苹果多酚氧化酶双链RNA干扰(RNAi)研究

以成熟苹果果实的RNA为模板,经RT-PCR扩增并克隆苹果多酚氧化酶(APPO)长度为710bp的反义、正义基因片段.以副球菌中类胡罗卜素合成有关的(crtW+crtY)融合基因片段YYT为间隔区,将APPO反义基因片段、YYT和APPO正义基因片段串联,构成全长为2446bp的DNA并插入到植物双元载体pYPX145中,构成可表达苹果多酚氧化酶双链RNA的植物双元载体pYF7704.以根癌农杆菌介导的叶盘转化法转化苹果栽培品种红富士,通过50mg/L卡那霉素筛选和GUS检测,获得了转基因苹果抗性芽.荧光定量RT-PCR检测结果显示,转基因苹果抗性芽内多酚氧化酶基因的干扰效果达91.69%以上,研究结果证实多酚氧化酶双链RNA干扰在转基因苹果上是可行的.     

锯缘青蟹精子超微结构的研究

利用光镜和电镜观察了锯缘青蟹成熟精子的形态和超微结构。精子呈陀螺形，无鞭毛，在较宽的一端环生着１０余辐射臂。精子由球状的顶体、核杯以及核衍生的辐射臂三部分组成。顶体包括顶体管和顶体囊，后者包绕在顶体管的中央管周围，并可分为头帽带，内层和外层区。顶体被杯状的核包裹，仅头帽露于精子表面。成熟的精子中，位于核杯和顶体管之间的核膜出现局部断续或消失，中心粒和一些胞器出现的核杯腔中。     

制备型高效液相色谱法分离蛋白质的研究

生物工程的发展,特别是生化制品下游处理技术的兴起,对现代分离科学提出了更高的要求,研究和开发各类生化物质特别是活性生物大分子的分离纯化技术,已成为一项十分重要的研究课题。在现有的分离技术中,液相色谱,尤其是80年代在分析型高效液相色谱(HPLC)基础上兴起的制备型HPLC,在大规模分离纯化生物活性物质特别是蛋白质方面已显示出巨大的应用潜力,引起了各国研究者的高度重视^[1-5].本文利用自行设计的制备型HPLC分离装置,对牛血清白蛋白(BAS)和牛血清红蛋白(HG)的制备分离过程进行了实验研究,着重考虑了流动流速、柱超载方式、柱长等因素对BAS和HG分离度的影响。     

抗前列腺特异抗原的单链抗体的克隆和表达

本文克隆了抗前列腺特异抗原(PSA)单抗526的轻、重链可变区基因,构建了在大肠杆菌中表达单链抗体的具有强启动子PR和PL的温度诱导型表达载体,表达了抗前列腺特异抗原的单链抗体。表达产物经ELISA测定证明具有特异结合PSA的能力。     

加利福尼亚大学同意建造海洋生物技术实验室

加利福尼亚大学的董事们同意拔款800万美元用于建造圣巴巴拉分校实验室。将利用该实验室在海洋和生物技术业之间起桥梁作用。该实验室将利用大学原有的超纯海水收集系统,以便为养殖能增加食品生产的一些经遗传操作的海洋生物提供条件。一些新的潜在药物的分离和特性是该实验室的其它研究对象。科学家们将利用该设备在     

一种基因拷贝的过量存在能产生对杀虫剂的抗性

虽然还不能马上解决昆虫对有机磷杀虫剂的抗性问题,但法国的 Claude Mouchès和他的同事发现,一种基因拷贝的过量存在能使蚊子对杀虫剂产生抗性,这为着手解决这个问题开辟了新途径。该基因是一种酯酶 B1基因。据这个法国小组的测定表明,一种能抗有机磷杀虫剂的加利福尼亚蚊子品系所含的酯酶 B1较那些对该杀虫剂敏感的品系要多500倍。他们指出,能编码酯酶的这种基因在该抗性品系中至少能增加到250倍。     

Du Pont公司签订两项研究与发展合同

Du Pont公司对植物生物技术越来越积极。该公司与DNA植物技术公司(DNAP)签订了一项研究与产品发展合同,打算培育一些能增加特征的植物品种,以便用于食品工业。DNAP公司的力量主要投入在利用植物组织培养的一些技术方面。 Du Pont公司还与Advanced Genetic Science公司(AGS)签订了一项长达5年多的且总费用达500万美元的研究合同。这两项合同兼有200万美元的无息兑换贷款,使Du Pont     

InFerGene公司集中力量生产食品酶

InFerGene 公司的研究与发展部门将力量集中在重组体 DNA 技术的应用上,以改进用于食品和饮料工业的一些酶的微生物生产。最初,InFerGene 公司主要是生产重组体酵母,而现在主要生产一些如曲霉这种丝状真菌和芽孢杆菌种。最主要的计划是生产葡糖淀粉酶。In-FerGene 公司的一些研究人员已从一种曲霉菌株中分离出这种葡糖淀粉酶基因,他们将这种基因插入一种载体,并用它来转化一种更好的寄主菌株。目的是增加每个发酵罐运转期的葡糖淀粉酶产量,减少发酵罐的运转时间,降低生产成本,以获得一种比较标准和统一的产品。     

一种具有抑制糜蛋白酶活性的血清DNA结合蛋白质的纯化和理化特性

 本文采用离子交换层析,DNA亲和层析和硫酸铵盐析三步从人血清中分离纯化了一种肿瘤相关DNA结合蛋白质(64DP)。本方法较简便,产率提高。经SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳和免疫电泳鉴定纯度符合要求。SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳测定分子量为64,000。等电聚焦电泳测得等电点在4.2左右。醋酸纤维膜电泳和转移电泳表明其为一种α_1球蛋白。过碘酸西夫氏糖蛋白染色呈阳性反应。氨基酸分析和酶抑制试验证实64DP与α_1抗縻蛋白酶很相似。     

一种使哺乳动物细胞中rDNA增强表达的启动子

如果要找到一种可增强哺乳动物细胞中重组体蛋白的表达水平的方法,不妨试试一个新发现的启动子,它能提高哺乳动物细胞中基因的表达水平。该启动子是通过重组体 DNA 技术与另一种基因偶联在一起的。实际上,它(用于β肌动蛋白的开关)可能是一些最有用的启动子中的一种,因为它能控制β肌动蛋白(哺乳动物细胞中最有用蛋白中的一种)的产生。据发表于1985年10月的一份《美国国家科学院院报》杂志报道,斯坦福大学医学院(斯坦福’