洋葱伯克氏菌致病因子的研究进展

洋葱伯克氏菌群(Burkholderia cepacia complex,Bcc)大部分成员是重要的人类条件致病菌。虽然其分类学和分子鉴定研究已取得较大进展,但致病分子机理尚不明确,新药物开发进展十分缓慢。Bcc对许多常用临床抗菌药物都有耐药性,因此揭示其致病因子对新型抗菌药物或治疗方法开发具有重要意义。本文对Bcc主要致病因子、致病机理研究中存在的问题和采用的遗传工具方面的进展做了综述,重点介绍了耐药性、蛋白分泌系统、群体感应系统等6类重要致病因子。     

6-羟基-3-琥珀酰吡啶单加氧酶的纯化与结晶条件

【目的】在大肠杆菌中克隆表达尼古丁降解关键的6-羟基-3-琥珀酰吡啶单加氧酶基因hspB,纯化重组HspB蛋白并进行结晶条件的初步研究。【方法】从恶臭假单胞菌S16基因组中PCR扩增hspB基因,构建重组表达载体pET28a-hspB,并在E.coli BL21(DE3)中诱导表达,利用亲和层析和凝胶过滤层析纯化重组蛋白。利用悬滴扩散法对HspB蛋白进行结晶条件筛选和优化。【结果】本文成功构建重组质粒pET28a-hspB并纯化获得达到结晶纯度的HspB蛋白。结晶条件初筛和优化后获得可培养HspB蛋白晶体的条件为0.2 mol/L NaCl、0.1 mol/L HEPES pH 7.5、1.1 mol/L(NH4)2SO4、4°C、加晶种。【结论】HspB蛋白纯化体系的构建和结晶条件的初步研究为从结构生物学的角度进一步研究HspB结构与功能的关系、定向进化提高HspB催化效率奠定了基础。     

载脂蛋白AI对HDL生成影响的研究新进展

载脂蛋白AI(apolipoprotein A-I,apoA-I)是高密度脂蛋白(high-density lipoprotein,HDL)的主要蛋白成分,其中两性α-螺旋是apoA-I相应功能的结构基础。ApoA-I分子N-端是动态的四螺旋束结构,C-端形成无规则的螺旋结构,是介导蛋白质与磷脂结合的功能域。两分子apoA-I呈反向平行的双带结构环绕磷脂双分子层形成圆盘状HDL,而球状HDL表面的apoA-I分子则形成三叶草结构。ATP结合盒转运蛋白A1(ATP-binding cassette transporter A1,ABCA1)介导apoA-I与磷脂及胆固醇相互作用形成新生HDL,参与胆固醇的逆向转运过程。ApoA-I、HDL作为抗动脉粥样硬化的主要作用靶标,深入了解其分子结构与功能、构象变化和相互作用及其影响脂质代谢平衡的机制对抗动脉粥样硬化药物的研发及其应用具有重要意义。     

不同林分起源的相容性生物量模型构建

目前为止已有不同方法构建生物量相容性模型,但不同林分起源的生物量相容性模型很少报道。针对此问题,以150株南方马尾松(Pinus masson iana)地上生物量数据为例,利用比例平差法和非线性联立方程组法建立不同起源地上生物量以及干材、干皮、树枝和树叶各分项生物量相容的通用性模型。根据分配层次不同,两种方法又各自考虑总量直接控制和分级联合控制两种方案。从直径、树高、地径、枝下高和冠幅5个林分变量中选取不同的变量构建一元、二元和三元生物量模型,并利用加权最小二乘回归法消除生物量模型中存在的异方差性。结果为:比例平差法和非线性联立方程组法都能有效保证各分项生物量总和等于总生物量,模型预测精度满足要求。总体而言,非线性联立方程组方法比比例平差方法精度高,同时两种方法中总量直接控制法比分级联合控制法预测效果好;各分项生物量模型本身作为权函数能有效消除异方差;各分项对应的三元生物量模型预测精度最高,其次是二元生物量模型,最低是一元生物量模型,但这些差异不是很大。总之,为权衡考虑模型预测精度和调查成本,建议把直径和树高作为协变量利用总量直接控制非线性联立方程组法对不同起源生物量建模。     

张掖灌区玉米农田生态系统CO_2通量的变化规律和环境响应

采用涡动相关法对张掖灌区玉米农田生态系统生长季(6—9月)CO2通量进行了连续观测,分析了玉米农田生态系统CO2通量变化特征及其对环境的响应。结果表明:CO2通量具有明显的日变化特征,白天以碳吸收为主,夜间以碳排放为主,CO2吸收的最大值出现在灌浆期,峰值为-1.426 mg·m-2·s-1;农田生态系统在4个生育期均表现为碳吸收,但吸收CO2能力存在显著差异,日吸收总量灌浆期拔节期成熟期苗期。利用Michaelis-Menten方程和指数曲线拟合方法,分别分析了光合有效辐射对白天CO2通量的影响,及温度对夜间生态系统呼吸的影响。结果表明:白天CO2吸收强度随着光合有效辐射的增大而增大,在低光阶段,光照是控制光合作用的主导因子,之后随着光合有效辐射的增大,净吸收量增加减缓;玉米的光量子利用效率变化范围为0.00098～0.0022 mg·μmol-1。夜间生态系统呼吸与温度呈显著的指数关系,不同生育期的主导因子不同,苗期土壤温度是主导因子,其余生育期气温是主导因子。     

食盐加碘后甲状腺摄 ~（131）I率的变化及其与尿碘的关系

目的：了解食盐加碘后健康人及甲亢患者甲状腺摄131I率的变化及其与24小时尿碘含量的相关性,探讨甲状腺摄131I率与碘营养状况的关系。方法：对比食盐加碘前后健康体检者及甲亢患者甲状腺摄131I率的变化,分析健康体检者甲状腺摄131I率、晨尿碘浓度及经肌酐校正的尿碘含量与24小时尿碘含量的相关关系。结果：健康人及甲亢患者食盐加碘后3、6及24小时甲状腺摄131I率均显著降低;健康体检者甲状腺摄131I率与24小时尿碘含量呈负相关（r=-0.7651,P〈0.001）,晨尿碘浓度与24小时尿碘含量呈正相关（r=0.8231,P〈0.001）,经肌酐校正的尿碘含量与24小时尿碘含量呈正相关（r=0.9054,P〈0.001）。结论：食盐加碘对甲状腺摄131I率有显著影响,应重新确立甲状腺摄131I率的正常范围及甲亢的诊断标准;经肌酐校正的尿碘含量较晨尿碘浓度能更准确地反映碘营养状况;甲状腺摄131I率可作为评估个体碘营养状况的指标,可以稳定地反映近期的碘营养状况。     

重组HSV-Ⅱ病毒疫苗的微载体悬浮培养生产工艺研究

经过重组减毒的Ⅱ型溶瘤单纯疱疹病毒(rHSV-Ⅱ)在体外具有良好的溶瘤效果,并对小鼠体内B16R黑色素瘤内注射具有较高的疗效。重组HSV-Ⅱ病毒作为高效的新型溶瘤病毒疫苗有望用于肿瘤的临床治疗。Vero细胞是广泛应用于病毒疫苗生产的细胞基质,该细胞系对多种病毒敏感且产量高,其微载体培养安全,开发重组HSV-Ⅱ溶瘤病毒肿瘤疫苗的Vero细胞微载体反应器悬浮培养生产工艺具有重要的意义。以自主开发的低血清培养基为基础,对Vero细胞的反应器微载体球转球转移放大工艺及在位消化放大培养工艺进行了研究和比较,以新老微载体比3:1的比例成功实现了微载体球转球转移放大,建立了可实现至少四次/级连续放大的球转球转移放大培养工艺,可用于工业化生产过程。在此基础上,初步建立了以Vero细胞为基质的重组HSV-Ⅱ病毒疫苗反应器微载体无血清悬浮培养生产工艺,最大病毒滴度可达到6.62 lgTCID50/ml以上。为以Vero细胞为基质的无血清病毒疫苗规模化培养提供了一种简便、高效的工艺方法。     

基于PubMed数据库毛孢子菌病临床研究文献计量学分析

目的分析国际毛孢子菌病文献概貌,了解毛孢子菌病临床相关研究现状,为更好地开展毛孢子菌临床研究提供思路和依据。方法利用汤森路透TDA软件分析PubMed数据库收录的毛孢子菌病临床相关文献的时间、国家、期刊、作者和高频主题词分布,并获得作者合作网络图。结果临床毛孢子菌病相关文献始于1970年,经过1981～1992年的快速增长期后,近年来数量增长不明显。日本在临床毛孢子菌病研究领域具有领先优势,美国、印度、巴西、法国和中国内地发文量也较多。刊载毛孢子菌病临床研究文献最多的期刊是《日本胸部疾病杂志》（Nihon Kyobu Shikkan Gakkai Zasshi,Japa—nese Journal of Thoracic Diseases）和《临床微生物学杂志》（Journal of Clinical Microbiology）。发文量最多的作者分别是熊本大学医学部的Ando M、Araki S和琦玉医科大学的Sakata T。毛孢子菌病的高频主题词涉及毛孢子菌病的诊治、宿主免疫和毛孢子菌致病机制等。结论日本和美国仍是相关领域的研究大国,但近5a来,更多的中国科研团队加入到这一研究领域,提高了我国学者的学术影响力。侵袭性毛孢子菌病的诊治是临床毛孢子菌病研究的主要关注点。     

308nm准分子光联合中药擦剂治疗白癜风的临床疗效观察

目的:观察308 nm准分子光联合外用复方补骨脂酊治疗内蒙古地区稳定期白癜风的疗效。方法:选取稳定期白癜风患者60例,共133片皮损。将其随机分成2组:A组单用308 nm准分子光治疗;B组给予308 nm准分子光联合复方补骨脂酊治疗。复方补骨脂酊治疗每日两次,光疗频率每周1次,10次一疗程,共2疗程,每次疗程结束后拍照、疗效评价,记录结果。结果:治疗10次后,A组的有效率和显效率分别为17.46%和4.76%,B组分别为20.00%和5.71%;治疗20次后,A组的有效率和显效率分别为46.03%和23.81%,B组分别为65.71%和42.86%。两组治疗10次后的有效率和显效率比较差异均无统计学意义(P0.05),治疗20次后的有效率和显效率均显著高于其治疗10次后(P0.05),B组治疗20次后的有效率和显效率均显著高于A组(P0.05)。所有患者的皮损均未出现严重不良反应。结论:308 nm准分子光联合复方补骨脂酊外用可提高内蒙地区白癜风患者颈、躯干、四肢的非关节、非肢端及非骨隆起部位的白斑的疗效,且安全性较好。     

锁定钢板内固定治疗复杂胫骨平台骨折的疗效观察

目的:探讨锁定钢板内固定治疗复杂胫骨平台骨折的临床疗效。方法:选择2011年2月~2013年2月期间我院收治的复杂胫骨平台骨折92例,按照数字随机法分为观察组(50例)和对照组(42例)。观察组采用锁定钢板内固定治疗;对照组采用传统钢板固定治疗,所有患者术后随访1年以上,观察两组患者临床疗效。结果:①两组患者均顺利完成手术,观察组住院时间、骨折愈合时间和完全负重时间显著低于对照组(P0.05)。②治疗后两组患者胫骨平台后倾角(Posterior tibial angle,PA)、膝关节活动度逐渐升高,内翻角(Tibial plateau angle,TPA)逐渐降低(P0.05),治疗6、12个月观察组PA、膝关节活动度显著高于对照组,TPA显著低于对照组(P0.05)。③所有患者术后随访1年,均获得满意随访。观察组膝总有效率为86.0%;对照组总有效率为66.7%,观察组膝关节总有效率显著高于对照组(P0.05)。结论:锁定钢板内固定治疗复杂胫骨平台骨折具有固定牢靠,骨折愈合时间短,愈合率高等特点,其临床效果较好。