,随着世界人口的增长和消费水平的提高,世界渔业也得到了长足的发展。但与此同时,高密度养殖模式也引起水产动物病害的频繁发生,并造成一定的环境污染。作为主要水产养殖对象的鱼类,在其与病原和环境之间相互作用的过程中,主要是靠其免疫系统来抵御外来病原生物的侵害,通过非特异性和特异性的免疫防御机制来维持机体内环境的稳定。因此,对鱼类免疫系统的研究,不仅可以认识鱼体同病原间的作用方式,反映鱼类赖以生存的水环境的质量,还可用以研究脊椎动物免疫系统的进化规律。       

mRNA差异显示技术中特异条带回收方法的比较

目的：建立简化的mRNA差异显示技术中特异条带的回收方法。方法：用单个小鼠早期发育的胚胎构建mRNA差异显示技术,用一步法和煮沸法分别从银染的聚丙烯酰胺凝胶中回收差异显示的特异条带,并进行再扩增、回收、克隆及酶切鉴定。结果：两种不同的回收方法经过mRNA差异显示技术程序环节,证明其具有相同的实验效果。结论：应用简化的一步法和煮沸法对单胚构建的mRNA差异显示技术中的特异条带进行回收,具有有效性和可靠性。     

基因工程鱼生长激素的生产研究

以P_RP_L,Trp启动子在大肠杆菌中表达鲤鱼生长激素重组DNA,经过高密度发酵.包涵体的提取,恢复天然结构。每升发酵可碍2g鱼生长激素。在上海地区以浸渍方法处理对虾苗并在人工饲料中添加鱼生长激素,提高虾苗的存活率并增加产量,提高了饲料的转化率。     

陆地棉体细胞胚胎发生与植株再生

利用陆地棉品种下胚轴为外植体进行体外培养研究。激素和品种是影响愈伤诱导和胚胎发生的主要因素。去除激素后胚性愈伤在固体培养基上只能形成少量的成熟胚。悬浮培养是获得大量成熟胚的中间步骤。悬培两周后,悬培物转到固体培养基上促进胚状体成熟,30—60目之间的悬培物比大于30目的悬培物易形成成熟胚。KT 0.1ppm、Zea 0.1ppm分别有效地促进了胚状体成熟。活性碳250mg/L、NAA 0.1ppm、IBA 0.1ppm和IAA 0.1ppm能使胚状体萌发并健壮生长。目前已得到100多株幼苗,大苗已达八片真叶。     

抗寒剂CR－4在大田早稻育秧中的应用试验

抗寒剂ＣＲ－４在大田早稻育秧中的应用试验简令成,孙龙华,王瑞萍,李达模,唐建军（中国科学院植物研究所,北京１０００４４）（中国科学院长沙农业现代化研究所,４１０１２５）ＡＰＰＬＩＣＡＴＩＯＮＥＸＰＥＲＩＭＥＮＴＳＯＦＴＨＥＣＯＬＤ－ＲＥＳＩＳＴＥＲＣ...     

主要协同转运蛋白超家族的研究进展

主要协同转运蛋白超家族(Major facilitator superfamily,MFS)是目前已知最大的膜转运蛋白超家族之一,包括100万个测序成员,其长度大都分布在400-600个氨基酸残基之间。根据TCDB数据库显示,MFS已经扩展到95个家族,它们可以促进糖、药物分子、肽、三羧酸循环代谢产物、有机阴离子和无机阴离子等溶质在电化学梯度下进行跨膜运输。目前,对于MFS转运蛋白的晶体结构及转运机制的研究较多,研究发现MFS转运蛋白家族通常具有12个跨膜螺旋单位,并拥有其独特的折叠方式(MFS折叠),蛋白呈现向胞内、胞外开口或闭合的构象,以"摇杆开关"的转运方式进行物质的运输。MFS转运蛋白超家族在动植物中的生理作用较为广泛,在近期,人源MFS转运蛋白的研究更是引发关注,一些MFS转运蛋白家族成员的缺失可导致大脑萎缩和发育迟缓等;还有一些MFS蛋白具有调节细胞酸碱平衡、促进抗癌和消炎药物吸收等作用,关于人源MFS转运蛋白的研究为糖尿病、疲劳综合征、心血管疾病、癌症等人类疾病的防治提供了依据。主要介绍MFS转运蛋白超家族的发展,阐述其晶体结构、转运机制及生理作用,并在此基础上进行展望,以期为MFS的进一步深入研究及探讨提供理论依据。     

TGF-β1对Aβ1-42诱导海马神经元-小胶质细胞共培养体系中细胞因子表达和分泌的影响

目的：探讨在海马神经元和小胶质细胞共培养体系中转化生长因子-β1（TGF-β1）对β淀粉样肽1-42（Aβ_1-42）诱导的小胶质细胞激活表达和分泌细胞因子的影响。方法：将大鼠海马神经元和小胶质细胞进行共同培养,于共同培养后第5日,加入TGF-β1（5 or 20 ng/ml）,1 h后加入Aβ_1-42（5 μmol/L）,继续培养72 h后用于后续实验,Western blot法检测诱导型一氧化氮合酶（iNOS）的蛋白表达;Real-time PCR和ELISA法检测肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白介素-1β（IL-1β）和胰岛素样生长因子（IGF-1）的mRNA表达和分泌。结果：在共同培养的海马神经元与小胶质细胞体系中,Aβ_1-42诱导炎症因子iNOS、TNF-α和IL-1β的表达和/或分泌上调,神经营养因子IGF-1表达下调,TGF-β1预处理削弱上述Aβ_1-42的作用。结论：TGF-β1明显抑制Aβ_1-42诱导的小胶质细胞激活引起的炎性细胞因子的增加和神经营养因子的减少。