致病性与无致病性茄科罗尔斯通氏菌转录组测序与分析

为了挖掘茄科罗尔斯通氏菌（Ralstonia solanacearum）致病相关基因,分别提取致病性（RS+）和无致病性（RS-）茄科罗尔斯通氏菌的总RNA进行转录组测序。两组测序数据经组装后得到5 111条Contigs,RS-和RS+对比发现779条差异表达基因（DEGs）,其中上调表达376条,下调表达403条。功能注释显示,这些DEGs主要集中在氨基酸代谢、膜转运、细胞运动和翻译等途径。信号通路富集显示,茄科罗尔斯通氏菌对寄主的响应由众多信号通路共同参与,其作用方式可能包括增强细菌趋化性、强化鞭毛组装能力、提高细菌分泌系统、上调双组分信号转导系统、调整MAPK信号通路和增强氨基酸代谢等。转录组测序还发现许多毒力基因,其中茄科罗尔斯通氏菌Ⅲ型分泌系统的hrp基因簇中的23个基因,有16个在无致病性茄科罗尔斯通氏菌中下调表达。随机挑选4个DEGs进行qPCR分析,荧光定量结果与测序数据基本一致,说明基于转录组分析DEGs的表达较为可靠。研究为进一步深入探究茄科罗尔斯通氏菌致病分子机理提供参考。     

珍稀药用石斛内生菌研究进展

药用石斛是我国传统名贵中药材,具有重要的药用价值,由于人为和环境等因素,药用石斛资源已变得极其匮乏,难以满足市场的需求。药用石斛内生菌资源丰富,在与宿主石斛长期共生的过程中,对药用石斛的生长发育、环境的适应、活性代谢产物的积累等方面具有很强的促进作用。深入研究药用石斛内生菌及其与宿主的关系,对药用石斛生产、资源保护与利用有着重要意义。本文简要概述了药用石斛内生菌资源及其生物学功能,并探讨了存在的问题和未来发展方向,以期为药用石斛内生菌的开发与利用提供参考。     

广西东方蜜蜂遗传多样性分析

[目的]东方蜜蜂Apis cerana是我国重要的经济昆虫,是生态循环中的重要环节,对其进行种群遗传研究能为东方蜜蜂遗传资源的发现、保护和利用提供基础.广西是我国东方蜜蜂重要的产区和分布区之一.[方法]本研究通过33个形态标记、38个微卫星标记和tRNAleu-CO Ⅱ片段的线粒体标记,对广西东方蜜蜂进行遗传分化、特征和遗传多样性分析.[结果]根据形态逐步判别-聚类分析、主成分-聚类分析,微卫星DAPC、Structure分析、聚类树分析、Fst、AMOVA分析,以及线粒体的Fst分析,结果显示广西东方蜜蜂没有发生种群遗传分化.广西东方蜜蜂的微卫星遗传多样性水平在各样点间较为稳定,但线粒体遗传多样性在广西不同样点间的差异较大.线粒体遗传结构易受人为影响,受人为影响小的9个样点线粒体结构中以Acmt01001为主要单倍型;在活框饲养技术发达的北流样点和北海样点,线粒体遗传结构的主要单倍型有2-3种,且Acmt01001比例不是最高的,这意味着人工育王等人为干扰影响较大.[结论]在广西环境基本一致且种群数量较大,基因流通畅的条件下,最远距离约650 km的样点间没有发生遗传分化,意味着东方蜜蜂仅由距离导致遗传分化的距离要大于650 km.根据广西东方蜜蜂遗传多样性现状,对广西东方蜜蜂遗传资源保护和利用提出了建议.     

小鼠前脂肪细胞中AP-2α相互作用蛋白质的分离和鉴定

转录因子AP-2是一个功能重要的基因家族,AP-2α,在协同调控脂肪细胞分化成熟,以及脂肪因子分泌的过程中发挥重要作用.为了阐明其协同调控的机制,本文采用anti-AP-2α抗体免疫共沉淀技术,从小鼠前脂肪细胞313-L1中分离AP-2α相互作用蛋白,然后用基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱结合数据库查询鉴定AP-2a...     

SRA的RNA和蛋白质均有转录辅激活功能

类固醇受体激活物（steroid receptor activator, SRA）是一种 类固醇受体辅激活物.最初的研究认为,SRA只存在RNA形式,不存在蛋白质 形式.但是后来的研究发现,SRA是在RNA和蛋白质两个水平上发挥功能的分 子,其cDNA序列存在687 bp保守的核心区域,该核心区域对其发挥转录共激 活活性是必需的.SRA的RNA形式主要参与核受体的转录共激活作用,其表达 与乳腺癌的发生有很大关系,SRA的蛋白质形式（steroid receptor activator protein ,SRAP）也具有类似的功能.但是不同于RNA形式, SRAP可结合到特定基因的启动子区域,并起到阻遏物的作用.本文对SRA的 特点、表达及功能等方面的最新研究进展及其可能的作用机制与作用形式 进行概述.     

B群链球菌耐药性及红霉素耐药机制的研究

目的探讨荆州地区GBS对常用抗生素的耐药谱和对红霉素的耐药机制。方法采用选择性培养法从阴道和肛门拭子中分离B群链球菌(GroupB Streptococci,GBS),用标准的K-B法对常用的7种抗生素进行药敏试验,然后针对红霉素耐药菌株检测耐药基因ermA、ermB和mefA。结果 176株GBS对头孢噻肟和万古霉素均敏感,对青霉素和氨苄青霉素虽然没有耐药但其中介率达到12.0%。对红霉素的耐药率和中介率分别为35.8%和6.8%;对克林霉素的耐药率和中介率分别为9.5%和12.5%。63株对红霉素耐药的GBS中有22株同时对克林霉素耐药(cMLS型),有41株对红霉素耐药而对克林霉素敏感(M型)。在22株cMLS型耐药的菌株中有18株检测到ermB基因,2株检测到检测到ermA基因。在M型耐药的菌株中有32株检测到mefA基因,6株检测到ermB基因,1株检测到检测到ermA基因。结论青霉素是治疗本地区GBS感染的有效药物,但本地区GBS对红霉素的耐药比较严重。mefA介导的外排机制可能是是本地区分离的GBS对红霉素耐药的主要机制。     

植物来源的镰刀菌抗性相关基因

镰刀菌是植物的重要病原真菌,其入侵植物体可引起镰刀菌病害,给农作物和其它植物的生产带来极大的危害。植物是抗性基因的重要来源之一,随着分子生物学技术的飞速发展,大量的镰刀菌相关抗性基因和抗性候选基因从不同的植物中被分离和鉴定,并应用于抗镰刀菌基因工程育种。对植物来源的镰刀菌抗性基因的种类及其作用机理、抗病候选基因、拟南芥-镰刀菌互作机制及基因调控进行了概述。     

补肾化痰方对去卵巢大鼠血清TRACP5b和β-CTX的影响

目的：观察补肾化痰方对去卵巢骨质疏松症大鼠血清脂联素抗酒石酸酸性磷酸酶5b（tartarte-resistant acid phosphatase 5b,TRACP5b）和血清β-I型胶原C-末端肽（C-terminal telopeptides of type I collagen,β-CTX）水平的影响。方法：SD大鼠行双侧卵巢切除术;术后3月以中剂量和高剂量补肾化痰方灌胃给药;术后5月,双能X线骨密度测定仪检测大鼠股骨骨密度,ELISA法检测大鼠血清TRACP5b和β-CTX含量。结果：补肾化痰方中、高剂量组均能显著提高去卵巢骨质疏松症大鼠的骨密度,降低血清TRACP5b和β-CTX水平。结论：补肾化痰方对去卵巢大鼠骨质疏松症有较好的治疗作用。     

硒蛋白Sep15基因克隆、定点突变及其原核表达

克隆鉴定猪硒蛋白Sep15基因( Sep15 ),将其突变实现原核表达,为以猪为模型研究Sep15功能奠定基础。实验以RT-PCR从猪脾总RNA扩增出含开放阅读框(ORF)至poly(A)共1230 bp的 Sep15 cDNA,3'-非翻译区Sec插入元件为2型,489 bp的ORF及对应氨基酸序列与人相应序列的相似度分别为85.1%和92.7%,ORF含一个硒代半胱氨酸(Sec)密码子TGA,定点突变为半胱氨酸(Cys)的TGC后,经载体pET30转入大肠杆菌BL21(DE3),0.4 mmol/L IPTG诱导表达3 h获得融合表达产物;该产物在Western blot检测中与人Sep15 Sec下游肽段的商品化多抗产生特异性免疫印迹。猪 Sep15 被首次成功克隆并鉴定,其Cys突变体的原核表达产物与人Sep15 C-端抗体存在交叉免疫反应。     

属性层次模型在中医证候诊断中的应用

目的：研究一种综合考虑专家主观经验和机器学习客观规则的中医证候诊断模型。方法：基于属性层次分析模型,提出了一种可以应用于中医证候识别的方法,并编程实现了智能系统。系统融合中、西医多个特征构建决策属性,集成中医专家主观经验和机器学习客观规则联合辨证,实现了离散属性测度、相对属性权和合成属性权的计算方法。结果：构建了中医证候诊断系统,针对肝硬化样本病例学习辨证规则,并识别新样本的证候。结论：通过中医肝硬化数据进行系统的实例验证研究,表明该系统所得辨证结果与临床诊断吻合较好。