利用DNA Shuffling技术构建重组PRRSV ORF5基因

通过DNA shuffling技术对PRRSV ORF5基因进行改组,研究其对异源毒株交叉中和能力。将获得的嵌合基因△2ORF5与载体pET-32a连接,转化到大肠杆菌Escherichia coli BL21中,经诱导表达获得约42 kDa重组蛋白。将纯化的重组△2ORF5蛋白免疫BALB/c小鼠,制备多克隆抗体,Western blotting试验表明其与4株亲本毒株重组ORF5蛋白具有良好的反应性。病毒感染抑制试验结果表明,多克隆抗体对4株亲本毒株具有较高的抑制率(53%)。研究结果为研制新型PRRSV疫苗奠定了基础。     

基于单位补充量模型的西江广东鲂种群资源利用现状评价

广东鲂(Megalobrama terminalis)是珠江中下游最重要的经济鱼类之一, 但由于过度捕捞和栖息地破坏, 资源日趋衰退, 科学评估其资源利用现状, 对合理开发与科学养护具有重要意义。利用2009—2015年西江肇庆江段渔业资源调查监测数据, 分析了广东鲂生长与死亡相关特征及参数变化; 利用单位补充量渔获量(Yield per recruitment, YPR)模型、单位补充量产卵群体生物量(Spawning biomass per recruitment, SBR)和生物学参考点评估了西江肇庆江段广东鲂资源利用状况。结果表明: 西江广东鲂体长(L)和体重(W)关系为W=1.518×10–5L3.051(R2=0.962, n=2252), 生长方程为L_t=419.989[1–e–0.225(t+0.172)]; 现有捕捞强度(F平均1.27/年)远超过种群开发可承受水平(F_40%=0.53, F_0.1=0.27, F_20%=0.94); YPR_ave=30.58 g, 远低于YPR_0.1(36.73 g)和YPR_max(45.89 g); SBR=11.5%, 低于20%的下限临界参考点。西江广东鲂种群资源已过度开发, 处于补充型捕捞过度和生长型捕捞过度状态。目前珠江禁渔期制度的实施对广东鲂资源补充起到了良好作用, 但提高开捕体长至250 mm资源恢复效果将更明显。     

内质网应激促进肺动脉平滑肌细胞的表型转化

目的:探讨内质网应激(ERS)对肺动脉平滑肌细胞表型转化的影响。方法:采用胶原酶Ⅰ消化法培养原代大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMCs),用衣霉素(TM)或4-苯基丁酸(4-PBA)诱导或抑制内ERS,MTS法评价细胞增殖情况,western blot和定量RT-PCR检测蛋白和mRNA表达情况。结果:TM呈浓度依赖性诱导内质网应激标志物GRP78和XBP1 mRNA表达;较低浓度的TM促进PASMCs增殖,高浓度(5μg/mol)使细胞凋亡;TM使PASMCs表达SM22 alpha减少,分泌Ⅰ型胶原增加;4-PBA预处理可逆转TM诱导PASMCs的SM22 alpha减少和Ⅰ型胶原分泌增加。结论:内质网应激促进肺动脉平滑肌细胞表型转化,可能是内质网应激参与肺动脉高压的机制之一。     

Zn~(2+)胁迫对黑水虻幼虫血淋巴能量物质影响的研究

为了研究Zn~(2+)胁迫对黑水虻Hermetia illucens L.幼虫能量物质的影响,本文在人工饲料中添加不同浓度(75、150、300、600、1200 mg/kg)的Zn~(2+)对黑水虻幼虫进行胁迫。利用紫外分光光度法测定了连续5代Zn~(2+)胁迫对黑水虻幼虫血淋巴中三大能量物质(总糖、脂肪及蛋白质)含量的影响,并计算了血淋巴中的热量值。结果表明,黑水虻幼虫血淋巴中的总糖、脂肪、蛋白质含量及热量值有相似的变化趋势:对各处理浓度而言,低浓度Zn~(2+)(75-300 mg/kg)处理使血淋巴中三大能量物质含量及热量值随处理浓度增加而升高;高浓度Zn~(2+)(600-1200 mg/kg)胁迫则随处理浓度增加而下降。在第1、3代黑水虻幼虫中,与对照相比,75-300mg/kg的Zn~(2+)处理浓度增加了三大能量物质含量及热量值,300 mg/kg处理浓度时达到最高,且与对照相比显著增加;而600-1200 mg/kg的高剂量Zn~(2+)处理浓度降低了三大能量物质含量及热量值。第5代幼虫血淋巴中三大能量物质含量及热量值均低于对照组,并低于同一处理浓度下的第1、3代幼虫血淋巴中的数值。因此,Zn~(2+)胁迫影响了黑水虻幼虫血淋巴中三大能量物质含量及热量值,并存在发育阶段特异性和世代累积效应。     

氯沙坦对慢性肾功能不全患者血红蛋白、电解质及NO水平的影响

目的:探讨氯沙坦对慢性肾脏功能不全患者血红蛋白、电解质及NO水平的影响。方法:收集我院收治的慢性肾功能不全患者140例,根据用药不同分为对照组和实验组,每组各70例,对照组给予洛汀新口服治疗,实验组给予氯沙坦口服治疗。分别于治疗前后检测两组患者血红蛋白(Hb)、红细胞压积(HCT)、血钙、血磷、血钾、内皮素(ET)及一氧化氮(NO)的水平。结果:与治疗前比较,两组患者治疗后Hb、HCT、血钙及NO水平升高,而血钾、血磷及ET水平降低,差异具有统计学意义(P0.05);与对照组比较,实验组患者治疗后Hb、HCT、血钙及NO水平较高,而血钾、血磷及ET水平较低,差异具有统计学意义(P0.05)。结论:氯沙坦能够明显升高慢性肾功能不全患者血红蛋白及NO水平,恢复电解质平衡,改善预后,对临床具有指导意义。     

罗氏沼虾Rab11基因cDNA克隆及其组织表达分析

为了发掘罗氏沼虾(Macrobrachium rosenbergii)免疫相关基因, 研究Rab蛋白(Ras-related proteins inbrain)在罗氏沼虾免疫应答中发挥的作用, 研究采用RACE-PCR技术克隆了罗氏沼虾Rab11基因全长cDNA序列, 记为MrRab11。全长1381 bp, 包括226 bp的5'UTR, 511 bp的3'UTR和645 bp的开放阅读框, 编码214个氨基酸, 含有一个Rab结构域。氨基酸序列比对显示, 罗氏沼虾与冈比亚按蚊(Anopheles gambiae)、蚤状溞(Daphniapulex)、叶蝉(Homalodisca vitripennis) Rab11一致性分别为82%、83%和82%。软件预测, MrRab11编码的蛋白分子量约为23.75 kD, 等电点约为5.34。实时荧光定量表达分析表明, MrRab11基因在罗氏沼虾各组织中都有表达, 肝胰腺中的表达量最高, 其次是肌肉和肠道。在阴沟肠杆菌(Enterobacter cloacae)感染12h后, 罗氏沼虾肝胰腺中MrRab11的表达量上升, 显著高于对照组(P0.05), 推测这是MrRab11对阴沟肠杆菌的应激表达,MrRab11在肝胰腺中参与了罗氏沼虾免疫应答过程。     

黄河裸裂尻鱼肌酸激酶M-CK cDNA的克隆及组织表达分析

肌酸激酶(CK)能够催化磷酸基在二磷酸腺苷(ADP)和磷酸肌酸之间的可逆性转移,在细胞能量代谢过程中发挥重要作用。本研究利用RT-PCR和RACE方法克隆了黄河裸裂尻鱼(Schizopygopsis pylzovi)肌酸激酶基因全长c DNA序列,并进行了生物信息学分析和系统发育关系研究。黄河裸裂尻鱼肌酸激酶c DNA全长1 599 bp,开放阅读框(ORF)1 143 bp,编码380个氨基酸,具有典型的N-端结构域和C-端催化结构域。氨基酸序列同源性分析表明,黄河裸裂尻鱼肌酸激酶与斑马鱼(Danio rerio)和鲤(Cyprinus carpio)M3-CK有较高的同源性,其序列一致度达94%以上。系统发育分析显示,黄河裸裂尻鱼肌酸激酶与斑马鱼和鲤的M3-CK聚在一支,形成一个单系群,初步判定克隆获得的黄河裸裂尻鱼肌酸激酶基因可能与鲤和斑马鱼M3-CK是直系同源基因。利用Real-time PCR方法检测和分析了黄河裸裂尻鱼主要组织肌酸激酶m RNA表达水平,肌肉、肠、眼、心中肌酸激酶转录本表达较高,在肝胰脏和脑中表达微弱。肌酸激酶在肌肉、肠、和心中高表达与其能量代谢功能相适应,而在眼组织中的高表达是否与肌酸激酶的其他功能相关,有待于进一步研究。     

单边匹配理论及其在美国肾交换系统应用的启示

美国肾交换系统是经济学家与医学专家一个跨学科合作的成果,也是单边匹配理论在现实生活中的具体应用。通过对单边匹配理论及在美国肾交换系统应用的回顾,旨在促进该理论在我国肾交换领域的发展和研究,为缓解我国肾源紧张以及提高其匹配效率提供启示和借鉴。     

艾比湖国家级湿地自然保护区鹅喉羚种群数量与分布

2013年6月—2014年4月,在艾比湖国家级湿地自然保护区采用样线法及粪便堆计数法调查了鹅喉羚Gazella subgutturosa的种群数量。样线总长1276.6 km,发现79头鹅喉羚。采用Distance 6.0估算了鹅喉羚的密度和遇见率。从春季到冬季,鹅喉羚遇见率在(0.014~0.034)头/km之间变化。春季鹅喉羚种群密度为(0.104±0.033)头/km2,夏季为(0.057±0.025)头/km2,秋季为(0.048±0.030)头/km2,冬季为(0.131±0.043)头/km2。鹅喉羚适宜栖息平均面积2404 km2,估算该区域春季鹅喉羚数量为240头,夏季为137头,秋季为115头,冬季为314头。粪便堆计数法估算春季种群数量为146头,夏季为90头,秋季为61头,冬季为200头。根据野外考察全球定位系统数据并解译艾比湖鹅喉羚分布生境2009年的Landsat ETM遥感影像,将生境分为森林、灌丛、湖泊、沼泽、荒漠、草原6种类型,其中,森林、灌丛为艾比湖鹅喉羚适宜生境。本研究结果将为艾比湖国家级湿地自然保护区鹅喉羚长期监测及有效保护管理提供基础数据。     

线粒体融合蛋白Mfn1/2的结构和功能

线粒体融合素基因（mitofusin gene,Mfn）在哺乳动物中编码两种蛋白质分子,Mfn1和Mfn2,它们在线粒体融合、分裂与细胞凋亡中起重要作用,调控着线粒体形态的动态变化。另外,Mfn1/2还参与线粒体的能量代谢并与相关疾病的发生有着密切关系。