儿童孤独症相关基因NRXN1β启动子功能分析

Neurexins是神经特异性突触蛋白,Neurexin1β结构的异常与孤独症密切相关。为分析孤独症相关基因NRXN1β最小启动子和调节基因转录的功能元件,本文构建了含NRXN1β基因上游调控区不同区域的荧光素酶报告基因质粒,转染HEK293细胞后,利用检测双荧光素酶报告基因的转录活性以确定NRXN1β基因最小启动子区,进而筛选出相应的显著增强或抑制报告基因活性的功能区;同时,为鉴定顺式作用元件,利用基因定点突变技术对基因功能区内和临近DNA序列进行连续的碱基突变;最后,采用转录因子预测工具对启动子功能区内的转录调控元件进行分析。结果首次发现NRXN1β最小启动子区位于?88~+156 bp,?88~?73 bp和+156~+149 bp可增强启动子活性,+229~+419 bp可抑制启动子活性,且?84~?63 bp为能够显著性增强启动子活性的顺式作用元件,该区域可能存在DBP(Albumin D-site-binding protein,DBP)和ABF1(Autonomously replicating sequence-binding factor 1,ABF1)两个转录因子结合位点。     

我国4种红茶的挥发性成分分析

为了解我国4种名优红茶挥发性成分的异同,采用全自动顶空固相微萃取结合气相色谱-质谱分析,对滇红、祁红、正山小种和金骏眉的挥发性成分进行了研究。结果表明,4种红茶中共鉴定出挥发性成分90种,滇红茶中主要是芳樟醇、香叶醇、芳樟醇氧化物、水杨酸甲酯、2-戊基呋喃和橙花叔醇,祁红中主要是十六碳酸、植酮、香叶醇、芳樟醇氧化物、β-紫罗酮、植醇和蒽等,正山小种中主要是植酮、香叶醇、β-紫罗酮、二氢猕猴桃内酯、咖啡因和芳樟醇氧化物,而金骏眉中主要是香叶醇、咖啡因、芳樟醇氧化物、β-紫罗酮、苯乙醇、橙花叔醇和植醇;他们共同成分有苯甲醛、苯乙醛、芳樟醇氧化物、芳樟醇、香叶醇、α-紫罗酮、β-紫罗酮、植醇等。4种红茶在挥发性组成及含量上差异较大,共有成分仅32种;醇类化合物含量均较高,其中滇红茶中醇类化合物含量高达69.08%;而祁红、正山小种和金骏眉中酮类化合物含量较高。不同化合物之间比例和阈值的不同,形成了4种红茶各自独特的香气特征。     

琼脂糖凝胶电泳及其应用于人血清β脂蛋白的分离和分型

1.本文用自制琼脂糖进行人血清蛋白质和脂蛋白电泳及免疫电泳均获得较理想的结果。2.用酒精处理透析膜做为琼脂糖凝胶的载膜透明无色不吸附油红“O”染料,获得了较理想的载膜,便于长期保存和分析,极适宜于光密度描绘和测定各种脂蛋白组分和百分含量。3.在清蛋白的存在下以自制琼脂糖进行电泳获得了清晰透明整齐,分辨力强的电泳图谱,可将人血清脂蛋白分为五种主要的脂蛋白,乳糜微粒,β脂蛋白,前β_2脂蛋白,前β_1脂蛋白和α脂蛋白五种,以及两种不经常出现的脂蛋白,极慢速的前β_3脂蛋白和前α脂蛋白。4.根据前β脂蛋白的出现与否,泳动的速度,出现的多少,染色的深浅以及乳糜微粒存在与否可将高脂蛋白血清电泳图谱分为八种不同的类型:即Ⅰ,Ⅱ_1,Ⅱ_2,Ⅱ_3,Ⅱ_4,Ⅲ,Ⅳ,及Ⅴ八种。5.自制琼脂糖电泳重复性较好,光密度测定同一标本获得了满意的结果。     

柚皮苷和木犀草素联合应用对大鼠BMSCs诱导成骨过程中Wnt/β-cantein通路相关基因表达的影响

摘要 目的：探讨柚皮苷和木犀草素联合应用对大鼠骨髓间充质干细胞（BMSCs）诱导成骨过程中Wnt/β-cantein通路相关基因表达的影响。方法：取大鼠股骨中提取的BMSCs,分别建立A组（空白组）、B组给予柚皮苷溶液10 μmol/L,C组给予木犀草素溶液5 μmol/L;D组给予骨碎补总黄酮溶液10 mg/mL;E组给予柚皮苷-木犀草素混合溶液配伍比为10 μmol/L：5 μmol/L,并诱导其向成骨细胞分化。应用碱性磷酸酶（ALP）染色及分光光度法检测第7 d各组细胞ALP活性。应用实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测第7 d各组细胞Wnt/β-cantein通路相关基因及成骨基因的表达。结果：B组、C组、D组、E组细胞562 nm波长下光密度（OD）值显著高于A组,E组细胞562 nm波长下OD值最高,显著高于B组、C组、D组（P＜0.05）。B组、C组、D组、E组细胞ALP、骨钙素（OCN）、Runt相关转录因子2（RUNX2）基因表达水平显著高于A组,E组ALP、OCN、RUNX2基因表达水平最高,显著高于B组、C组、D组（P＜0.05）。B组、C组、D组、E组细胞β-catenin、Cyclin D1基因表达水平显著高于A组;B组、E组LEF-1基因表达水平显著高于A组;E组β-catenin、LEF-1、Cyclin D1基因表达水平最高,显著高于B组、C组、D组（P＜0.05）。结论：柚皮苷和木犀草素均具有促进大鼠BMSCs增殖和诱导其成骨向分化的作用,柚皮苷和木犀草素联合应用诱导大鼠BMSCs增成骨作用最强,其主要机制与Wnt/β-cantein通路激活有关。     

非寄主植物间套作对马铃薯甲虫种群及其天敌的影响

农田作物布局作为害虫生态调控的重要内容,一直是保护性生物防治的研究热点。为进一步明确马铃薯田块作物间套作种植模式对马铃薯甲虫种群动态的影响,探索马铃薯甲虫可持续防控的新思路与新方法,本研究在马铃薯甲虫发生期对马铃薯-玉米、马铃薯-向日葵、马铃薯单作3种作物间套作模式进行田间种群数量调查,分析比较不同种植模式下的马铃薯甲虫种群动态差异。结果表明：在马铃薯甲虫发生期,马铃薯单作第二代幼虫为害高峰期出现晚于两种间套作模式,第一代成虫为害高峰期早于两种间套作模式。第二代幼虫为害低峰期（8月26日-9月7日）时,马铃薯-玉米间套作幼虫量显著低于马铃薯单作（P<0.05）,马铃薯-玉米间套作幼虫量显著低于马铃薯-向日葵（P<0.05）,整个调查期间,马铃薯单作虫量要大于两种间套作。此外,天敌昆虫群落调查表明：间套作玉米异色瓢虫量显著高于马铃薯单作（P<0.05）,间套作向日葵的草蛉、食蚜蝇虫量高于马铃薯单作。间套作向日葵或玉米对越冬代马铃薯甲虫的扩散有影响,马铃薯播种初期间套作向日葵或玉米能在一定程度上阻隔马铃薯甲虫的定殖扩散。     

多菌灵胁迫下嫁接对茄子生长和抗氧化酶活性的影响

以野生茄托鲁巴姆(Solanum torvum)为砧木,以栽培品种西安绿茄(S.melongena)为接穗进行嫁接,测定不同施入频次多菌灵条件下嫁接茄子和自根茄子果实中的农药残留、生长发育状况和抗逆生理指标。结果表明,经过多菌灵施药1次、2次、3次处理后,嫁接茄果实中农药残留量比自根茄分别降低了12.7%～49.6%、11.4%～63.1%、13.5%～44.1%;嫁接茄株高、茎粗、植株鲜重和鲜果重相对于自根茄明显增加;嫁接茄根系活力比自根茄增加了6.8%～29.3%、8.7%～24.5%、11.1%～28.6%;嫁接茄叶片过氧化氢酶(CAT)活性、过氧化物酶(POD)活性、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活性相对于自根茄明显增加,而相对电导率比自根茄降低了16.3%～27.3%,19.7%～31.9%、20.5%～36.1%;嫁接茄丙二醛含量比自根茄降低了21.4%～31.6%、24.6%～37.9%、23.7%～39.0%。试验结果显示,施药2次和3次,各指标变化相对于施药1次明显。因此,在多菌灵胁迫下,嫁接茄子果实中的农药残留降低,植株长势明显增强,有关酶的代谢活性显著提高,从而缓解了多菌灵胁迫对茄子造成的危害。     

扩散盒血浆凝块培养中E-CFu-D性质的分析

实验研究表明,小鼠骨髓细胞在体内扩散盒血浆凝块中培养2天后所生成的红系细胞团(E-CFU-D),既不是直接起源于BFU-E或ERC,也不是由骨髓幼稚细胞(原红细胞、早幼红细胞、中幼红细胞)增殖的结果,它是一类在细胞分化中介于ERC和原红细胞之间的造血祖细胞。体内E_p浓度降低时,ERC的分化受阻,但是,E_p对E-CFU-D分化的影响却介于ERC与原红细胞之间。从体内、外的培养结果可见,当E_p浓度增高时,可以增强CFU-E或E-CFU-D的增殖和分化。     

桂枝芍药知母汤联合甲氨蝶呤对类风湿性关节炎患者中医证候评分、血清炎性因子及免疫球蛋白的影响

摘要 目的：探讨桂枝芍药知母汤联合甲氨蝶呤对类风湿性关节炎（RA）患者血清炎性因子、中医证候评分及免疫球蛋白的影响。方法：选取2018年1月~2019年10月期间我院接收的RA患者136例。根据随机数字表法分为对照组（n=68）和研究组（n=68）。对照组给予甲氨蝶呤治疗，研究组在对照组基础上联合桂枝芍药知母汤治疗。比较两组患者的疗效、中医证候评分、血清炎性因子[肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白介素-17（IL-17）、白介素-1β（IL-1β）]水平、风湿四项检查指标[类风湿因子（RF）、C反应蛋白（CRP）、抗链球菌溶血素"O"(ASO)、血沉（ESR）]水平及免疫球蛋白[免疫球蛋白A（IgA）、免疫球蛋白G（IgG）、免疫球蛋白M（IgM）]水平。结果：研究组治疗2个月后的临床总有效率91.18%（62/68）高于对照组的77.94%（53/68）（P<0.05）。两组治疗2个月后关节肿胀程度、关节屈伸不利程度、畏恶风寒、晨僵证候评分均下降，且研究组低于对照组（P<0.05）。两组治疗2个月后血清TNF-α、IL-1β、IL-17水平均下降，且研究组低于对照组（P<0.05）。两组治疗2个月后IgA、IgM、IgG水平均下降，且研究组低于对照组（P<0.05）。两组治疗2个月后RF、ESR、CRP、ASO水平均下降，且研究组低于对照组（P<0.05）。结论：RA患者在甲氨蝶呤的基础上联合桂枝芍药知母汤治疗，可有效降低患者血清炎性因子、风湿四项检查指标、免疫球蛋白水平，改善患者临床症状，疗效显著。     

改良剂对酸性土壤上伴矿景天铝毒缓解作用及镉锌吸收性的影响

为探究不同改良剂对酸性土壤铝(Al)胁迫条件下镉(Cd)锌(Zn)超积累植物伴矿景天Sedum plumbizincicola生长以及镉和锌吸取修复效率的影响,分别添加不同种类改良剂(钙镁磷肥(CMP)、MgCO3、KH2PO4)和不同浓度CMP进行温室盆栽试验。结果表明,CMP能够一定程度上提高土壤pH值并降低土壤交换性Al的浓度,MgCO3能够显著提高土壤pH值和降低土壤交换性Al的浓度,KH2PO4能够降低土壤中交换性Al浓度但未改变土壤pH值。施用适量的CMP(9.39 mg/kg)能够提高伴矿景天生物量和Cd、Zn吸取修复效率,用量过高会抑制伴矿景天生长和Cd、Zn修复效率;施用MgCO3可增大伴矿景天生物量和Cd、Zn修复效率,施用KH2PO4反而抑制了伴矿景天生长。酸性土壤上施用适量的CMP和MgCO3能够缓解伴矿景天的铝毒作用,维持较高的重金属吸收效率。     

一种百合甾体皂苷纯度及糖链结构核磁共振法分析

采用多种NMR分析技术,首次对百合甾体皂苷(25R,26R)-26-甲氧基螺甾烷-5-烯-3β-α-L-鼠李糖-(1→2)-[β-D-葡萄糖-(1→6)]-β-D-葡萄糖苷的1H和13C NMR信号进行了全归属,特别是应用选择性的1D TOCSY和1D NOESY核磁共振分析技术,对该化合物1中的氢谱信号严重重叠的糖链进行了详细的分析,提出了一套对甾体皂苷糖链信号进行全归属的核磁共振法.在确认其结构的基础上,建立了核磁共振法(1H NMR)测定该化合物1的纯度,给出了完整的实验条件,线性回归系数为0.9998,重复性实验RSD为0.58％,稳定性实验RSD为0.24％,操作简单、快速准确,且不需要其它对照品,是中药化学对照品纯度研究的一个有益补充.