HL-1细胞培养及房颤细胞模型的建立

目的:利用HL-1细胞建立快速起搏模型,对心房颤动(atrial fibrillation,AF)早期的重构现象进行初步研究。方法:培养HL-1细胞,建立快速电场刺激起搏细胞模型,利用全细胞膜片钳技术记录刺激前后HL-1细胞的动作电位周期,透射电镜观察细胞超微结构的变化。结果:将细胞接种于培养皿中,72 h后细胞呈融合状态,全细胞膜片钳记录培养HL-1细胞及经电场刺激(600次/min,1 V/cm)24 h后的心房肌细胞的动作电位周期,动作电位周期分别为106 ms,45 ms,刺激前后差异有统计学意义(P0.05)。透射电镜观察到刺激后HL-1细胞超微结构发生去分化改变。结论:经快速起搏24 h后,HL-1细胞发生了电及结构重构;利用HL-1细胞建立快速起搏的房颤模型,可以对房颤早期的重构机制进行研究。     

两种保暖方式对早产儿住院期间生命体征及体重的影响

目的:探讨两种保暖方式对早产儿住院期间生命体征及体重的影响。方法:选择2011年5月至2012年12月在我院住院治疗的150例早产儿作为研究对象,采用随机抽取序号的方式分为观察组和对照组各75例。观察组采用婴儿培养箱对其进行保暖,对照组采用远红外辐射保暖台对其进行保暖,分别对两组早产儿在住院期间的生命体征及体重进行监测、记录、统计、分析和比较。结果:观察组早产儿第一周及第二周体重增长情况均明显优于对照组,两组比较差异有统计学意义(P0.05)。结论:对早产儿及时采用婴儿培养箱的方式进行保暖,能稳定早产儿的生命体征,降低伤残率,有利于早产儿的生长发育。     

麻醉剂七氟烷与地氟烷对患者中性粒细胞和T细胞的影响研究

目的:探讨腹腔手术过程中七氟烷与地氟烷麻醉对患者中性粒细胞和T细胞的影响。方法:随机选取85例年龄在20-60岁的患者,将患者随机分成二组,分别使用七氟烷与地氟烷进行麻醉。在麻醉前30 min和麻醉后2-24 h分别检测患者白细胞、淋巴细胞、中性粒细胞的数量、T辅助淋巴细胞(CD4)、细胞毒性T淋巴细胞(CD8)、自然杀伤性淋巴细胞、激活T淋巴细胞的百分比,CD4/CD8的比值,血浆皮质醇含量。结果:二组患者白细胞与中性粒细胞麻醉24 h后显著升高(P0.01)。地氟烷组中性粒细胞数量显著高于七氟烷组(P0.05)。CD4细胞的百分比在七氟烷组中无显著改变,在麻醉后2h,地氟烷组(31.93%[6.65%])同基础值(36.41%[6.92%])相比显著降低(P0.05),24 h后进一步下降(30.52%[8.01%])(P0.01)。七氟烷组CD4/CD8比值一直无变化,但地氟烷组在麻醉2 h降低(1.51[0.52]),24 h明显升高(1.82[0.72])(P0.05)。结论:与地氟烷相比,七氟烷对中性粒细胞群与T细胞群的影响较小。     

我国城乡地区卫生人力资源分布的公平性分析

目的:了解我国卫生人力资源的配置现状及其变化趋势,尤其是卫生人力资源在城乡地区的分布状况,评价我国城乡卫生人力资源配置的公平性。方法:对2004-2011年的相关数据进行统计描述,用基尼系数测量卫生资源配置的公平程度及其变化。结果:农村地区卫生人力资源在数量上仍然处于极大的劣势,卫生人力构成以中专为主,中专及以下学历人员占大多数,人员素质相对城市有较大差距,提供卫生服务的能力相对薄弱。我国2004年到2011年我国卫生人力资源量逐年增加,各项指标较2004年的增幅都达到了10%以上,每千人口卫生技术人员数稳步上升,但是城镇和乡村上升速度相差巨大。卫生人力资源基尼系数按地理分布在0.13~0.25之间,连续5年一直上升。结论:我国卫生人力资源配置总体上均衡,但是公平性在下降,医师的公平性优于护士,城乡差距较大,应该重点加强农村经济发展,改善医疗卫生条件,建立健全农村卫生人才队伍培养机制。     

发色基团辅助激光失活技术的研究方法及其应用进展

发色基团辅助激光失活(CALI)技术通过目标蛋白与能够吸收光能量继而产生大量氧自由基的荧光基团相结合,以干扰目标蛋白的功能.该技术始于20世纪80年代,目前已经发展出很多新的方法,对许多生命科学领域的研究起到了重要的推动作用.本文结合国内外最新的研究进展,针对CALI的作用原理、技术方法和实际运用等方面进行简要综述,并展望其在临床上的潜在应用价值.     

绝经后女性高尿酸血症患者性激素结合球蛋白与血尿酸的相关研究

目的：研究绝经后女性高尿酸血症患者血浆中性激素结合球蛋白（sexhormonebindingglobulin,SHBG）水平与血尿酸水平的相关性。方法：选取绝经后女性404例,其中高尿酸血症组204例,正常对照组200例,测量所有研究对象体重、身高、腰围、臀围、收缩压（SBP）、舒张压（DBP）,并计算体重指数（BMI）和腰臀比（WHR）,检测血尿酸（UA）、空腹血糖（FBG）、总胆固醇（TG）、甘油三酯（TC）低密度脂蛋白（LDL）、高密度脂蛋白（HDL）、雌激素（E2）、雄激素（T）、空腹胰岛素（INS）及SHBG,并计算胰岛素抵抗指数（Homa-IR）。结果：与绝经后女性尿酸正常者相比,高尿酸血症的患者UA,WHR,TC,FBG,INS,Homa-IR明显升高（P〈0．01）,DBP,WAIST和LDL升高（P〈0．05）,SHBG水平明显下降（P〈0．01）;SHBG与INs、uA、TG呈显著负相关（P〈0．05）,SHBG与E2呈显著正相关P〈0．01）。结论：绝经后女性中高尿酸血症患者的低血浆SHBG水平与高血尿酸水平显著相关,血浆SHBG水平下降与胰岛素抵抗可能高度相关,低sHBG可能作为绝经后女性患高尿酸血症的高危因素。     

bmy基因敲除对解淀粉芽孢杆菌Q-426溶血性及抗菌活性的影响

Iturin家族环脂肽对于红色毛癣菌等病原真菌具有较强的抑菌活性,有潜力成为治疗皮肤疾病的新型抗真菌药物。解淀粉芽孢杆菌Q-426菌株能够产生环脂肽fengycins和iturin家族的bacillomycin D,但该菌株发酵液具有溶血活性。为确定bacillomycin D是否为引发溶血作用的主要物质,本文利用同源重组基因敲除技术,构建解淀粉芽孢杆菌bmy基因缺失菌株,抑制bacillomycin D的合成,研究对其溶血性及抗菌活性的影响。突变菌株发酵液中未检测到bacillomycin D产生,且发酵液的溶血性及抗菌活性明显减小,表明bacillomycin D与该菌的溶血活性及抑菌活性密切相关。     

AdEasy重组腺病毒系统对Ad-HIF1α的构建和鉴定

目的:采用AdEasy重组腺病毒系统构建重组腺病毒Ad-HIF1α并进行鉴定。方法:使用高保真PCR从EST克隆中扩增HIF1α基因编码区,并用限制性内切酶BamH I和Xba I对PCR片段限制性酶切,用T4 DNA连接酶将其连接至同样经BamH I和Xba I限制性酶切的穿梭载体pAdtrace-TO4,构建穿梭载体pAdtrace-HIF1α;将pAdtrace-HIF1α与腺病毒骨架质粒pAdEasy-1在细菌BJ5183中同源重组,得到重组腺病毒质粒pAd-HIF1α;pAd-HIF1α经Pac I酶切后转染至E1表达包装细胞系HEK293中进行HIF1α基因表达腺病毒包装,重复扩增,氯化铯密度梯度离心法纯化,获得高滴度Ad-HIF1α;感染干细胞株C3H10T1/2,通过荧光蛋白的表达了解其感染效率,并应用PCR及Western blot验证目的基因的表达,并通过检测下游靶基因VEGF的表达,了解该载体表达的目的蛋白的生物活性。结果:重组腺病毒质粒pAd-HIF1α,经PCR及酶切分析验证构建正确;在HEK293中进行HIF1α基因表达腺病毒包装,经反复冻融4次使细胞裂解,获得高滴度重组腺病毒载体;通过红色荧光蛋白(Red fluorescence protein,RFP)表达,观察到Ad-HIF1α能够高效感染C3H10T1/2细胞,并通过PCR证实了HIF1α在C3H10T1/2细胞较对照组明显高表达;在感染Ad-HIF1α的C3H10T1/2细胞中,HIF-1α下游靶基因血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的表达明显增高,证实表达的目的蛋白具有生物活性。结论:应用AdEasy重组腺病毒系统成功构建Ad-HIF1α,并证实其具有生物活性,为后续研究奠定了基础。     

作物种质资源品质性状鉴定评价现状与展望

作物种质资源品质性状鉴定评价是作物种质资源研究的重要方面,是深入挖掘、广泛利用作物种质资源的基础。本文对近年来作物种质资源品质性状鉴定评价情况进行了回顾,总结了鉴定评价工作取得的主要进展:完成了近20万份的作物种质资源(约占保存总数的50%)主要营养品质性状的初步鉴定评价;作物种质资源品质鉴定评价内容涉及面广、鉴定的品质性状变异性大、多样性丰富;提高了作物种质资源品质性状鉴定评价标准化程度。此外还介绍了国际上有关品质性状鉴定的发展趋势,并对未来国内作物种质资源品质性状鉴定评价提出了意见和建议。     

趋化因子MCP-1、MIP-1alpha的表达与TAM 计数在胆囊癌中的 临床病理意义

目的：检测胆囊腺癌组织中趋化因子MCP-1 和MIP-1-alpha的表达、TAM 计数并探讨其临床病理意义。方法：收集中南大学湘 雅二医院及湖南省人民医院近五年胆囊腺癌手术切除标本36 例及慢性胆囊炎手术切除标本10 例,采用原位分子杂交方法检测 MCP-1 和MIP-1alpha的表达,免疫组化法进行TAM计数。结果：胆囊腺癌组织中MCP-1、MIP-1alpha mRNA表达阳性率及评分均明显 高于慢性胆囊炎(P<0.01);高分化胆囊腺癌中二者的阳性率及评分均低于低分化胆囊腺癌,其中MCP-1 mRNA 比较有显著性差异 (P＜0.05);MCP-1、MIP-1-alpha-mRNA的表达呈显著正相关。胆囊腺癌组织MCP-1 mRNA表达阳性率及其评分与侵犯胆总管及发生 淋巴结转移显著相关;MIP-1alpha-mRNA表达阳性率及其评分与侵犯肝脏显著相关。胆囊腺癌组织中,TAM 计数(24.89± 0.84)明显 高于慢性胆囊炎组织(16.19± 0.66),有显著性差异(P<0.01)。TAM与MCP-1、MIP-1alpha mRNA 表达评分值均呈显著正相关(r 分别为 0.580,0.567)。MCP-1mRNA 与MIP-1alpha-mRNA评分值之间呈显著正相关(r＝0.638)。结论：MCP-1、MIP-1alpha的表达增加及TAM 计 数升高可能调控和影响胆囊癌的发生和发展,MCP-1、MIP-1琢可能促进TAM向胆囊癌组织迁移浸润。