多孔微球固定化CHO工程细胞生产rt-PA的研究

以 Ｃｙｔｏｐｏｒｅ 多孔微球固定产重组组织型纤溶酶原激活剂（ｒｔ Ｐ Ａ） Ｃ Ｈ Ｏ 工程细胞株４ Ｂ３ ,在２ Ｌ 搅拌式生物反应器用无血清培养基 Ｄ Ｆ５ Ｓ 连续灌流培养。４ Ｂ３ 细胞的最大活细胞密度和ｒｔ Ｐ Ａ 生产水平分别达到８８３ ×１０６／ ｍ Ｌ 和１２４７３ Ｉ Ｕ／ ｍ Ｌ。含ｒｔ Ｐ Ａ 的４ Ｂ３ 细胞培养上清经 Ｍ Ｐ Ｇ 吸附层析和 Ｌｙｓｉｎｅｓｅｐｈａｒｏｓｅ ４ Ｂ 亲和层析两步纯化,ｒｔ Ｐ Ａ 的纯度达到９８ ％ 。     

黑莓鳞翅目害虫的发生为害习性与防治

黑莓是新引进的第三代小果类植物。本文简要报告黑莓上１４科引种鳞翅目害虫的发生为害习性。其中食叶为主的害虫４１种,蛀果为主的２种,蛀干为主的１种,吸果夜蛾８种。提出了以搞好果园管理为基础的综合防治技术。     

中学生物教学中科学素质培养

随着全球性经济的出现,劳动者素质高低已成为一个国家国力的真正标志。因此,培养学生的全面素质也就成了当代教育教学的根本目标。科学是技术之根,技术是经济之源,培养劳动者的科学素质已成为新的经济增长理论诸因素中最主要的基本因素。科学素质,是指一个人从小养成...     

S-腺苷甲硫氨酸合成酶的组成型表达、产物纯化及鉴定

将大肠杆菌(E.coli K12) S 腺苷甲硫氨酸合成酶(SAMS)基因克隆至质粒pBR322中,获得的重组质粒pBR322-SAMS转入大肠杆菌JM109菌株,构建了能高效组成型表达SAMS的重组菌E.coli JM109 (pBR322-SAMS)。将重组大肠杆菌破碎后上清液经20%~40%硫酸铵分级盐析、Phenyl-Sepharose Fast Flow疏水层析和Q Sepharose Fast Flow离子交换层析,即可得到纯度提高5倍,比活为48.7 μ/mg的SAMS,三步纯化的总回收率为62%,纯度达到92%。SAMS表达量为1 176μ/L,占到菌体可溶性总蛋白的20%。重组酶的最适反应pH为8.5,4℃下在pH 7.5的缓冲液中保温10h酶活性几乎不改变。重组酶反应的最适温度为55℃ ,酶活性稳定的温度范围为20~35℃。重组酶的KmL Met为0.22mmol/L,Vmax L-Met为1.07mmol/(L·h),Km ATP为0.52 mmol/L,Vmax ATP为1.05 mmol/( L·h)。     

琼脂扩散溶血试验测定嗜水气单胞菌HEC毒素的溶血价*

建立琼脂扩散溶血试验用以测定嗜水气单胞菌 HEC毒素的溶血价 ,同时与分光光度法及微量溶试验进行比较。结果表明琼脂扩散溶血试验所测溶血价滴度要高于前两种方法。而且重复性好 ,结果易于判定。     

卵形鲳鲹组织蛋白酶B基因的克隆及表达分析

为研究卵形鲳鲹(Trachinotus ovatus)组织蛋白酶B(Cathepsin B, CatB)基因的表达特征和功能,应用RTPCR和RACE技术获得卵形鲳鲹CatB(TroCatB)基因的全长cDNA。TroCatB cDNA全长为2181 bp。其中5′UTR和3′UTR分别为391和797 bp, ORF为993 bp,推定编码330个氨基酸残基,推定分子质量和理论等电点分别为36.37 kD和5.73。蛋白结构预测TroCatB蛋白具有信号肽(1Met-18Ala)、前体肽(25Leu-64Gly)和一个典型木瓜蛋白酶家族半胱氨酸结构域,含107Cys、277His、297Asn 3个蛋白酶催化活性位点。同源性分析显示TroCatB蛋白与其他脊椎动物的同源性为67.0%—90.9%,成熟肽区与其他脊椎动物的同源性为73.7%—92.4%。NJ系统发育树显示卵形鲳鲹和其他鱼类聚为一支,与髙体鰤距离最近。实时荧光定量PCR检测TroCatB基因mRNA在健康卵形鲳鲹各组织中均有表达,在脾脏中表达最高;在溶藻弧菌感染后, TroCatB基因在脾脏、头肾组织中的mRNA表达水平...     

不同年龄段前列腺外周带基质细胞超微结构差异

目的：研究不同年龄段前列腺外周带基质细胞超微结构并探讨其意义。方法：透射电镜观察3例年轻组（23-、26-、32-岁）和3例老年组（56-、64-、71-岁）正常前列腺外周带和3例前列腺癌组织的超微结构。Masson＇s Trichrome染色法观察前列腺外周带基质胶原的分布情况。结果：年轻组、老年组前列腺外周带间质均以平滑肌细胞分布为主,间杂成纤维细胞,但老年组平滑肌细胞和成纤维细胞体积较大、形态不规则。与正常年轻组相比,老年组前列腺外周带成纤维细胞存在明显老化和肌化改变,部分细胞内与蛋白合成相关的细胞器粗面内质网发达,呈现肌成纤维细胞特征。与年轻组和老年组外周带相比,前列腺癌基质中功能更加活跃的肌成纤维细胞和胶原蛋白数量增加明显。Masson＇s Trichrome染色支持超微观察到的基质胶原分布差异：年轻组〈老年组〈前列腺癌组。结论：不同年龄段前列腺外周带基质细胞超微结构间存在差异,老年组前列腺外周带和前列腺癌基质组织中具有活性的肌成纤维细胞的增加可能是造成老年前列腺癌高发和恶性进展的重要病理基础之一。     

西伯利亚蓼铜伴侣蛋白基因在盐胁迫条件下的表达分析

铜伴侣蛋白是细胞质中负责传递铜离子的一种小分子转运蛋白,在逆境胁迫过程中铜伴侣蛋白的ATX1家族具有消除活性氧的作用．本研究应用RACE技术从西伯利亚蓼中克隆了具有完整编码区的铜伴侣蛋白全长cDNA序列,命名为PsATX-1．PsATX-1基因全长516 bp,其中开放读码框为228 bp,编码75个氨基酸,5′非编码区为83 bp,3′非编码区为204 bp．GenBank中登录号为EU620702．经比对发现,该基因所编码蛋白拥有重金属结合位点MXCXXC,缺少多数高等植物铜伴侣蛋白(CCH)所特有的C末端结构域（CTD）．实时荧光定量PCR分析显示,PsATX-1基因在西伯利亚蓼的地下茎、茎、叶中皆有表达,其中叶中表达量最高;PsATX-1基因受3% NaHCO3胁迫诱导,在不同部位表达模式有差异．     

鳝鱼摄食黄粉虫的饵料转化效率研究

于1998～1999年初步研究了鳝鱼摄食黄粉虫幼虫的饵料转化效率。结果表明,在相同的放养密度1.5kg·m^-2下,试验条件A(水温17±3℃,2～3d换一次水,环境安静,鱼种健康),干物质转化效率平均为20.1%,能量转化效率平均为13.9%,N、P转化效率各为22.0%、28.9%。试验条件B(水温为24±4℃,约7d换一次水,鱼种品系混杂,个别鱼体质较差),干物质转化效率平均为11.3%,能量转化效率平均为7.8%,鳝鱼长期摄食黄粉虫,生长速度较慢。在生产中宜交替投喂多种活饵或配合饲料与活饵混合投喂。