DADS对人小细胞肺癌NCI-H446 细胞系增殖抑制的研究*

摘要目的：研究二烯丙基二硫（diallyl disulfide，DADS）对人小细胞肺癌NCI-H446细胞增殖的抑制作用，并探讨其作用机制。方 法：体外培养NCI-H446 细胞，采用MTT、细胞计数实验方法检测DADS 抑制NCI-H446 细胞增殖；通过HE 染色和AO-EB 荧光 染色方法，观察DADS 处理后NCI-H446 细胞的形态学改变。结果：MTT 结果显示：DADS作用于NCI-H446 细胞48 h后，代谢 MTT 的能力明显降低，显示出较强的细胞毒性反应，IC50值介于20～40 滋g/ml之间。细胞计数结果表明：DADS 作用于NCI-H446 细胞后，随DADS 浓度增加NCI-H446 细胞倍增时间延长。HE染色显示：NCI-H446 细胞经DADS处理24 h后，与对照组相比，细 胞体积变小，胞浆丰富,细胞核变小，染色变淡。AO-EB 荧光染色显示：NCI-H446 细胞经DADS处理24 h后，与对照组相比，细胞 皱缩、呈圆形，胞质黄色或橘红色，细胞核或细胞质内可见致密浓染的黄绿色或橘红色荧光，并可见橘红色碎片且随DADS 浓度 增加，随DADS浓度增加细胞密度逐渐减少。结论：DADS 能抑制体外培养的NCI-H446 细胞增殖，作用效果与药物浓度及作用 时间相关。     

细胞色素c在后处理抗大鼠肠缺血-再灌注损伤细胞凋亡中的变化

本文旨在研究细胞色素c在后处理抗大鼠肠缺血-再灌注损伤细胞凋亡中的变化。将Sprague-Dawley大鼠32只随机分为4组(n=8):假手术(Sham)组、缺血-再灌注(I/R)组、缺血预处理(IPC)组、缺血后处理(IPOST)组。应用激光共聚焦扫描显微镜检测各组大鼠肠黏膜细胞线粒体跨膜电位的变化。用Western blot方法检测肠黏膜细胞线粒体内细胞色素c及caspase-3表达的变化。末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记法(TUNEL)和DNA琼脂糖凝胶电泳方法检测大鼠肠黏膜细胞凋亡发生情况。实验结果显示,与缺血-再灌注组相比,缺血后处理组大鼠肠黏膜细胞线粒体跨膜电位显著升高(P0.05),线粒体内细胞色素c蛋白表达水平显著增加(P0.05),caspase-3蛋白表达降低(P0.05),细胞凋亡率明显降低(P0.05)。缺血后处理组与缺血预处理组相比各项指标差异无统计学意义(P0.05)。上述结果提示缺血后处理可通过阻止线粒体释放细胞色素c抑制凋亡发生,减轻大鼠肠缺血-再灌注损伤。     

云南省玉龙雪山自然保护区鸟类资源调查

2007年9～11月和2008年4～5月,对云南省丽江玉龙雪山自然保护区的鸟类资源进行了调查,共记录鸟类184种,结合中国科学院昆明动物研究所鸟类标本室收藏的该地区标本和文献记录的种类,保护区内共记录鸟类330种(另13亚种),隶属47科(另4亚科),18目,占云南省所录鸟类种数848种的38.92%,全国鸟类种数1329种的24.83%.其中国家一级保护物种1种,二级保护物种29种.黑眉长尾山雀Aegithalos iouschistos和大嘴乌鸦Corvus macrorhynchos为保护区内的优势种类.保护区记录的鸟类有留鸟230种和亚种,占所录鸟类种和亚种数的67.05%.区系成分以东洋界物种为主,有182种,占繁殖鸟类总种数的66.42%.亚区级区系分析表明保护区的鸟类以西南山地亚区的种类为主.结合该区鸟类生境分布的特点,提出云南松高山松林、针阔混交林和寒温性暗针叶林的保护是保护工作的重点.     

人多瘤病毒BK株VP1的C端阳电荷残基对病毒样颗粒形成的影响

VP1是人多瘤病毒BK株的主要结构蛋白,使用重组杆状病毒表达系统在体外表达 VP1 可以形成病毒样颗粒(VLP)。为了探讨VP1的C末端阳电荷残基R 281, R 285, K 288, R 290, R 292, K 293, R 294,和 K297 对VLP形成和其结合DNA的影响,我们分别改变将阳电荷残基变成丙氨酸,然后表达 VP1 蛋白。结果发现用丙氨酸替代K 288,R 290,R 292,K 293,R 294后仍能形成VLP, 但与野毒株相比,在 VLP分泌以及衣壳蛋白与细胞DNA的结合方面有差异。有趣的是,R 281被丙氨酸取代后仅在细胞中形成少量的 VLP,而 R 285 被丙氨酸取代后不能形成VLP。该研究证实阳电荷氨基酸残基 R 281 和 R 285 是形成 VLP所必须的,K 288、R 290、R 292、K 293、R 294和K 297则影响VLP和DNA的结合。     

受体品种、体重及移植季节对杜泊羊胚胎妊娠率和新生羔羊体重的影响

胚胎移植可以提高家畜良种扩大的速度,但移植成功率会受到很多因素的影响。用6.5～7.5日龄杜泊羊冷冻胚胎作为移植胚胎,研究了季节和受体状况对杜泊羊胚胎移植妊娠率以及出生羔羊生长发育的影响。在比较春秋两季236枚冷冻胚胎的移植效果发现秋季移植的妊娠率(68.6%)显著高于春季(58.5%);春季和秋季移植后出生羔羊的体重,初生时无显著差异;但在30日和60日(断乳)时,春季移植的羔羊显著高于秋季。比较不同品种的受体发现,昭通绵羊受体的胚胎移植妊娠率最高,湖羊次之,小尾寒羊最低,但受体羊3种品种间无显著差异;较大受体羊(≥40kg)生产的羔羊出生和30d的体重显著高于较小受体(<40kg);但60d羔羊体重差异不显著,说明受体体重会影响羔羊的出生体重,但是对哺乳期的生长发育影响不大。春季移植出生的羔羊,其早期生长发育情况明显优于秋季。     

产紫杉醇类云南红豆杉内生真菌筛选的研究

采用无菌技术从云南红豆杉中分离得到200余株内生真菌,经过PDA液体培养基发酵后用TLC、HPLC等方法检测,发现其中有一株的胞外分泌物中含有紫杉醇,标号12．3,2。经过形态学鉴别,其属于青霉属（Penicillium）。利用微生物（特别是内生真菌）产紫杉醇是新的途径,该菌株具有进一步研究的价值。     

兔血清中过氧化物酶同工酶在兔分类中的研究

应用聚丙烯酰胺凝胶电泳法（PAGE）对中国白兔、新西兰兔、獭兔血清中的过氧化物酶同工酶进行研究。研究结果表明：这三种兔在血清中的过氧化物酶有着明显的区别,可以利用过氧化物酶的区别对兔种进行分类鉴定。本方法可为过氧化物酶同工酶在动物分类鉴定中提供参考依据。     

北五味子及其不同炮制品中五味子甲素 和乙素的含量测定

目的:测定北五味子及其不同炮制品中五味子甲素、五味子乙素的含量。方法:采用高效液相色谱法,Spherisorb 10ODS1(4.6mm×250mm,10μm),以甲醇-水(70:30)为流动相,检测波长为254nm。线性范围0.1~0.5μg,相关系数为0.995.平均回收率为100.3%和100.4%,RSD=0.87%和2.85%(n=5)。结果:五味子甲素和乙素在生品、醋炙、炒制、酒炙、蒸炙、蜜炙品中的平均含量分别为0.13%,0.064%,0.052%,0.064%,0.11%,0.13%和0.21%,0.298%,0.238%,0.302%,0.216%,0.214%。结论:方法准确,快速,重现性好,可用于五味子各种炮制品的质量评价。