应用亚硫酸氢盐修饰后PCR联合TA克隆测序对E-cadherin启动子区甲基化水平的检测

E-cadherin是一种细胞粘附因子,通过增强细胞之间的粘附而起到抑制肿瘤转移的作用.Ecadherin基因启动子区的高甲基化是导致其在众多肿瘤细胞中表达下调甚至缺失的主要原因之一.本实验首先抽提SGC-7901细胞(胃腺癌细胞)、A549细胞(肺腺癌细胞)、MCF-7细胞(乳腺癌细胞)等3个肿瘤细胞株的全基因组DNA,然后对抽提的DNA进行亚硫酸氢盐修饰和纯化回收,根据修饰后的DNA序列设计引物并对其进行PCR扩增.然后将PCR扩增产物与pUC-T TA载体连接并转化入感受态大肠杆菌DH5α中进行培养,对筛选出的含有阳性重组子的菌落进行测序.测序结果显示,3个肿瘤细胞株的E-cadherin基因启动子区的CpG岛都呈现了高度的甲基化,亚硫酸氢盐的修饰效率达到了99.2%.综上研究表明,亚硫酸氢盐修饰后PCR(BSP)联合TA克隆测序可以对肿瘤细胞某基因启动子区CpG岛的甲基化水平进行精确量化,研究所使用的3个肿瘤细胞株均可作为研究肿瘤细胞E-cadherin基因甲基化的细胞模型.     

荒漠绿洲过渡带沙拐枣种群结构及动态特征

沙拐枣(Calligonum mongolicum)作为黑河中游荒漠绿洲过渡带的一种主要固沙植物种,它对于维护荒漠绿洲过渡带生态系统的稳定性起到了至关重要的作用。通过样地调查和数据统计,绘制了沙拐枣种群的径级结构图,在此基础上编制了种群的特定时间生命表,分析了存活曲线、死亡率曲线等重要参数,并运用时间序列模型预测种群数量动态,以揭示荒漠绿洲过渡带沙拐枣种群的结构及动态特征。结果表明:沙拐枣种群属于增长型,Vpi'=0.0233,表明该种群趋近于稳定型,但沙拐枣种群Ⅰ、Ⅱ龄级个体数目少于Ⅲ龄级的个体数目;存活曲线趋于Deevey-Ⅱ,各龄级种群有相近的死亡率;时间序列预测分析表明,在未来2、4、6、8个龄级时间后沙拐枣老龄个体逐渐增多,幼龄株数则有所降低,种群稳定性长期维持困难,因此,适当的人工辅助恢复和现有植株及生境的保护是保持沙拐枣种群自然更新和种群恢复的关键。     

五指山小型猪单个核细胞表面α Gal抗原表达差异的分析

利用猪的器官为挽救脏器终末衰竭病人而进行的异种移植是有效救治病人的途径之一.由于猪细胞表面存在的α1,3半乳糖会引起超急性免疫排斥反应,导致移植器官最终被移植受体排斥.除人类和旧大陆猴外,所有哺乳动物细胞表面都有αGal半乳糖表达,但个体间表达量存在显著差异.为研究近交系五指山小型猪细胞表面α1,3半乳糖表达的个体差异,本实验利用FITC-isolectin进行荧光标记,通过流式细胞术以及激光共聚焦分析,对14例5月龄猪样本外周血单个核细胞表面的α1,3半乳糖水平进行检测.利用猪肾上皮PK15细胞确定FITC-isolectin标记的最适浓度为25ng/μl(细胞标记效率大于85%).结果显示,14头猪外周血单个核细胞表面α1,3半乳糖的表达差异范围在1.25～2.09倍之间,远低于普通非近交系猪的个体差异.本研究为利用近交系五指山小型猪作为异种器官移植的研究材料提供了基础数据.     

提高粳稻花培诱导效率的探讨

实践证明,水稻花培育种是一种具有许多独特优点的育种新途径,而花粉植株的诱变效率又是花培育种的关键环节。在这方面人们做了许多工作,看出一些趋势,为实践提供一定的依据。然而这些工作多是从不同环节和侧面上来报道的,在实际应用上还感到不够理想。为此,我们又重新做了一些粳稻花培试验,结合以往的有关工作,做如下简要探讨,供参考。几年来共用各种类型接种材料100余份。接种花药小孢子发育时期为单核中、晚期,分     

拟鹅观草属6种2亚种和鹅观草属3种植物的核型研究

对拟鹅观草属Pseudoroegneria 6种2亚种和鹅观草属Roegneria 3种植物的核型进行了研究,核型公式如下：P. spicata (Pursh) A. Lve,2n=2x=14=12m (2sat)+2sm; P. strigosa ssp. aegilopoides (Drobov) A. Lve,2n=2x=14=12m (2sat)+2sm; P. libanotica (Hackel) A. Lve,2n=2x=14=10m+4sm (4sat); P. stipifolia     

光照强度对紫茉莉生长和镉积累的影响

采用土培实验研究了25mg／kg镉处理下全光照（HL）、50％全光照（ML）和10％全光照（LL）三种生长光强对紫茉莉生长、光合作用和镉积累相关指标的影响,结果表明,紫茉莉对镉具有较高的耐性,ML对紫茉莉的生长最为有利。镉胁迫下紫茉莉净光合速率和最大光化学效率降低,暗呼吸速率增高,生物量减小。特别在高光强条件下。ML植株镉积累量最大,对镉污染土壤的植物修复效果较好。     

萤光素酶报告基因在病毒学研究中的应用

萤光素酶是一类在氧气存在下能催化其底物特异性发光的酶,检出灵敏度高、特异性强。萤光素酶催化底物发光因无须外源光的激发,避免了非特异性干扰,具有其他报告基因不可替代的优势。萤光素酶基因作为报告基因已成为医学科学研究领域的重要标记工具,具有良好的应用前景。我们简要综述了萤光素酶报告基因在病毒学研究中的应用进展。     

连翘种子挥发油抑真菌及在猪油脂酸败过程中的作用

利用滤纸片法观察不同浓度连翘种子挥发油对啤酒酵母、产黄青霉以及黑曲霉的抑制作用,并测定了其最小杀菌浓度;利用猪油体系对连翘种子挥发油在油脂酸败过程中的作用进行了初步探索。结果表明连翘种子挥发油对这三种真菌均有很好的抑制作用,最小杀菌浓度分别为:啤酒酵母为3.91×10-4mL/100 mL,产黄青霉为7.81×10-4mL/100 mL,黑曲霉为3.13×10-3mL/100 mL;而连翘种子挥发油对猪油具有促进其氧化的作用。     

细菌的细胞结构

细菌细胞体积很小,一般只不过1—3立方微米。因此,其细胞结构在光学显微镜下难以观察到。随着电镜和超薄切片技术的发展,对细菌细胞结构已经有了比较清楚的了解。细菌细胞结构的分化与真核细胞不同,由于空间的局限,主要是分子水平的分化。细胞的基本结     

Rhaphidopteris一新种及其分类位置的探讨

河南义马中侏罗世义马组所产Ｒｈａｐｈｉｄｏｐｔｅｒｉｓｃｏｒｎｕｔａｓｐ．ｎｏｖ．以其叶下部规则地两歧分叉一次，两个分枝歧轴式多次分枝成三次羽状，脉间具树脂体、气孔器主要分布于下表皮等特征区别于该属的其它已知种。文中对Ｒｈａｐｈｉｄｏｐｔｅｒｉｓ属的含义作了详细讨论，并对某些种的归属提出修改意见。Ｒｈａｐｈｉｄｏｐｔｅｒｉｓ属历来被归于种子蕨纲，但某些种具有多次两歧分叉的叶形和叶片含有溶生树脂体等性状似乎更接近银杏目。接照本文所厘订的含义。